Relatório de aulas práticas - Hematologia Clínica

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UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP 
CAMPUS SWIFT – CIDADE/ESTADO 
CURSO: BIOMEDICINA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 
HEMATOLOGIA CLÍNICA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Alunoª: XXXXXXXXXXXXXXXXXXX R.A: XXXXXXXXXX 
 
 
CIDADE 
 2022 
 
 
 
SUMÁRIO 
1. INTRODUÇÃO 3 
2. PROCEDIMENTOS E CONCLUSÕES 4 
3. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 20 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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1. INTRODUÇÃO 
 
A hematologia é a especialidade que estuda as doenças que envolvem o sistema 
hematopoético, ou seja, tecidos e órgãos responsáveis pela proliferação, maturação 
e destruição das células do sangue (hemácias, leucócitos e plaquetas), bem como 
os distúrbios de coagulação. A análise da quantidade e dos aspectos qualitativos 
das células sanguíneas fornece informações fundamentais para avaliar as 
condições de saúde de um indivíduo. A hematologia clínica reúne o estudo de 
algumas importantes doenças relacionadas ao sangue, como as anemias e as 
displasias associadas aos leucócitos. (Antunes, Symara, R., 2020) 
O objetivo das aulas práticas de Hematologia Clínica é auxiliar no aprendizado 
do aluno para sua futura profissão. Ser apto a realizar as técnicas descritas nesse 
relatório. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
2. PROCEDIMENTOS, MATERIAIS E CONCLUSÃO 
 
2.1 AULA 1 – ROTEIRO 1 – Determinação do Hematócrito 
O Hematócrito é um exame rápido, de boa reprodutibilidade e preciso, que requer 
pequena quantidade de sangue para seu processamento, é simples e bastante 
utilizada quando não se dispõe de um equipamento de automação para realização do 
hemograma. O valor do hematócrito é utilizado para o cálculo dos índices 
hematimétricos. 
 
Materiais usados: 
- Sangue de carneiro - Tubo capilar 
- Estante para tubo eppendorf - Papel absorvente 
- Massa de modelar - Descarte para tubos e ponteiras 
 
Equipamento usado: 
- Centrifuga para micro hematócrito 
 
Procedimento: 
Preencher um tubo capilar com ¾ de sua altura de sangue. (figura 1) 
Limpar a parede do capilar com papel absorvente. 
Fechar uma das extremidades com massa de modelar para a oclusão. 
Colocar em uma centrifuga própria para micro hematócrito e centrifugar por 5 
minutos em 10.000 a 12.000rpm. (figura 2). 
Após centrifugar fazer a leitura em tabela de micro hematócrito que acompanha a 
centrífuga. 
Posicionar a base do tubo capilar na marca 0 da escala de leitura e o menisco do 
plasma na marca 100. (figura 3) 
 
 
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Figura 1 Figura 2 
 
 
 
 
 
 
 Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
Figura 3 
 
 
 
 
 
 
Fonte: o autor 
 
Conclusão: 
Paciente com 41% de hematócrito, sem alterações e com resultados dentro da 
normalidade. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
2.2 AULA 1 – ROTEIRO 2 – Determinação de Hemoglobina 
A determinação de hemoglobina é utilizada para o diagnóstico das anemias e 
Policitemias. 
 
Materiais usados: 
- Sangue de carneiro - Kit para determinação da hemoglobina 
- Pipeta automática P1000 - Pipeta automática P20 
- Papel absorvente - Descarte para tubos e ponteiras 
 
Equipamento usado: 
- Espectrofotômetro 
 
Procedimento: 
Identificar 3 tubos de ensaio com as letras B (solução branco), P (solução padrão) 
e T (solução teste). 
Pipetar nos 3 tubos 5ml de Drabkin. (figura 4) 
Pipetar 20µl de solução padrão de hemoglobina e acrescentar no tubo identificado 
com P. (figura 5) 
Pipetar 20µl da amostra do paciente e acrescentar no tubo identificado com T. 
(figura 6) 
Homogeneizar e aguardar 10 minutos a temperatura ambiente. (figura 7) 
Após aguardar 10 minutos fazer a leitura das soluções P e T em espectrofotômetro 
em 540nm previamente calibrado com a solução do tubo B. 
 
