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MICROBIOLOGIA Aps 1: jogo de microbiologia Aps 2: apresentação de 30 minutos sobre doenças de importância veterinária PRINCIPAIS MICRORGANISMOS Bactérias Procariotos unicelulares Parede celular Sem membrana nuclear Variedade de formas e tamanhos Reprodução por fissão binaria Diversidade nutricional (carbono e energia) Motilidade variada Endosporo Patogênica ou apatogênica Fungos Eucariotos Multicelulares formações de bolor Unicelulares formações de leveduras Macro ou micro Parede celular rígida Reprodução sexuada ou assexuada Bolores: formam longos filamentos que se ramificam intoxicam e degradam os alimentos Leveduras: produção de alimentos e bebidas Patogênicos Vírus Visíveis apenas em microscópico eletrônico Não são considerados células vivas Parasitas intracelular obrigatório Ausência: metabolismo, produção de energia, crescimento e reprodução Induz a célula hospedeira a síntese de novos vírus Estruturas simples MORFOLOGIA E ESTRUTURA DAS BACTÉRIAS PROCARIOTOS Diferenças: ausência da membrana nuclear Ausência de organelas Presença de parede celular Informação genetica: único cromossomo circular Plasmídeos MORFOLOGIA DA CELULAR Tamanho das células bacterianas: de 0,2 a 2um de diâmetro e 2 a 8um comprimento Forma: pleomorfa Cocos diplococos, estreptococos, tétrades, sarcinas e estafilococos Bacilos Espirais espirilos, espiroquetas, vibriões ESTRUTURAS CELULARES BACTERIANAS Glicocálice Rede frouxa de fibrias que se estende para fora da célula Capsula Camada condensada e bem definida que circunda a célula É a camada mais externa Função: aderência bacteriana, fuga do sistema imune do hospedeiro e resistência a dessecação Flagelos Composição: subunidade proteica (flagelinas) Função: locomoção Tipos: A monotríquia B lofotríquias C antitríquias D peritríquias A resposta aos comportamentos dos flagelos vai depender de fatores químicos e físicos e a resposta pode ser positiva ou negativa Quimiotaxia: resposta química Fototaxia: resposta a luz Movimentação: tipo saca rolha Filamento: região mais externa Gancho ou alça: constituída de proteína diferente Corpo basal: fixa o flagelo a parede celular e a membrana plasmática. Tem diferença entre a gram – e a gram +, a gram – tem uma parede a mais onde se prende o corpo basal Fimbrias Mais numerosas e curtas que os flagelos Composição: proteína Função: aderência bacteriana Pili Pili sexuais Função: motilidade, união de duas células bacterianas para transferência de DNA (conjugação) Doadoras F+ e receptora F- sem pilus F Parede celular Estrutura exclusiva das bactérias É complexa, semirrígida e confere a forma da bactéria Função: rigidez que previne rupturas, proteção, ponto de ancoragem dos flagelos, essencial para o crescimento e divisão celular, diferença na sua constituição fator de virulência Composição: peptidoglicano – dissacarídeo repetitivo unido por polipeptídios CONSTITUIÇÃO GRAM + A camada de peptidoglicano é espessa tendo ate 20 camadas Tem em sua composição ácido teicóico (ligado à camada peptideoglicana) e lipoteicóico (atravessa a camada de peptideoglicana) CONSTITUIÇÃO GRAM – A camada é ais fina e frágil É formada primeiro por LPS e espaço periplasmatico e proteína porina, depois vem a parede celular e depois a membrana plasmática Membrana externa: ajuda na fagocitose e do sistema de complemento; barreira contra alguns antibióticos LPS polissacarídeo O: atua como antígeno e são uteis para diferencias as espécies bacterianas Lipídeo A: poção lipídica (endotoxina), toxina toxica quando presente no sangue ou tgi Porinas São canais de proteínas que permitem o transporte de substancias hidrofílicas de baixo peso molecular, confere a permeabilidade da parede de GRAM- Parede celular – atípicas Gênero Mycoplasma: sem parede, muito pequena, alta concentração de lipídeos céreos hidrofóbicos. Coloração acido resistente Arquibactérias: não tem ou a constituição é diferente Membrana plasmática Estrutura fina, exceto Mycoplasma que tem a parede rígida Interna a parede celular, separando-a do citoplasma Constituída por mais + fosfolipideos e – proteínas Formada por uma dupla camada de fosfolipideo: região polar (cabeça) e apolar (cauda) são glicoproteínas que permitem a passagem Função: barreira seletiva que contem enzimas que catalisam as reações para degradar Substancias podem lesar a membrana: amônio quartenario Movimentos através da membrana: transporte passivo, difusão simples, difusão facilitada, osmose e transporte ativo Citoplasma CITOPLASMA Composição Sem núcleo não tem delimitado por membrana nuclear PLASMÍDEOS É uma dna