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BIOLOGIA I PRÉ-VESTIBULAR 31PROENEM.COM.BR 12 REPLICAÇÃO DO DNA INTRODUÇÃO As carac1terísticas de um organismo dependem, direta ou indiretamente, de seu código genético que, por sua vez, consiste em uma sequência de bases nitrogenadas contidas em seu DNA. Em seres eucariontes, este DNA fica majoritariamente confinado ao núcleo que, como a maioria das organelas, é uma estrutura membranosa com função particular. Neste módulo estudaremos como o DNA se comporta durante a vida de uma célula eucarióti1ca e como isto afeta a constituição do núcleo. Por fim, abordaremos algumas alterações mais frequentes na população, conhecidas como síndromes cromossômicas. CICLO CELULAR A vida de uma célula pode ser compreendida como a vida de qualquer outro organismo. Existe um momento de nascimento, crescimento, reprodução e morte. O nascimento de uma célula ocorre logo após a divisão de uma célula progenitora que a origina, seu crescimento consiste no período de maior atividade característica. A reprodução ocorre por divisões e a morte pode acontecer de diferentes maneiras, mas sempre culmina na eliminação da célula. Este processo, como um todo, é denominado ciclo celular e pode ser dividido em duas principais fases: interfase e divisão celular. M M I S G2 G0G1 A interfase, com suas subfases G1 (gap 1), S (synthesis) e G2 (gap 2), corresponde ao período entre duas divisões celulares. Assim que uma célula “nasce” ela intensifica a síntese de proteínas, aumenta em volume e começa a desempenhar suas funções tradicionais, tudo isso ocorrendo em G1. Caso receba um sinal para a proliferação, esta célula precisa replicar seu material genético, o que ocorre em S. Por fim, com DNA duplicado, ela realiza uma série de verificações por mutações, podendo corrigi-las antes da divisão celular, o que caracteriza G2. A subfase S da interfase é particularmente interessante, pois nela ocorre a replicação (duplicação) do material genético. Nessa etapa, cada fita de DNA já existente deve servir como molde para a síntese de uma nova fita complementar. Cada par, formado por uma fita molde e uma fita filha, será destinado a uma célula-filha após a divisão celular. Isto garante que as células resultantes da proliferação apresentem o mesmo código genético original. Para entender a replicação, primeiro devemos lembrar que cada fita de DNA se encontra pareada a uma complementar, sendo a sua conformação natural uma dupla hélice. Estes pareamentos ocorrem através de pontes de hidrogênio que são estabelecidas entre as bases nitrogenadas de cada fita. Assim, adeninas (A) sempre se pareiam a timinas (T) por duas pontes de hidrogênio, enquanto citosinas (C) sempre se pareiam a guaninas (G) através de três pontes de hidrogênio. A síntese de uma nova fita de DNA a partir de outra previamente existente depende de um complexo enzimático no qual se destaca a DNA Polimerase. Esta enzima é responsável por unir os nucleotídeos que formarão a nova fita de DNA em complementaridade ao molde já existente. A ligação química existente entre os nucleotídeos de uma mesma fita é chamada de ligação fosfodiéster. A replicação, então, inicia-se quando este complexo enzimático acessa a dupla fita de DNA que servirá como molde e se intercala entre as duas fitas de forma a afastá-las, desnaturando a dupla hélice. A ruptura das pontes de hidrogênio abre espaço para que os nucleotídeos livres que estão presentes no núcleo se pareiem aqueles que formam cada fita molde. Assim, conforme o complexo enzimático se desloca ao longo do DNA original, mais nucleotídeos se pareiam e são unidos por ligações fosfodiéster graças à ação da DNA Polimerase. O fim da replicação é marcado pela formação de duas duplas-fitas individuais a partir de uma dupla-fita original. A figura a seguir representa o processo de replicação. A própria replicação é um processo passível de erros e, além dela, o DNA pode sofrer mutações ao longo de sua existência. Uma célula com erros em seu DNA recém-duplicado pode identificá-los e corrigi-los por comparação com o material genético original. Em algumas situações, no entanto, a quantidade de mutações é tão grande que o reparo se torna inviável e a célula desencadeia um processo de morte. Existem diferentes tipos de morte (necrose e autofagia, por exemplo), mas neste caso ocorrerá a apoptose, uma morte programada que não gera inflamação ou dano às demais células de um tecido biológico. Caso as mutações não sejam reconhecidas ou reparadas e, ainda assim, a célula não morra, o ciclo celular