Resultados da leitura no espectrofotômetro: 
Absorbância tubo P (padrão) = 0,206 
Absorbância tubo T (teste) = 0,198 
 
 
7 
 
 
Cálculo Hb: AbsT x 10 = 0,198 x 10 = 1,98 = 9,61g/dl 
 Abs P 0,206 0,206 
 
Figura 4 Figura 5 
 
 
 
 
 
 
 
Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
Figura 6 Figura 7 
 
 
 
 
 
 
 Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
Conclusão: 
Resultado abaixo da normalidade, possível erro de pipetagem. 
 
 
 
 
 
2.3 AULA 2 – ROTEIRO 1 – Contagem de Hemácias em Câmara de Neubauer 
A quantificação de hemácias é parte do eritrograma e necessária para os cálculos 
hematimétricos. Pode ser realizada em sistemas automatizados, mas também de 
forma manual em câmara de Neubauer. 
 
Materiais usados: 
- Sangue de carneiro - Tubos de ensaio 
- Líquido de Gower - Pipeta automática P1000 
- Pipeta automática P20 - Estante para tubos 
- Papel absorvente - Descarte para tubos e ponteiras 
 
Equipamento usado: 
- Microscópio 
 
Procedimento: 
Pipetar 4ml da solução de Gower e adicionar em um tubo de ensaio. Limpar a 
parede externa da ponteira com papel absorvente. (figura 8) 
Com o auxílio de uma lanceta e uma pipeta coletar 20µl de sangue. 
Limpar as paredes da ponteira com papel absorvente e transferir a amostra para o 
tubo contendo a solução de Gower. 
Rinsar a pipeta várias vezes para que toda a amostra seja transferida para o 
diluente. 
Homogeneizar a solução final agitando por 30 segundos e aguardar 2 minutos. 
(figura 9) 
Preencher a câmara de Neubauer com o auxílio de um capilar. (figura 10) 
Visualizar em microscópio e contar as hemácias de 5 quadrados centrais e 
multiplicar por 10.000. (figura 11) 
 
 
9 
 
Resultado da contagem: 
Contagem = 480 
Contagem x 10.000 = 4.800.000 = 4,80x10 
 
 Figura 8 – líquido de Gower Figura 9 – diluição amostra 
 
 
 
 
 
 
Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
 
 Figura 10 – preenchendo câmara Figura 11 - hemácias 
 
 
 
 
 
 
Fonte: o autor Fonte: o autor 
Conclusão: 
Hemácias 4,8 milhões/ µL. Valor dentro dos valores de referência. 
 
 
 
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2.4 AULA 2 – ROTEIRO 2 – Contagem de Leucócitos em Câmara de Neubauer 
 
A quantificação de leucócitos é parte do leucograma e necessária para a 
contagem diferencial absoluta. Pode ser realizada em sistemas automatizados ou de 
forma manual em câmara de Neubauer. 
 
Materiais usados: 
- Sangue de carneiro - Tubos de ensaio 
- Líquido de Turk - Pipeta automática P1000 
- Pipeta automática P20 - Estante para tubos 
- Papel absorvente - Descarte para tubos e ponteiras 
 
Equipamento usado: 
- Microscópio 
 
Procedimento: 
Pipetar 400µl do líquido de Turk (diluente) e adicionar em um tubo de ensaio. 
(figura 12) 
Com o auxílio de uma lanceta e uma pipeta coletar 20µl de sangue. 
Transferir a amostra para o tubo de ensaio contendo o líquido de Turk. 
Rinsar a pipeta várias vezes para que toda a amostra seja transferida para o 
diluente.(13) 
Homogeneizar a solução final agitando por 30 segundos e aguardar 2 minutos. 
(figura 13) 
Preencher a câmara de Neubauer com o auxílio de um tubo capilar. (figura 14) 
Visualizar em microscópio e contar os leucócitos de 4 quadrantes laterais e 
multiplicar por 50. (figura 15) 
 
 
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Resultado da contagem: 
Contagem = 374 
Contagem x 50 = 374x50 = 18.700mm³ 
 
Figura 12 – liquido de Turk Figura 13 - homogeneizar 
 
 
 
 
 
 
 Fonte: o autor Fonte: o autor 
Figura 14– preenchendo câmara Figura 15 – leucocitos 
 
 
 
 
 
 
 Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
Conclusão: 
VR: 4.000 a 11.000/mm³ Resultado: 18.700mm³ 
Paciente apresentou leucocitose. 
 