circular de fita dupla Replicação independente do dna cromossômico ENDÓSPORO Estrutura exclusiva principalmente de bactérias gram + Função manter a sobrevivência da bactéria em ambientes hostis, estocar o genoma e a maquinaria metabólica Processo de formação esporulação A bactéria duplica seu dna e tem a formação de um septo em volta de uma desse dna e vai criando dupla camadas de proteção e entra essa camada ele coloca uma camada de pepitidoglicano e depois maus uma camada de cálcio e depois libera o endósporo COLORAÇÃO DE GRAM São colorações para diferenciarmos as bactérias positivas e negativa, ordem da coloração Vi – violeta Lulu – lugol A li – álcool Fumando – fucsina Gram + = fica roxa e gram - = fica rosa MEIO DE CULTURA CRESCIMENTO BACTERIANO O que a bactéria precisa para crescer? Nutrientes Passagem dos nutrientes Gram+: exoenzimas/proteínas Fatores necessários para os crescimentos Temperatura · Bactéria mesofilicas: associado a maioria das bactérias patógenas · Psicotrofila: crescem a 0°c ou menos · Psicoroficas Dependendo da temperatura ela pode ser favorável ou desfavorável para o seu crescimento Ph · Acidófilas: crescimento bacteriano ph abaixo de 7 · Mesofilicas: crescimento ótimo em ph em torno de 7 · Alcalofilas: crescimento ótimo em ph acima de 7 Pressão osmótica Halófilo extremo são adaptados a concentração elevada de sais que acabam requerente sua presença para que ocorra seu crescimento Plasmólise: Fatores químicos necessários Carbono Heterotróficos: obtem carbono de proteias carboidratos e lipídios Autroficos: partir de dióxido obtem carbono de carbono Oxigênio Aeróbicos obrigatório: precisa oxigênio para sobreviver Anaeróbicos facultativo: tem crescimento maior onde tem oxigênio e menor onde não tem oxigênio Anerobico obrigatório: seo cresce onde não tem presença de oxigênio Anaeróbico aerotolerante: tem crescimento por todo o tubo em área com oxigênio e sem Microaerofilico: crescem em baixa concentração de oxigênio no meio do tubo Mecanismo de nutrição – absorção dos nutrientes · Gram +: exoenzima quebram os nutrientes e captação por proteínas transportadas · Gram -: membrana externa é hidrofóbica que impede a passagem de células em água então elas têm os canais de porinas e o periplasma que permite a passagem de substancias hidrofílicas e proteínas de baixo peso molecular Fonte de energia · Quimiotrofico: microrganismo que utilizam compostos químicos orgânicos e inorgânicos como fonte de energia · Fototroficos: microrganismos bactérias que utilizam luz solar como fonte de energia Matéria de prova: primeira aula até a terceira (meio de cultura quimicamente definido e complexo) DILUIÇÃO SERIADA É uma diluição de amostra de forma sequencial, podendo ser qualquer tipo de amostra, como leite, sêmen Na primeira diluição coloca 1:10 homogeneizar e depois 1:100 e 1:1000 O intuito é contar as unidades formadoras de colônia e para considerar a plaque vamos fazer a análise a que estiver com 25 a 300 unidades de colônia e para saber quantas bactérias tem multiplicamos a quantidade da unidade formadoras de colônia x 10.000. QUESTAO DE PROVA Ex: 32 colônias na placa x 10.000 = 320.000 CONTROLE DE CRESCIMENTO BACTERIANO Terminologia do controle microbiano · Esterilização: destruição ou remoção de todas as formas de via microbiana,incluindo endósporos e com exceção dos príons. Normalmente realizada com vapor sob pressão · Esterilização comercial · Desinfecção: destruição de patógenos na forma vegetativa em objetos inanimados e pode fazer uso de métodos físicos e químicos · Antissepsia: faz uso apenas de métodos químicos · Dergeminação: remoção de microrganismo de uma área determinada, por exemplo uso de álcool antes de aplicar vacina · Sanitização: lavagem em alta temperatura ou imersão em um desinfetante químico Taxa de morte microbiana depende de: · Numero de microrganismo ou população: quanto maior o numero de microrganismo é mais difícil o controle · Influencias ambientais como presença de matérias orgânicas e biofilme · Tempo de exposição ao desinfetante · Característica microbiana, o microrganismo pode ser mais resistente ou não · Concentração agente controle em produtos químicos Efetividade do controle microbiano Como agem os antimicrobianos? · Alteram a membrana plasmática da bactéria · Desnaturação proteica · Danos ao DNA da bactéria · Ação mecânica · Plasmólise · Alteração do metabolismo Métodos físicos de controle microbiano · Calor: desnaturação das enzimas que resulta em mudanças na forma tridimensional dessas proteínas · Esterilização por calor úmido: feito na autoclave · Pasteurização · Esterilização