prossegue de G2 à divisão. O acúmulo de mutações – geralmente ao longo de muitos anos – pode alterar significativamente a fisiologia das células afetadas. A massa de células resultantes deste processo, capaz de afetar a arquitetura do tecido no qual se encontra, é conhecida como câncer (tumor maligno). PRÉ-VESTIBULARPROENEM.COM.BR32 BIOLOGIA I 12 REPLICAÇÃO DO DNA Algumas células podem entrar em uma variação de G1 conhecida como G0, na qual não há estímulo à proliferação e, em alguns casos, ocorre redução de seu metabolismo. Considerando que G2 tenha ocorrido de forma correta, a interfase termina e se inicia a divisão celular. Esta divisão pode ocorrer de duas maneiras (mitose ou meiose) que serão estudadas mais a frente. Resumidamente, podemos compreender a mitose como uma divisão celular que gera células idênticas à original, enquanto a meiose é caracterizada pela redução do número de cromossomos nas células-filhas à metade. PROEXPLICA NÚCLEO INTERFÁSICO Durante todo o período de interfase, a maioria das células eucarióticas apresenta o núcleo como uma estrutura de proteção ao material genético (hemácias são um exemplo do contrário). O núcleo, como pode ser observado na figura a seguir, apresenta uma delimitação conhecida como envelope nuclear (carioteca) que é formado por duas membranas (interna e externa). Internamente ao envelope se encontra um espaço preenchido por um líquido similar ao citosol que, aqui, é chamado de nucleoplasma. Imerso no nucleoplasma, o DNA não se apresenta solto, mas enovelado em proteínas conhecidas como histonas, formando um complexo chamado de cromatina. Ainda no núcleo é possível observar uma ou mais regiões densas, os nucléolos, que são locais onde proteínas especiais se associam ao RNAr para dar origem aos ribossomos. Por fim, como muitas moléculas produzidas no núcleo precisam migrar para o citoplasma, e vice-versa, também é possível encontrar poros no envelope nuclear, que nada mais são que complexos proteicos que possibilitam o transporte através das membranas nucleares. A cromatina, formada por DNA e histonas, não é uma estrutura homogênea. Em suas regiões menos densas (eucromatina) se encontram trechos de DNA (genes) que estão ativos naquele dado momento, sendo utilizados na determinação de características da célula em questão. As regiões mais densas (heterocromatina) apresentam os trechos que estão inativos e que, portanto, não estão sendo empregados na determinação de características. As regiões que formam eucromatina e heterocromatina são dinâmicas. Logo, porções da cromatina mais condensadas podem ser afrouxadas rapidamente quando necessário, sendo o contrário verdadeiro. COMPACTAÇÃO DO DNA A tradicional dupla-fita de DNA é uma estrutura relativamente estável. No entanto, sua importância para a fisiologia celular é tão grande que não faz sentido pensar em excesso de proteção. A forma natural de encontrar o DNA em uma célula eucariótica é através de sua associação às histonas, como mencionado anteriormente, formando a cromatina – sendo cada trecho de DNA enrolado a histonas conhecido como nucleossomo. No entanto, a quantidade de histonas pode variar não só quanto às estruturas de eucromatina e heterocromatina. Durante uma divisão celular, na qual é necessário separar o material genético de uma célula-mãe entre suas células-filhas, o DNA está ainda mais sujeito a quebras. Nesta fase do ciclocelular, então, é observada uma forma ainda mais compacta conhecida como cromossomo. Assim, em termos de componentes, cromatina e cromossomo são formados pelo mesmo material (DNA e histonas), porém em proporções distintas. CROMOSSOMOS Um cromossomo típico, como pode ser visto ao centro da figura a seguir, apresenta duas cromátides-irmãs que conectam através de um centrômero. A separação das cromátides-irmãs, como estudaremos ao falar sobre divisão celular, origina dois cromossomos simples idênticos, cada um com apenas uma cromátide. Cromátides irmãs Cromátide Divisão do centrômero Cromossomo com duas com cromátides Dois cromossomos idênticos Em muitos organismos, como em humanos, há pares de cromossomos em cada célula. Um destes cromossomos é proveniente do lado materno, enquanto seu par é proveniente do lado paterno do indivíduo em questão. Este conjunto é reconhecido como um par de cromossomos homólogos. ESTRUTURA Um cromossomo eucarionte pode ser classificado de acordo com a posição relativa de seu centrômero e tamanho de seus braços. Assim, existem cromossomos metacêntricos que apresentam centrômero exatamente ao meio, separando braços de