 
 
 
 
 
AULA 3 – ROTEIRO 1 – Determinação de Ferro Sérico 
Determinar o ferro no soro e correlacionar com ferritina e capacidade total de 
ligação do ferro com a transferrina. 
 
Materiais usados: 
- Soro controle normal e patológico - Tubos de ensaio 
- Kit para determinação de ferro sérico - Pipeta automáticaP1000 
- Estante para tubos - Papel absorvente 
- Descarte para tubos e ponteiras 
 
Equipamento usado: 
- Banho a 37C - Espectrofotômetro 
 
Procedimento: 
Identificar 3 tubos de ensaio com as letras B (solução branco), P (solução padrão) 
e T (solução teste). (figura 16) 
Pipetar nos 3 tubos 1.000µl da solução tampão. (figura 17) 
Pipetar 250µl do soro e acrescentar no tubo identificado com T. (figura 18) 
Pipetar 250µl da solução padrão e acrescentar no tubo identificado com P. 
Pipetar 250µl de água destilada e acrescentar no tubo identificado com B. (figura 
19) 
Homogeneizar e determinar a absorbância (ab1) em espectrofotômetro calibrado 
com a solução branco a 560nm (figura 20 e 21) 
Absorbância 1 = 0,077 
Acrescentar em cada tubo 25µl de ferrozine (solução fornecida no kit). (figura 22) 
Misturar e incubar em banho maria a 37°C por 10 minutos. (figura 23) 
Determinar as absorbâncias do teste (abs2) e padrão em 560nm, zerando com a 
solução branco. 
 
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Resultados da leitura no espectrofotômetro: 
Absorbância tubo P (padrão) = 0,162 (figura 24) 
Absorbância 2 tubo T (teste) = 0,401 (figura 25) 
 
 
Figura 16 Figura 17 Figura 18 Figura 19 
 
 
 
 
 
 
Fonte: o autor Fonte: o autor Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
 
 
Figura 20 Figura 21 Figura 22 Figura 23 
 
 
 
 
 
 
Fonte: o autor Fonte: o autor Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
 
 
 
 
 
Figura 24 Figura 25 
 
 
 
 
 
 
Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
Conclusão: 
Valores Referência: Homem 65-170 
 Mulher 50-170 
 Crianças 50-120 
 R.N. 100-250 
 
Ferro(µl/dl) = Abs²T – Abs¹T x 500 = 0,162-0,077 x 500 = 0,085 x 500 
 Abs Padrão 0,401 0,401 
 
=0,212x500 =106 µl/dl 
 
Paciente apresentou resultado dentro da normalidade para ferro. 
 
2.5 AULA 3 – ROTEIRO 2 – Confecção de esfregaço sanguíneo 
 
O esfregaço é utilizado para a contagem diferencial de leucócitos e 
observação de alterações em hemácias, leucócitos e plaquetas. Também é 
importante para a visualização de parasitas, como o Plasmodium. 
 
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Materiais usados: 
- Sangue de carneiro - Lâmina de vidro 
- Lâmina extensoras - Tubo capilar 
- Pipeta P10 - Estante para secagem de lâminas 
- Papel absorvente - Gazes 
- Descarte para lâminas de vidro - Pisseta com álcool 70% 
- Copo para coloração das lâminas - Corante panóptico Prov I, II, III 
 
