Aula 8 Microbiologia geral

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1 Microbiologia Geral – Susana Figueiredo LCB 
Crescimento microbiano 
• Maioria dos casos: 
o Condições de crescimento na 
natureza são muito diferentes das 
do laboratório 
• Ambiente microbiano: 
o Complexo e em constante mudança 
o Microrganismos crescem num 
“microambiente” até que um fator 
ambiental ou nutricional limite 
esse crescimento 
• Comunidades biológicas com elevado grau 
de organização, onde bactérias formam 
comunidades estruturadas, coordenadas e 
funcionais 
• Agregados de microrganismos que se 
ligam a superfícies sólidas ou uns aos 
outros 
o Estabelecendo complexas 
interações metabólicas 
▪ Mantendo-se encerrados 
numa matriz 
exopolissacarídica 
• Formando um 
microcosmo 
 
• As bactérias monitorizam a sua densidade 
populacional através de moléculas 
sinalizadoras denominadas “auto-
indutores” 
• Processo em que se utilizam 
microrganismos para limpar o meio 
ambiente 
o Na maioria dos casos, promovendo 
a formação de biofilmes 
• Microrganismos removem ou degradam 
lixos perigosos 
o Devido a acidentes ecológicos 
▪ Derramamento de óleos 
nocivos, crudes e outros 
compostos contendo 
hidrocarbonetos, alcatrão, 
etc 
• Objetivo final: preservação do ambiente e 
das espécies 
 
• Cerca de 65% das infeções bacterianas 
acontecem em biofilme 
• As células em biofilme estão protegidas da 
ação dos antimicrobianos e das defesas do 
hospedeiro 
o Ex: infeção pulmonar na fibrose 
quística; placa dentária 
 
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• No ambiente, os microrganismos vivem 
em associação 
• Os desperdícios metabólicos de umas 
espécies servem de nutrientes para outras 
o Em laboratório é difícil criar todo 
este ambiente 
• Material nutritivo para o crescimento dos 
microrganismos em laboratório 
• Tipos: 
o Meios sólidos: 
▪ Em caixa 
▪ Em tubo: 
• Direito 
• Inclinado 
• Semi-inclinado 
o Meios líquidos: 
▪ Caldos 
• Agar: 
o Polissacarídeo complexo derivado 
das algas marinhas 
o Liquefaz a 100ºC 
o Solidifica a temperaturas inferiores 
a 40ºC 
• Composição varia ligeiramente de lote 
para lote 
• Peptona: 
o Proteínas que foram hidrolisadas 
em aminoácidos e pequenos 
peptídeos 
▪ Hidrólise enzimática, ácida 
ou alcalina 
• Extratos: 
o De carne ou leveduras 
o Componentes solúveis na água 
como vitaminas, sais minerais e 
outros nutrientes 
• Outras substâncias: 
o Sangue, sangue cozido, fatores de 
crescimento, etc 
• Ex: gelose de sangue, gelose chocolate, 
gelose de tripticase soja 
• Meios que promovem o crescimento dos 
microrganismos que interessam e 
suprimem o crescimento dos outros 
• Ex: Gelose MacConkey 
o Meios de isolamento para 
enterobactérias 
o Cristal violeta: inibe o crescimento 
de bactérias de Gram positivos 
o Sais biliares: inibe a maioria das 
bactérias não intestinais 
 
• Ex: Gelose de Chapman 
o Meio de isolamento para 
estafilococos 
o 7,5% de NaCl: inibe o crescimento 
de outras bactérias 
 
• Gelose Thayer-Martin: 
o Meio de isolamento para Neisseria 
gonorrhoeae 
 
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o Antimicrobianos: inibem fungos, 
bactérias de Gram positivo e 
negativo 
 
• Gelose Sabouraud: 
o Meio de isolamento para fungos 
o pH 5,6: inibe o crescimento da 
maior parte das bactérias 
 
• Contêm substâncias que as bactérias 
modificam de um modo reconhecível 
• Gelose MacConkey: 
o Substrato: lactose 
o Modo de leitura: 
▪ Indicador de pH: vermelho 
neutro 
 
• Gelose Chapman: 
o Substrato: manitol 
o Modo de leitura: 
▪ Indicador de Ph: vermelho 
de fenol 
 
• Meio de Kligler: 
o Substrato: glucose, lactose, 
tiossulfato de sódio 
o Modo de leitura: 
▪ Indicador de pH e citrato 
férrico amoniacal 
 
• Observação de hemolisinas 
• Hemólise α: 
o Hemólise incompleta aparecendo 
um halo esverdeado à volta da 
colónia 
 
 
• Hemólise β: 
o Hemólise total, ficando um halo 
claro à volta da colónia 
 
 
• Hemólise γ: 
o Sem hemólise 
o O meio fica inalterado 
 
 
 
 
 
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• Ex: caldo tripticase soja, caldo cérebro 
coração, caldo tioglicolato 
• Outros são designados por meios eletivos: 
o Meios que pela sua composição 
favorecem o crescimento de uma 
espécie em detrimento de outras, 
num determinado tempo 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
• Ter em consideração: 
o Reação tintorial 
o Produto em que se encontra 
▪ Muito contaminado e 
poucos microrganismos 
que interessam 
▪ Muito contaminado e com 
bastantes microrganismos 
que interessam 
▪ Pouco contaminado 
o Características do microrganismo a 
isolar 
 
 
• Objetivo: 
o Obter colónias isoladas 
o Uma colónia isolada tem 99% de 
hipótese de ser uma colónia pura 
• Colónia: 
o Agregado visível de bactérias 
obtidas a partir de uma célula 
bacteriana 
o Colónia pura: obtenção de cultura 
pura 
• Definida como uma população de 
organismos descendentes de uma única 
célula 
• Identificar microrganismos e estudar 
determinadas funções 
• Refrigeração: 
o Processo para guardar as bactérias 
durante curtos períodos 
• Longos períodos – anos: 
o Congelamento a baixas 
temperaturas, entre -50ºC e -90ºC 
o Liofilização 
IMPORTANTE! 
• Todos os meios, instrumentos e 
vidros ou plásticos devem estar 
estéreis aquando da sua utilização 
• É necessário trabalhar SEMPRE em 
condições de assepsia que devem ser 
escolhidas consoante o grau de 
perigosidade do microrganismo 
esperado