tamanhos iguais. Cromossomos submetacêntricos apresentam um braço com um quarto de seu tamanho total, sendo os outros três quartos correspondentes ao outro braço. Um cromossomo acrocêntrico apresenta dois braços, mas um de tamanho extremamente reduzido, já que o centrômero está localizado bem perto de uma das extremidades. Por fim, cromossomos telocêntricos são os que apresentam realmente um braço, sendo o centrômero presente em uma de suas extremidades. A figura a seguir representa estes quatro tipos de cromossomos encontrados na natureza. Metacêntrico Submetacêntrico Acrocêntrico Telocêntrico PRÉ-VESTIBULAR PROENEM.COM.BR 12 REPLICAÇÃO DO DNA 33 BIOLOGIA I PLOIDIA Apresentar cromossomos homólogos aos pares é o que classifica organismos como diploides (2n). Assim, por receberem 23 cromossomos de sua mãe e outros 23 cromossomos homólogos de seu pai durante a fecundação, seres humanos apresentam 23 pares de cromossomos em quase todas as suas células, sendo organismos diploides (2n = 46 cromossomos). Algumas espécies são tipicamente encontradas em sua forma haploide (n), como ocorre com alguns fungos e, em humanos, nas células reprodutivas (espermatozoides e óvulos). Ser haploide significa não apresentar par de cromossomos, assim, um óvulo humano é haploide (n = 23 cromossomos). CARIÓTIPO O número e a estrutura dos cromossomos existentes em uma célula é algo característico de uma espécie. Humanos (Homo sapiens) apresentam tipicamente 46 cromossomos por célula, enquanto os gatos (Feliz catus) possuem 38 cromossomos e cachorros (Canis familiaris) possuem 78 cromossomos. A visualização dos cromossomos – que só é possível durante a divisão celular, uma vez que durante a interfase o DNA esteja estruturado como cromatina dentro do núcleo – sua contagem e organização são o que chamamos de cariótipo. Sua anotação pode ser feita de duas formas diferentes, destacando-se os cromossomos autossômicos ou não. Cromossomos autossômicos (autossomos) se opõem aos cromossomos sexuais. Assim, se uma espécie apresenta um par de cromossomos responsáveis pela determinação do sexo biológico, todos os demais são autossomos e não interferem com este processo. Peguemos um humano como exemplo. Nossos cromossomos sexuais são X e Y. Mulheres, que representam o sexo homogamético, possuem dois cromossomos X, enquanto homens, heterogaméticos, são XY. Assim, a descrição do cariótipo feminino pode ser realizada como 46, XX ou 44AA + XX. O mesmo funcionaria para um homem: 46, XY ou 44AA + XY. O curioso é que, como é possível notar pela presença de um único cromossomos X em homens, ter dois cromossomos X não é necessário à sobrevivência. Desta forma, as células femininas, mesmo durante a interfase, apresentam um cromossomo visualizável. Este cromossomo, que praticamente nunca é descompactado, é chamado de cromatina sexual ou corpúsculo de Barr. SÍNDROMES CROMOSSÔMICAS Toda e qualquer modificação que interfira no número ou na estrutura dos cromossomos de uma célula é chamada mutação cromossômica. As mutações cromossômicas podem ser classificadas em mutações numéricas, em que há alteração no número de cromossomos de célula, e mutações estruturais, em que há alteração na forma ou no tamanho de um ou mais cromossomos da célula. MUTAÇÕES ESTRUTURAIS São provenientes de fragmentos cromossômicos seguidos de perda de pedaços em locais diferentes da original. Esse tipo de mutação pode ser classificado em: • Deficiência ou deleção: quando o cromossomo é desprovido de uma parte. • Duplicação: quando há a repetição de um pedaço do cromossomo. • Inversão: quando o cromossomo tem uma porção invertida. • Translocação: quando um cromossomo apresenta uma parte proveniente de outro cromossomo. MUTAÇÕES NUMÉRICAS São, ainda, subdivididas em aneuploidias e euploidias. Nas aneuploidias, tem-se um aumento ou uma perda de um ou mais cromossomos; já nas euploidias, o aumento ou a perda será em lotes cromossômicos completos, também conhecidos como genomas. • Aneuploidia – Nulissomia - é uma aneuploidia que ocorre quando há a perda de um par completo de cromossomos, sendo indicada por 2n-2. Para os seres diploides (2n), a nulissomia é quase sempre letal – Monossomia - é quando há perda de um dos cromossomos, pode também ser indicado por 2n – 1. Ex: Síndrome de Turner – Polissomia - É quando ocorre o aumento de um ou mais cromossomos em um genoma. Estes seres são representados como: trissomia (2n+1), tetrassomia (2n+2), pentassomia (2n+3), hexassomia (2n+4), e assim por diante. Ex: síndrome de Down e Klinefelter • Euploidia São alterações que