Espermiograma na medicina veterinaria

Prévia do material em texto

Espermiograma
na medicina veterinária
• Oligospermia
• Azoospermia
• Teratospermia
• Astenospermia
• Leucospermia
• Hematospermia
• Ejaculado normal
• Definição: diminuição do número de
espermatozoides
• Causas
- Ejaculação incompleta
- Desequilíbrios hormonais
- Obstruções
- Infecção do aparelho genital
- Degeneração testicular inicial
- Ejaculação retrógrada
• Definição: ausência completa de
espermatozoides no sêmen
• Causas
- Ejaculação incompleta
- Defeitos congênitos
- Obstruções bilaterais
- Hipoplasia testicular
- Neoplasia testicular
- Ejaculação retrógrada
• O espermiograma corresponde a
uma das etapas do exame andrológico.
• É um exame laboratorial capaz de
analisar a fertilidade do macho, avaliando a
composição do sêmen e as condições
físicas do sêmen
• Importante para:
- Identificação de problemas
- Laudo reprodutivo
- Pré-estação de monta
• Composição:
- Células espermáticas
- Plasma seminal: proteínas, ácidos
graxos e carboidratos
- Frações
• Composição físico-química:
- temperatura (composição lipídica)
- Ph
- Osmolaridade
Definição Alterações de ejaculado
• Manutenção da qualidade seminal:
- Característica do reprodutor
- Características da amostra inicial
- Adequada manipulação do sêmen
Características do sêmen
Temperatura 37 a 38ºc
pH 6,3 a 6,7
Osmolaridade 300 a 325 mosm
Oligospermia
Azoospermia
Espermiograma
na medicina veterinária
• Definição: presença de sangue do
sêmen
• Causas
- doença prostática / HPB
- trauma peniano
- estimulação constante sem
ejaculação
• Definição: presença de
espermatozoides mortos
• Causas
- Problemas hormonais.
- Câncer testicular
- . Infecções
- Efeitos de algumas drogas
- Estresse durante a manipulação
• Definição: grande porcentagem de
espermatozoides em formato anormal,
com defeitos de morfologia
• Causas
- Pirexia
- Infecções do aparelho reprodutivo
- Alterações hormonais
- Degeneração testicular
- Senilidade
- Hereditariedade
• Definição: espermatozoides com
motilidade reduzida
• Causas
- Forte relação com teratospermia
- Contaminação
- Ejaculação incompleta
- Infecções do aparelho reprodutivo
- Aglutinação espermática
• Definição: aumento da quantidade de
leucócitos no sêmen
• Causas
- infecções do aparelho urinário
- epididimite
- orquite
- prostatite
- HPB
Teratospermia Hematospermia
Astenospermia
Necrospermia
Leucospermia
Espermiograma
na medicina veterinária
O Espermiograma é dividido em duas
etapas:
• Imediata
• Mediata
Análise imediata macroscópica
• Volume
- variação por espécie e método de
colheita
• Aspecto
- relativo ao número de células
• Coloração
- branco, amarelado, marmóreo,
perolado, marfim
Estresse de Manipulação
• Efeitos adversos:
- Capacitação espermática e
- Reação acrossômica precoces
- Astenospermia
- Necrospermia
- Teratospermia
Estresse térmico
• Efeitos adversos:
- Defeitos espermáticos característicos
- Astenospermia
- Estresse oxidativo (peça
intermediária)
- Produção de radicais livres
Estresse osmótico
• Efeitos adversos:
- Edema (solução hiposmótica)
- Desidratação (solução hiperosmótica)
Estresse fisico
• Choque mecânico:
- Manipulação rigorosa (pipetagens)
• Efeitos adversos: 
- Teratospermia
Crioinjuria
• Desidratação:
- Diminuição do volume celular e influxo
de íons
- Processo inverso na descongelação
- Rompimento de membranas
Alterações na manipulação
Analise imediata
Etapas
Imediata
•Macroscópica
•Coloração
•Volume
•Aspecto
•Odor
•pH
•Movimento de massa
•
•Microscópica 
Motilidade %
MPR%
Vigor
Turbilhonamento
Mediata
•Concentração espermática
•Patologia espermática
• são as primeiras a serem feitas
• sem o uso do microscópio 
Macroscópica
• são feitas com o uso do microscópio
Microscópica
Espermiograma
na medicina veterinária
Análise imediata microscópica
• Motilidade %
- porcentagem de SPTZ que se
movem
• MPR%
- porcentagem de SPTZ que se
movem para frente
• Vigor