por calor seco: mata por efeito de oxidação por chama ou ar quente Não é possível esterilizar todos os tipos de meio de cultura com o fogo pois ele esteriliza apenas as proteínas e tem meios de cultura que são seletivos Métodos físicos de controle microbiano · Filtração: um vácuo criado no frasco coletor a pressão · Baixa temperatura · Alta pressão · Dessecação: principio da liofilização ou congelamento-dessecação · Pressão osmótica · Radiação · Radiação não ionizante Método químico de controle microbiano · Sempre ver o rotulo · Considerar a natureza do material a ser desinfectado · Considere se o desinfetante entrara facilmente me contato com os microrganismo Tipos de desinfetantes · Fenol e composto fenólico · Bifenois · Biguanidas · Halógenos · Iodo · Cloro · Antibióticos: nisina e nataamicina · Aldeídos · Esterilização química · Plasma Classificação de resistência Bactericida: causa a morte da bactéria Bacteriostático: inibe o crescimento bacteriano APS2 – PARVOVIROSE 10 minutos Falar do microrganismo Introdução da doença Característica do microrganismo** Meio de cultura: como conseguir fazer o cultivo do parvovirose e qual teste podemos fazer pra descobrir o vírus ** Tipo de enfermidade que o vírus causa: lesões Tratamento BACTÉRIAS DE INTERESSE VETERINÁRIO Teste respiratório para saber se a bactéria é anaeróbia ou aeróbia Cultura -> caracteristicas morfo-coloniais -> cultura pura -> gram -> tecido respiratório Morfologia diferencial das espécie dos clostrídios GRAM POSITIVA Staphylococcus, existe mais de 30 espécies Cria colônias tipo redonda e grande É mesoformo ou sea cresce a temperatura de 30 a 37° Hemólise alfa é a maior e depois tem a hemólise beta É positivo para o teste de catalase Propriedades do estafilo: ele pode se coagular e isso ajuda ele a circular Agar manitol quando fermentado por estafilococos muda de cor Fator de virulência: · Capsula antifagocitica · Formação de biofilme · Proteína A: impede a ligação do anticorpo com a célula · Coagulase: quebra o fibrinogeno que esta formado para cicatrização · Hemolisinas alfa e beta · Protease, lipase e nuclease · Penincilinase Streptococcus As colônias são juntas, lisas e brilhantes Hemólise beta é a maior e a hemólise alfa vem atras É negativo para o teste de catalase Teste de camp Rhodococcus Característica cultural · Fermenta carboidrato porem sem acidificação · Colonias brilhantes e mucoides · Coloração rosa salmão em agar chocolate · Teste de CAMP: positivo Mecanismo de virulência · Capsula · Sobrevivência em macrófago Mycobacterium GRAM NEGATIVA Teste oxidase: quando positivo fica roxo e determina a atividade de oxidase Teste bioquímicos: dependendo da fermentação ele muda de cor. Agar tríplice ferro, agar sulfeto de hidrogênio e indol e motilidade, Brucella Mecanismo de virulência Infecta macrogafos Meio de cultura: meio farell Leptospira Teste de aglutinação microscópica – MAT; quanto maior o numero maior a infecção FUNGOS Maior organismo da terra é o fungo armillaria ostayae A parte que fica a mostra do fungo é o micélio reprodutiva e a parte que fica por dentro é que é o micélio vegetarivo Subdivisão · Saprofitas obrigatórios · Parasitas facultativos ou saprofitas facultativos: podem causar doenças ou viver em restos orgânicos · Parasitas obrigatórios Fungos · Tipo celular eucarionte · Membrana células com presença de esteróis (ergosterol) · Parede celular composta por glicanos, mananas, quitinina · Esporos são reprodutivos sexuados e assexuados · Metabolismo limitado a heterotróficos: aeróbio, anaeróbio e facultativo · Podem ser unicelulares (leveduras) ou multicelulares (filamentos) · Haploides: é uma célula M · Origem nos esporos (reprodução sexuada) ou conídios (reprodução assexuada) Esporos assexuadado conídios Clanidioconidios Pseudo-hifa Artroconidios Morfologia fúngica Capsula mucopolissacaridia: alguns fungos podem ter Leveduras: são ovoides e unicelulares. Tem reprodução pro brotamento ou por fissão binaria e pode ser reprodução sexuada Filamentoso: longos filamentos, ramificações verdadeiras e estruturas de frutificação. Tipo de micélio: hifa septada (tem diversos septos) e hifa cenotica Os fungos cresce de forma radial, a parte de fora é vegetativa e a parte de dentro que muda de cor é a parte reprodutiva Fungo dimorgico térmico Depende da temperatura, 37° cria levedurifomes e 25° é um bolor ou sea vao crescer de formas diferentes dependendo da temperatura Coloração pra ver fungo é azul de algodão Reprodução esporulação sexuado Pode ser feito em três etapas Plasmogamia Cariogamia Meiose
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