causam modificação em todo o genoma, ou seja, aumento ou diminuição de pelo menos um conjunto cromossômico haploide, portanto, a célula humana apresenta um número de cromossomos múltiplo de 23, podendo ser n, 3n, 4n, 5n etc. A tabela a seguir sumariza as aneuploidias mais comuns no Brasil. SÍNDROME ALTERAÇÃO PRINCIPAIS SINTOMAS Síndrome de Down 47, XX +21 ou 47, XY + 21 Atraso no desenvolvimento cognitivo, extremidade dos olhos superiormente inclinada e pescoço e dedos curtos. Síndrome de Turner 45, X Tórax largo, ovários atrofiados, pescoço curto e baixa estatura. Síndrome de Klinefelter 47, XXY Alta estatura, ginecomastia e testículos atrofiados. Síndrome de Patau 47, XX + 13 ou 47, XY + 13 Fenda labial e palatina, punhos cerrados, pés arqueados e orelhas malformadas. Síndrome de Edwards 47, XX + 18 ou 47, XY + 18 Micrognatia, orelhas mais baixas, cardiopatia e fraqueza muscular. PRÉ-VESTIBULARPROENEM.COM.BR34 BIOLOGIA I 12 REPLICAÇÃO DO DNA PROTREINO EXERCÍCIOS 01. Descreva as etapas da intérfase. 02. Aponte o tipo de síndrome causada pela trissomia do cromossomo 21. 03. Classifique os cromossomos de acordo com a posição do centrômero. 04. Determine a constituição cromossômica de um indivíduo com síndrome de Turner. 05. Cite o que causa a síndrome de Klinefelter. PROPOSTOS EXERCÍCIOS 01. (ENEM) Um estudante relatou que o mapeamento do DNA da cevada foi quase todo concluído e seu código genético desvendado. Chamou atenção para o número de genes que compõem esse código genético e que a semente da cevada, apesar de pequena, possui um genoma mais complexo que o humano, sendo boa parte desse código constituída de sequências repetidas. Nesse contexto, o conceito de código genético está abordado de forma equivocada. Cientificamente esse conceito é definido como a) trincas de nucleotídeos que codificam os aminoácidos. b) localização de todos os genes encontrados em um genoma. c) codificação de sequências repetidas presentes em um genoma. d) conjunto de todos os RNAs mensageiros transcritos em um organismo. e) todas as sequências depares de bases presentes em um organismo. 02. . (ENEM) A reação em cadeia da polimerase (PCR, na sigla em inglês) é uma técnica de biologia molecular que permite replicação in vitro do DNA de forma rápida. Essa técnica surgiu na década de 1980 e permitiu avanços científicos em todas as áreas de investigação genômica. A dupla hélice é estabilizada por ligações de hidrogênio, duas entre as bases adenina (A) e timina (T) e três entre as bases guanina (G) e citosina (C). Inicialmente, para que o DNA possa ser replicado, a dupla hélice precisa ser totalmente desnaturada (desenrolada) pelo aumento da temperatura, quando são desfeitas as ligações de hidrogênio entre as diferentes bases nitrogenadas. Qual dos segmentos de DNA será o primeiro a desnaturar totalmente durante o aumento da temperatura na reação de PCR? a) b) c) d) e) 03. (ENEM) A cariotipagem é um método que analisa células de um indivíduo para determinar seu padrão cromossômico. Essa técnica consiste na montagem fotográfica, em sequência, dos pares de cromossomos e permite identificar um indivíduo normal (46, XX ou 46, XY) ou com alguma alteração cromossômica. A investigação do cariótipo de uma criança do sexo masculino com alterações morfológicas e comprometimento cognitivo verificou que ela apresentava fórmula cariotípica 47, XY, +18. A alteração cromossômica da criança pode ser classificada como a) estrutural, do tipo deleção. b) numérica, do tipo euploidia. c) numérica, do tipo poliploidia. d) estrutural, do tipo duplicação. e) numérica, do tipo aneuploidia. TEXTO PARA A PRÓXIMA QUESTÃO: João ficou intrigado com a grande quantidade de notícias envolvendo DNA: clonagem da ovelha Dolly, terapia gênica, testes de paternidade, engenharia genética, etc. Para conseguir entender as notícias, estudou a estrutura da molécula de DNA e seu funcionamento e analisou os dados do quadro a seguir. 