Equipamento usado: 
- Microscópio 
 
Procedimento: 
Limpar lâmina de vidro e lâminas extensoras com álcool e secar. (figura 26) 
Com o auxílio de uma lanceta coletar e aplicar uma gota de sangue na lâmina. 
(figura 27) 
Fazer um movimento lento com a lâmina extensora para trás até que encoste 
na gota de sangue e para que ela se espalhe uniformemente ao longo de toda borda 
por capilaridade. (figura 28) 
Levar a lâmina extensora para frente de modo que ela arraste a gota de 
sangue que se estenderá numa camada final e uniforme. (figura 29) 
Esperar secar para proceder com a coloração. 
Colocar as lâminas no copo contendo corante Instant Prov I e deixar de 
repouso por 5 segundos e depois deixar escorrer por mais 5 segundos. (figura 30) 
Colocar as lâminas no copo contendo corante Instant Prov II e deixar de 
repouso por 5 segundos e depois deixar escorrer por mais 5 segundos. (figura 30) 
Colocar as lâminas no copo contendo corante Instant Prov III e deixar de 
repouso por 5 segundos e depois deixar escorrer por mais 5 segundos, lavar em água 
corrente e deixar secar. (figura 30) 
 
Conclusão: 
Foram visualizados no esfregaço monócitos, eosinófilos e linfócitos. (figura 32 e 
33) . 
 
 
 
Figura 26 Figura 27 Figura 28 
Fonte: o autor Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
 
Figura 29 Figura 30 Figura31
 Fonte: o autor Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Figura 32 Figura 33 
 
 
 
 
 
 
 
 
Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
2.6 AULA 4 – ROTEIRO 1 – Identificação de Alterações Morfológicas em 
Hemácias 
Objetivo é a revisão de lâmina de amostra que apresentam alterações em um ou 
mais parâmetros onde é possível identificar anormalidades no tamanho, forma 
coloração e presença de inclusões. 
 
Materiais usados: 
- Esfregaço de sangue - Óleo de imersão 
- Gazes - Papel absorvente 
 
Equipamento usado: - Microscópio 
 
Procedimento: 
Ajustar o microscópio até o ponto máximo de luz. 
Girar o revólver do microscópio de modo que a objetiva de menor aumento (4x) 
fique em posição de uso. 
Colocar a lâmina sobre a platina e centralizar o meio que é a região em que as 
hemácias estão regularmente dispersas. 
 
Ajustar o aumento até que sejam visualizadas as células. 
 
 Conclusão: 
 Foram observadas lâminas prontas fornecidas pelo laboratório. 
 Foram visualizadas células em alvo (figura 34), leucemia mieloide crônica (figura 
35) e corpúsculo de howell jolly (figura 36). 
 
Figura 34 Figura 35 Figura 36 
Fonte: o autor Fonte: o autor Fonte: o autor 
 
 
2.7 AULA 4 – ROTEIRO 2 – Contagem Diferencial de Leucócitos 
 
Objetivo é a contagem diferencial de leucócitos em neutrófilos, linfócitos, 
monócitos, eosinófilos e basófilos. 
 
Materiais usados: 
- Esfregaço de sangue (arquivo) - Óleo de imersão 
- Gazes - Papel absorvente 
 
Equipamento usado: 
- Microscópio 
 
 
 
 
 
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Procedimento: 
Ajustar o microscópio até o ponto máximo de luz. 
Girar o revólver do microscópio de modo que a objetiva de menor aumento (4x) 
fique em posição de uso. 
Colocar a lâmina sobre a platina e centralizar o meio que é a região em que as 
hemácias estão regularmente dispersas. 
Ajustar o aumento até que sejam visualizadas as células. 
 
 Conclusão: 
 Foram observadas lâminas prontas fornecidas pelo laboratório. 
 Foram observadas as quantidades conforme tabela 1. 
 
tabela 01 
Células Quantidade % 
Neutrófilos bastonetes 02 
Neutrófilos segmentados 58 
Linfócitos 33 
Monócitos 06 
Eosinófilos 01 
Basófilos 00 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
3 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 
 
DA ANTUNES, Symara R.; AYRES, Laura S.; SILVA, Suelen S; ZANELATTO, Carla; 
RAHMEIER, Francine L. Hematologia clínica. Grupo A, 2020. E-book. ISBN 
9786581492243. Disponível em: 
https://integrada.minhabiblioteca.com.br/#/books/9786581492243/. Acesso em: 25 set. 
2022.