- velocidade com que os SPTZ se
movem em
motilidade progressíva retilínea
- O ideal é que seja superior ou igual
a 3
• lâmina e lamínula (pré-aquecidas
37ºC);
• microscópio (100 X);
• diluição (citrato de sódio 2,9% ou
solução fisiológica)
• Resultado em porcentagem de
células
Aspecto [ ] SPTZ / mL Espécies
Cresmoso > 1 bilhão /mL
Pequenos 
ruminantes
Leitoso 500 – 1 bilhão/mL bovinos
Soroso
Até 500 
milhões/mL
Cães, equinos 
e suínos
- avermelhado/ marrom: hematospermia
- sujidades
• pH
- 6,4 a 7,8
• Odor
- sui generis
• Movimento de massa
- somente ruminantes
Volume médio de ejaculado Espécie
5-8 ml Bovino
0,8-1,2 ml Ovino
0,8-1,2 ml Caprino
150-200 ml Suíno
60-100 ml Equino
3-30 ml Canino
0,1-0,4 ml Felino
0,2-0,5 Galo
Cor Espécies
Branca equinos, cães, suíno
Marrom/ mármore Bovinos e bubalinos
Perolado Carneiros
Marfim Bodes
0 – mortos –
não se 
movem
1 - moribundos
2 – maioria 
lenta 3 – velocidade 
moderada
4 - rápidos
5 – muito rápidos
Espermiograma
na medicina veterinária
Concentração:
• Aspecto (COR):
1) cremoso / marmóreo: > 1 bilhão
SPTZ/mL
2) leitoso: 500 milhões a 1 bilhão
SPTZ/mL
3) opaco a aquoso: 200 a 500 milhões
SPTZ/mL
4) aquoso a translúcido: < 200 milhões
SPTZ/mL
• Câmara de Neubauer
- Amostra é diluida em formol salino
- [SPTZ] = n x 5 x diluição x altura
da câmara x 1000 SPTZ/mL
Analise mediata
• 5 = deslocamento intenso, ondas espessas;
• 4 = ondas com rápidos movimentos;
• 3 = ondas aparentes, movimentos 
moderados;
• 2 = ondas pouco perceptíveis;
• 1 = não tem ondas, células imóveis.
• Turbilhonamento
- Somente ruminantes!
- Ondas de espermatozoides formando
cristas, que aparecemcomo linhas mais
escuras nos pontos em que se encontram
com asoutras
- Relação entre concentração de
espermatozoide e motilidade
- Gota em microscópio (40X)
Valor medio de motilidade Espécie
40-75% Bovino
60-80% Ovino
60-80% Caprino
50-80% Suíno
40-75% Equino
70-100% Canino
70-100% Felino
60-80% Galo
Concentração media 
espermática milhões/ml
Espécie
800-2000 x 106 sptz/mL Bovino
2000-6000 x 106 sptz/mL Ovino
2500X5000 x 106 sptz/mL Caprino
200-300 x 106 sptz/mL Suíno
150X300 x 106 sptz/mL Equino
3000X7000 x 106 sptz/mL Galo
Avaliação morfologica
• Coleta de sêmen e análise morfológica
• Esfregaço com sêmen diluído - 20µl em
1ml de NaCl aquecida
- Coloração com panótico
• Câmara úmida
- à 20µl em 1ml de formol salina
• Sondas fluorescentes
• Esfregaço Corado
- 2 a 3 esfregaços bem delgados em
lâmina  sêmen diluído em sol salina
- Corar com diferentes cortantes 
panótico rápido  eosina nigrsina  fast
green
- Examinar para observar disposição das
células
- Mergulha-se a lâmina com o esfregaço
de sêmen (seco) na solução fixadora – 30 s
Mergulha-se a lâmina seca na solução I do
kit panótico – 30s  Deve-se permitir que
o excesso do corante escorra, mas a lâmina
não deve secar completamente
- Mergulha-se a lâmina na solução II do kit
panótico – 20s  O excesso do corante é
removido enxaguando-se a lâmina
gentilmente em água destilada, e finalmente
se deixa a lâmina secar por completo à
temperatura ambiente antes de realizar a
leitura.
Espermiograma
na medicina veterinária
• Câmara Úmida (Formol Salino)
- Gotas de sêmen – até obter aspecto
turvo, em solução formol tamponado 
1 a 2 gotas : 1 mL sol formol tamponado
 Colocar 1 gota da diluição na lâmina,
cobre com lamínula  Aumento de 100x
sob óleo de imersão, conta 200 células
• Defeitos menores:
• Análise de laudos
- Defeitos Maiores: até 10% 
Individuais < 5%
- Defeitos menores: até 20%  à
Individuais < 10%
- Total 30 %
Tipos de defeitos espermáticosCada técnica é específica para 
uma parte do espermatozóide!
• Cabeça estreita (delgada);
• Cabeça pequena normal;
• Cabeça gigante, curta ou larga;
• Cabeça solta normal;
• Implantação abaxial, retro-axial e para-axial;
Cabeça
• Gota distal;
• Cauda simplesmente dobrada ou enrolada;
Inserção e peça intermediaria
• Cauda enrolada na porção terminal
Cauda