04. (ENEM) Analisando-se o DNA de um animal, detectou-se que 40% de suas bases nitrogenadas eram constituídas por Adenina. Relacionando esse valor com o emparelhamento específico das bases, os valores encontrados para as outras bases nitrogenadas foram: PRÉ-VESTIBULAR PROENEM.COM.BR 12 REPLICAÇÃO DO DNA 35 BIOLOGIA I a) T = 40%; C = 20%; G = 40% b) T = 10%; C = 10%; G = 40% c) T = 10%; C = 40%; G = 10% d) T = 40%; C = 10%; G = 10% e) T = 40%; C = 60%; G = 60% 05. . (FUVEST) Há uma impressionante continuidade entre os seres vivos (...). Talvez o exemplo mais marcante seja o da conservação do código genético (...) em praticamente todos os seres vivos. Um código genético de tal maneira “universal” é evidência de que todos os seres vivos são aparentados e herdaram os mecanismos de leitura do RNA de um ancestral comum. Morgante & Meyer, Darwin e a Biologia, O Biólogo 10:12–20, 2009. O termo “código genético” refere-se a) ao conjunto de trincas de bases nitrogenadas, cada trinca correspondendo a um determinado aminoácido. b) ao conjunto de todos os genes dos cromossomos de uma célula, capazes de sintetizar diferentes proteínas. c) ao conjunto de proteínas sintetizadas a partir de uma sequência específica de RNA. d) a todo o genoma de um organismo, formado pelo DNA de suas células somáticas e reprodutivas. e) à síntese de RNA a partir de uma das cadeias do DNA, que serve de modelo. 06. (UNICAMP) Em relação a um organismo diploide, que apresenta 24 cromossomos em cada célula somática, pode-se afirmar que a) seu código genético é composto por 24 moléculas de DNA de fita simples. b) o gameta originado desse organismo apresenta 12 moléculas de DNA de fita simples em seu genoma haploide. c) uma célula desse organismo na fase G2 da interfase apresenta 48 moléculas de DNA de fita dupla. d) seu cariótipo é composto por 24 pares de cromossomos. 07. (PUCRJ) O material genético deve suas propriedades a seus constituintes, os nucleotídeos, e à forma como são organizados na molécula de ácido nucleico. No caso específico do DNA, é característica da estrutura molecular: a) a ligação entre as bases nitrogenadas se dar por pontes de enxofre. b) a pentose típica do DNA ser uma desoxirribose. c) ter como bases nitrogenadas a adenina, citosina, guanina, timina e uracila. d) não existir uma orientação de polimerização dos nucleotídeos em cada cadeia. e) formar cadeias somente de fitas simples. 08. (PUCRJ) Diversas doenças estão relacionadas a mutações no material genético. Porém, mutações pontuais, com a alteração de apenas uma base nitrogenada, muitas vezes não resultam em substituição efetiva do aminoácido correspondente ao códon mutado na proteína produzida. Isto se dá devido ao fato de: a) o código genético ser universal. b) o código genético ser repetitivo ou degenerado. c) o erro ser corrigido pela célula durante a tradução. d) o código genético não poder sofrer alterações. e) os genes mutados não serem transcritos ou traduzidos. TEXTO PARA AS PRÓXIMAS 2 QUESTÕES: Utilize as informações abaixo para responder à(s) questão(ões) a seguir. As duas cadeias carbônicas que formam a molécula de DNA são unidas por meio de ligações de hidrogênio entre bases nitrogenadas. Há quatro tipos de bases nitrogenadas: adenina, citosina, guanina e timina. Nas estruturas a seguir, estão representadas, em pontilhado, as ligações de hidrogênio existentes nos pareamentos entre as bases timina e adenina, e citosina e guanina, na formação da molécula de DNA. 09. (UERJ) Considere que uma molécula de DNA com todas as citosinas marcadas radioativamente foi transferida para uma célula sem qualquer substância radioativa. Após esse procedimento, a célula sofreu duas divisões mitóticas, originando quatro células-filhas. Ao final das divisões mitóticas, a quantidade de células-filhas com radioatividade é: a) 1 b) 2 c) 3 d) 4 10. (UERJ) A desnaturação do DNA é o processo no qual as duas cadeias da molécula se separam devido à quebra das ligações de hidrogênio entre as bases nitrogenadas. Considere um estudo que comparou a desnaturação de quatro fragmentos de DNA − W, X, Y, Z − todos com a mesma quantidade total de bases nitrogenadas. Observe, na tabela, o percentual de timina presente em cada um: FRAGMENTO DE DNA PERCENTUAL DE TIMINA W 10% X 20% Y 30% Z 40% PRÉ-VESTIBULARPROENEM.COM.BR36 BIOLOGIA I 12 REPLICAÇÃO DO DNA Para os quatro fragmentos, a desnaturação foi realizada mediante aquecimento, sem alteração de pH e com mesma temperatura inicial. No processo de aquecimento, a maior quantidade de energia foi consumida na desnaturação do seguinte fragmento: a) W b) X c) Y d) Z 11. O DNA é uma molécula formada por uma dupla fita, enrolada uma sobre a outra, que forma uma estrutura helicoidal. Essa molécula se caracteriza pela sua capacidade de autoduplicação, um processo conhecido como: a) tradução. b) replicação. c) transdução. d) transcrição. e) retificação. 