Perguntas pré e pós testes Extração e Purificação de DNA e RNA

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Extração e Purificação de DNA e RNA 
Pré Teste 
1. Em 1940, Chargaff e colaboradores trouxeram informações importantes a respeito da proporção de bases nitrogenadas que compõem o DNA. Eles 
concluíram que o número de resíduos de guanina é igual ao de citosina (G = C), e que o de adenosina é igual ao de timidina (A = T). 
A partir dessa informação e de outros estudos de Chargaff e colaboradores, pode-se concluir que: 
Você acertou! 
C. a soma do número de bases pirimidinas é igual à de bases purinas (G + A = T + C). 
Se G = C e T = A, logo G + A (purinas) é igual T + C (pirimidinas). 
2. O genoma humano tem 22 cromossomos não sexuais e 2 sexuais. 
Sabendo que cada célula de linhagem não germinativa tem duas cópias de cromossomos não sexuais, o número total de cromossomos não sexuais 
presentes nessas células será: 
Você acertou! 
B. 44; 
O número total de cromossomos não sexuais presentes em células de linhagem não germinativa é 44 (22 cromossomos não sexuais vezes 2). 
 
3. Os ácidos nucleicos apresentam características moleculares específicas, como carga negativa em pH neutro, que possibilita o isolamento e a utilização 
dessas moléculas em diversas aplicações. 
Sobre a prática de isolamento do DNA ou RNA, assinale a alternativa correta. 
Você acertou! 
C. É dividida em quatro etapas consecutivas: lise ou rompimento das membranas celulares > ligação à coluna de sílica > lavagens > eluição. 
Essas são as etapas corretas. Caso você tenha alguma dúvida, leia novamente o roteiro da prática. 
 
4. O primeiro passo do método de extração e purificação do DNA ou RNA envolve a lise ou rompimento das membranas com soluções detergentes ou, até 
mesmo, uso de temperaturas elevadas. O passo seguinte é o isolamento das macromoléculas de ácidos nucleicos dos outros componentes celulares. 
Com base na leitura do Sumário Teórico e na prática realizada, em qual etapa é possível a visualização do DNA ou do RNA a “olho nu”? 
Você acertou! 
C. Durante a etapa de precipitação do DNA ou do RNA com álcoois e/ou sais. 
É muito comum a visualização de um precipitado esbranquiçado no tubo em que as moléculas de DNA ou RNA foram isoladas, após a precipitação. Entretanto, isso irá 
depender de outros fatores, como a quantidade de ácidos nucleicos presentes nas amostras. 
 
5. O protocolo de extração e purificação de DNA ou RNA é dividido em etapas. Em cada etapa, utilizam-se reagentes específicos com determinadas 
finalidades, como no caso da proteinase K, uma enzima que inativa e desnatura proteínas associadas ao DNA ou que podem degradá-lo. 
Você está na etapa 1 do protocolo de extração e purificação do DNA de uma amostra e optou por utilizar um kit comercial. Com base no que você aprendeu 
nesta prática, qual a finalidade dessa etapa? 
Você acertou! 
B. Lisar ou romper as membranas celulares; 
A primeira etapa, ou etapa 1, do protocolo de extração e purificação de DNA ou RNA é a lise ou rompimento das membranas celulares por meio da adição de 
detergentes. 
 
Pós Teste 
1. Os ácidos nucleicos (DNA ou RNsão as moléculas que "guardam" todas as informações genéticas hereditárias e contêm sequências codificantes de 
proteínas responsáveis por inúmeros processos biológicos celulares. 
Sobre os ácidos nucleicos, eles são formados por: 
Você acertou! 
C. nucleotídeos. 
Os nucleotídeos, por meio das ligações fosfodiéster, formam as moléculas de ácidos nucleicos (DNA ou RNA). 
2. O modelo da estrutura tridimensional proposto por Watson e Crick descreve o DNA como uma dupla-hélice. 
Assinale a alternativa que apresente uma das principais forças que mantêm essa dupla-hélice. 
Você acertou! 
B. Ligações de hidrogênio; 
As ligações de hidrogênio ocorrem entre as bases nitrogenadas complementares das moléculas de DNA e formam os “degraus” que mantêm a estrutura dupla-hélice 
do DNA. 
3. O DNA e o RNA apresentam características estruturais específicas que permitem que essas moléculas sejam utilizadas para várias aplicações. 
Indique a alternativa que corresponde a uma dessas aplicações. 
 
Você acertou! 
B. RT-PCR; 
A extração e purificação de DNA ou RNA é uma das etapas primordiais para a reação em cadeia da polimerase transcriptase reversa (RT-PCR). 
4. 
O protocolo de extração e purificação de DNA ou RNA envolve algumas etapas. Você é um cientista e precisa realizar esse protocolo para analisar a 
expressão gênica de uma amostra, mas o orçamento disponibilizado para esse projeto é baixo e você precisará utilizar outros reagentes mais baratos do 
que a coluna de sílica disponível nos kits comerciais. 
Para isso, assinale a alternativa correta. 
Você acertou! 
A. Durante a etapa 2 de separação do DNA ou RNA dos outros componentes celulares, você opta por adicionar solventes orgânicos (fenol-clorofórmio), faz a 
centrifugação das amostras e coleta o DNA ou RNA na fração solúvel formada; 
Essa afirmativa está correta. Em laboratórios com orçamento baixo, é muito comum a utilização de solventes orgânicos, em vez dos kits comerciais disponíveis, durante 
a etapa de separação do DNA ou RNA dos outros componentes celulares. 
5. 
Você está na etapa 2 do protocolo de extração e purificação do DNA de uma amostra e optou por utilizar a coluna de sílica. 
Com base no que você aprendeu nesta prática, qual a finalidade dessa etapa? 
Você acertou! 
C. Isolar o DNA dos outros componentes celulares. 
As moléculas de DNA têm cargas negativas que interagem com as colunas de sílica, que têm carga positiva. Dessa forma, o DNA f ica “grudado” na coluna, sendo 
separado dos outros componentes celulares.