12. No processo de duplicação de DNA, a enzima DNA polimerase é responsável por possibilitar a ligação entre os nucleotídeos que estão formando a nova fita. Neste processo, é necessário seguir um padrão exato para evitar que o código genético seja alterado e mutações sejam acumuladas. Dentre os processos adotados por esta enzima para evitar a ocorrência de mutações encontra-se o(a) a) ligação fosfodiéster entre ribonucleotídeos. b) pareamento de bases nitrogenadas com a fita molde. c) complementaridade entre pirimidinas. d) ponte dissulfeto entre desoxirribonucleotídeos. e) helicoidização das fitas filhas. 13. Nos dias de hoje, podemos dizer que praticamente todos os seres humanos já ouviram em algum momento falar sobre o DNA e seu papel na hereditariedade da maioria dos organismos. Porém, foi apenas em 1952, um ano antes da descrição do modelo do DNA em dupla hélice por Watson e Crick, que foi confirmado, sem sombra de dúvidas, que o DNA é material genético. No artigo em que Watson e Crick descreveram a molécula de DNA, eles sugeriram um modelo de como essa molécula deveria se replicar. Em 1958,Meselson e Stahl realizaram experimentos utilizando isótopos pesados de nitrogênio que foram incorporados às bases nitrogenadas para avaliar como se daria a replicação da molécula. A partir dos resultados, confirmaram o modelo sugerido por Watson e Crick, que tinha como premissa básica o rompimento das pontes de hidrogênio entre as bases nitrogenadas. Considerando a estrutura da molécula de DNA e a posição das pontes de hidrogênio na mesma, os experimentos realizados por Meselson e Stahl a respeito da replicação dessa molécula levaram à conclusão de que a) a replicação do DNA é conservativa, isto é, a fita dupla filha é recém-sintetizada e o filamento parental é conservado. b) a replicação de DNA é dispersiva, isto é, as fitas filhas contêm DNA recém-sintetizado e parentais em cada uma das fitas. c) a replicação é semiconservativa, isto é, as fitas filhas consistem de uma fita parental e uma recém-sintetizada. d) a replicação do DNA é conservativa, isto é, as fitas filhas consistem de moléculas de DNA parental. e) a replicação é semiconservativa, isto é, as fitas filhas consistem de uma fita molde e uma fita codificadora. 14. Muitas drogas, entre elas alguns quimioterápicos, atuam sobre os nucléolos. A desorganização desta região leva à morte celular, reduzindo o volume tumoral e elevando a sobrevivência dos pacientes. Assim, analise as afirmativas a seguir feitas sobre esta estrutura. I. É uma região de intensa síntese de RNA ribossômico. II. No nucléolo, as moléculas de RNA ribossômico associam- se a proteínas formando as subunidades que comporão os ribossomos. III. A organização do nucléolo depende da atividade do Complexo de Golgi. Estão corretas as afirmativas a) I, apenas. b) II, apenas. c) III, apenas. d) I e II, apenas. e) II e III, apenas. 15. Leia abaixo a descrição do experimento por meio do qual se comprovou que a replicação do DNA é do tipo semiconservativo. Uma cultura de células teve, inicialmente, o seu ciclo de divisão sincronizado, ou seja, todas iniciavam e completavam a síntese de DNA ao mesmo tempo. A cultura foi mantida em um meio nutritivo normal e, após um ciclo de replicação, as células foram transferidas para um outro meio, onde todas as bases nitrogenadas continham o isótopo do nitrogênio 15N em substituição ao 14N. Nestas condições, essas células foram acompanhadas por três gerações seguidas. O DNA de cada geração foi preparado e separado por centrifugação conforme sua densidade. Observe o gráfico correspondente ao resultado obtido na primeira etapa do experimento, na qual as células se reproduziram em meio normal com 14N: densidade qu an tid ad e de D N A Observe, agora, os gráficos correspondentes aos resultados obtidos, para cada geração, após a substituição do nitrogênio das bases por 15N: densidade qu an tid ad e de D N A X densidade qu an tid ad e de D N A Y PRÉ-VESTIBULAR PROENEM.COM.BR 12 REPLICAÇÃO DO DNA 37 BIOLOGIA I densidade qu an tid ad e de D N A Z Os gráficos que correspondem, respectivamente à primeira, à segunda e à terceira gerações são: a) X, Y, Z b) Z, Y, X c) Y, Z, X d) Z, X, Y e) X, Z, Y 16. Em células eucariotas, a cromatina pode se apresentar como eucromatina, uma forma não espiralada, ou como heterocromatina, uma forma muito espiralada. Na metáfase, muitas regiões de eucromatina se transformam em heterocromatina, formando cromossomos bastante espiralados, conforme mostra o esquema. Diferentes estágios de organização da cromatina cromatina maior espirilização cromossomo bastante espiralado eucromatina heterocromatina Considerando uma mitose típica, a formação do cromossomo bastante espiralado favorece o seguinte processo: a) transcrição dos genes pela RNA polimerase. b) distribuição do DNA para células-filhas. c) síntese de proteínas nos ribossomos. d) redução do cariótipo original. e) aumento do cariótipo original 17. O núcleo celular contém todas as informações sobre a função e a estrutura da célula. Analise as afirmativas a seguir sobre a estrutura do núcleo celular eucariótico. I. O material genético do núcleo localiza-se em estruturas chamadas cromossomos. II. Os nucléolos são orgânulos delimitados por uma membrana e constituídos de DNA. III. A carioteca ou membrana nuclear é dupla e porosa. IV. O nucleoplasma ou suco nuclear é formado por água, ribossomos e material genético. Estão corretas apenas as afirmativas: a) I e II. b) II e III. c) III e IV. d) I e III. e) II e IV. 18. (Uel 2019) A síndrome de Down, que afeta um em cada mil recém-nascidos, não é uma doença, mas a mais comum das alterações cromossômicas. Trata-se de uma condição genética que vem acompanhada de algumas peculiaridades para as quais os pais devem estar atentos desde o nascimento da criança. A pessoa com síndrome de Down faz parte do universo da diversidade humana e tem muito a contribuir com desenvolvimento de uma sociedade inclusiva. Assinale a alternativa que representa, corretamente, um cariótipo de portador da síndrome de Down. a) 45, X. b) 46, XX. c) 47, XXY. d) 47, XY + 21. e) 47, XY + 18. 19. Um pesquisador injetou uma pequena quantidade de timidina radioativa (3H — timidina) em células com o propósito de determinar a localização dos ácidos nucleicos sintetizados a partir desse nucleotídeo, utilizando uma técnica muito empregada em biologia celular, a autorradiografia combinada com microscopia eletrônica. Assinale a alternativa que apresenta os dois compartimentos celulares nos quais o pesquisador encontrará ácidos nucleicos radioativos. a) Núcleo e mitocôndrias. b) Citosol e mitocôndrias. c) Núcleo e retículo endoplasmático. d) Citosol e retículo endoplasmático. e) Peroxissomos e retículo endoplasmático. 20. O DNA apresenta diferentes níveis de condensação, conforme representado na figura. No momento em que o DNA de uma célula somática humana for visualizado no nível “F” de condensação, está ocorrendo o processo de a) síntese de proteínas. b) multiplicação celular. c) permutação cromossômica. d) produção de ácido ribonucleico. e) duplicação do material genético. PRÉ-VESTIBULARPROENEM.COM.BR38 BIOLOGIA I 12 REPLICAÇÃO DO DNA APROFUNDAMENTO EXERCÍCIOS DE 01. (Ufu 2006) Em 1958, Meselson e Stahl cultivaram bactérias ‘Escherichia coli’ por 14 gerações em meio de cultura, onde a única fonte de nitrogênio era o 15N (isótopo pesado). No desenho a seguir, a seta do Tubo 1 indica a posição (Ill) ocupada pelo DNA com 15N após ultracentrifugação em meio de cloreto de césio. Uma amostra de bactérias contendo DNA com 15N foi transferida para meio de cultura onde a única fonte de nitrogênio era o14N (isótopo normal). Após cada geração, foram retiradas amostras de DNA e verificada(s) a(s) posição(ões) ocupada(s) por estas amostras em meio de cloreto de césio. A seta do Tubo 2 indica a posição (II) ocupada pelo DNA, após a primeira geração em meio com 14N. Com relação aos dados apresentados, responda: Após a segunda geração em meio com 14N, o DNA extraído das bactérias irá ocupar qual(is) posição(ções) no Tubo 3? Qual conclusão pode ser tirada a partir da realização deste experimento? Qual é a principal enzima envolvida no processo descrito? 02. (UFPR) Uma cultura de bactérias idênticas, todas contendo apenas uma molécula de DNA, é colocada em um meio de cultura no qual os nucleotídeos são marcados radioativamente. Elas são mantidas nesse meio por dois ciclos de divisão celular; ou seja, cada bactéria terá originado quatro bactérias-filhas. Depois, são mantidas por mais um ciclo de divisão em um meio com nucleotídeo não radioativo. Cada molécula de DNA é formada por duas cadeias polinucleotídicas enroladas helicoidalmente. A partir de uma bactéria dessa colônia, quantas cadeias polinucleotídicas conterão marcação radioativa e quantas cadeias não conterão marcação radioativa ao final dos três ciclos? Explique o motivo de sua resposta no item anterior. 03. (UNIFESP) O Sistema CRISPR-Cas9 foi desenvolvidoem laboratório e é constituído de um RNA-guia (CRISPR) associado a uma enzima de restrição (Cas9). O RNA-guia é uma sequência curta de RNA sintético complementar à sequência de um determinado trecho de DNA. Quando introduzido em células vivas, o CRISPR- Cas9 detecta a sequência de DNA complementar e a enzima corta o DNA em um ponto específico. Em seguida, o sistema de reparo do DNA é ativado, unindo novamente os segmentos que foram separados. Nesse processo, podem ocorrer alterações na sequência original, causando a inativação de um gene. Sistemas semelhantes ao CRISPR-Cas9 são encontrados naturalmente em bactérias e ativados quando estas são infectadas por vírus. a) Cite uma vantagem que sistemas semelhantes ao CRISPR- Cas9 conferem a bactérias atacadas por um vírus cujo material genético seja o DNA. Supondo que no DNA viral exista a sequência de bases nitrogenadas CCCTATAGGG, qual será a sequência de bases no RNA-guia associado à Cas9 bacteriana? b) Por que a alteração na sequência de DNA provocada pelo CRISPR-Cas9 pode inativar um gene? 04. (UNICID - MEDICINA 2016) Após a descoberta da estrutura da molécula de DNA, surgiram três modelos para explicar como ocorre sua duplicação. A figura ilustra três possíveis modelos de duplicação da molécula de DNA. a) Dos modelos apresentados, qual deles representa a duplicação da molécula de DNA proposto por Watson e Crick? Justifique sua resposta. b) Em que fase do ciclo celular mitótico ocorre a duplicação da molécula de DNA? Por que a célula precisa realizar esse processo? 05. (UNESP) Os indivíduos não são coisas estáveis. Eles são efêmeros. Os cromossomos também caem no esquecimento, como as mãos num jogo de cartas pouco depois de serem distribuídas. Mas as cartas, em si, sobrevivem ao embaralhamento. As cartas são os genes. Eles apenas trocam de parceiros e seguem em frente. É claro que eles seguem em frente. É essa a sua vocação. Eles são os replicadores e nós, suas máquinas de sobrevivência. Quando tivermos cumprido a nossa missão, seremos descartados. Os genes, porém, são cidadãos do tempo geológico: os genes são para sempre. (Richard Dawkins. O gene egoísta, 2008.) PRÉ-VESTIBULAR PROENEM.COM.BR 12 REPLICAÇÃO DO DNA 39 BIOLOGIA I Considerando a reprodução sexuada, explique o que o autor do texto quis dizer ao comparar cada cromossomo, e o conjunto cromossômico de uma pessoa, às mãos de cartas que se desfazem assim que são distribuídas. Considerando o mecanismo de duplicação do DNA, explique a afirmação de que os genes são para sempre. GABARITO EXERCÍCIOS PROPOSTOS 01.A 02.C 03.E 04.D 05.A 06.C 07.B 08.B 09.B 10.A 11.B 12.B 13.C 14.D 15.C 16.B 17.D 18.D 19.A 20.B EXERCÍCIOS DE APROFUNDAMENTO 01. a) O DNA vai ocupar as posições I e II do tubo 3. b) A duplicação do DNA é semiconservativa. c) DNA - polimerase. 02. a) Ao final do primeiro ciclo, cada bactéria terá uma cadeia polinucleotídica normal e uma radiotiva. No segundo ciclo, duas bactérias terão uma cadeia normal e uma radioativa e duas apresentarão as duas cadeias marcadas com radioatividade. Ao término do terceiro ciclo ocorrem duas bactérias com as duas cadeias normais e seis bactérias com uma cadeia sem radioatividade e uma cadeia radioativa. b) O resultado do experimento é explicado pelo fato de a replicação do DNA ser semiconservativa. 03. a) O sistema CRISPR-Cas9 protege as bactérias contra o ataque de vírus que contém DNA como material genético. O mecanismo enzimático detecta o DNA exógeno e o corta em pontos específicos. O sistema de reparo acrescenta nucleotídeos ao DNA estranho causando a inativação dos genes invasores, O RNA-guia associado ao Cas9 bacteriano apresenta a seguinte sequência de bases nitrogenadas: GGGAUAUCCC. b) A alteração na sequência de DNA provocada pelo CRISPR-Cas9 pode inativar um gene modificando, por exemplo, o seu promotor ou o códon de início da tradução, entre outras. 04. a) O modelo C representa a duplicação da molécula de DNA proposta por Watson e Crick, indicando que cada uma das moléculas de DNA serve como molde para a formação de uma nova cadeia, chamada de replicação semiconservativa. b) A duplicação da molécula de DNA ocorre na Intérfase, no intervalo chamada S (Síntese), processo que antecede a mitose propriamente dita. A célula precisa replicar o DNA para a divisão e produção de uma nova célula. 05. Os cromossomos e os genes são como as cartas de um baralho. A cada mão, são formadas novas combinações de cartas, assim como, a cada geração, as permutações e a segregação, independente dos cromossomos homólogos, produzem novas combinações gênicas e cromossômicas nos gametas envolvidos na reprodução sexuada. A replicação semiconservativa do DNA garante que as duas cadeias pareadas do DNA se separem e se complementem, permitindo que as instruções genéticas se perpetuem nas células filhas e nas gerações futuras. ANOTAÇÕES PRÉ-VESTIBULARPROENEM.COM.BR40 BIOLOGIA I 12 REPLICAÇÃO DO DNA ANOTAÇÕES
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