- Relatório de prática Imunologia Clínica _ José Edivânio

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: IMUNOLOGIA CLÍNICA
DADOS DO ALUNO:
NOME: José Edivânio dos Santos Costa MATRÍCULA: 01421217
CURSO: Farmácia POLO: Petrolina-PE
PROFESSOR: Arthur Antunes de Souza
TEMA DE AULA: TIPAGEM SANGUÍNEA E TESTE RÁPIDO
RELATÓRIO:
1. TIPAGEM SANGUÍNEA
 A tipagem sanguínea é um método que determina o tipo sanguíneo de uma pessoa com base
na presença de antígenos A, B e Rh na superfície dos glóbulos vermelhos. Esta informação
é importante em situações relacionadas com transfusões de sangue, transplantes de órgãos e
gravidez e para garantir o acesso adequado e seguro a cada pessoa.
TIPAGEM SANGUÍNEA
QTD DESCRIÇÃO DAS
VIDRARIAS
QTD REAGENTES E SOLUÇÕES
2 Lâminas 1 Reagente 1 (ANTI-A)
4 Tubos 1 Reagente 2 (ANTI-B)
Pipeta 1 Reagente3 (ANTI-AB)
QTD MATÉRIA-PRIMA/INSUMO
OU ANALITO
QTD EQUIPAMENTOS POR GRUPO
Amostra (sangue com EDTA) 01 Geladeira*
01 Micropipetas automáticas com
capacidade de 50 µL
Procedimento:
Teste em lâmina:
 Na aula utilizamos já preparado uma suspensão de glóbulos a 40% no próprio soro, plasma
ou solução salina à 0,9%.
Procedimento:
10- Etapa- Adicionamos uma gota do reagente Anti-A no lado esquerdo da lâmina e uma
gota de reagente Anti-B no lado direito. Na sequência em uma segunda lâmina, adicionamos
uma gota de reagente Anti-AB.
 Os testes realizados à temperatura ambiente (20º a 25º C).
20 - Etapa- Adicionamos 1 gota da suspensão de hemácias a cada reagente.
30 - Etapa Misturamos o reagente e a suspensão de células sanguíneas numa área de 2x3 cm.
Giramos suavemente as lâminas para promover a mistura.
Resultado: Amostra de sangue aglutinado A+ positivo.
Teste em tubo:
 O teste em tubo na aula foi utilizada uma suspensão preparada a 3-5% do glóbulo a ser
testado em solução salina à 0,9%.
 E utilizamos 50 uL Microlitro da amostra total com anticoagulante e 950 uL de salina à
0,9%;
Procedimento:
10- Etapa- Acrescentamos uma gota dos reagentes Anti-A, Anti-B e Anti-AB em cada um
dos três tubos de ensaio e realizou-se a identificação.
30- Etapa- Na sequência adicionamos uma gota de suspensão de glóbulos vermelhos a 3-5%
a cada tubo.
 Misturamos bem o conteúdo, e em seguida foi centrifugado por 15 segundos.
Resultado: Positivo presença de aglutinação.
A- Qual a diferença entre tipagem direta e tipagem reversa? O que cada uma dessas
técnicas investiga?
A tipagem direta e a tipagem reversa ajuste direto e reverso são duas técnicas usadas
para examinar a relação entre variáveis ​​na pesquisa.
A escrita direta envolve a coleta de informações sobre a variável independente e a variável
dependente em um determinado momento. A relação entre essas variáveis ​​é então analisada
para determinar se existe uma relação ou correlação entre elas. Este método examina o
efeito de uma variável independente sobre uma variável dependente.
 Em resumo, a tipagem direta examina o efeito da variável independente na variável
dependente, enquanto a digitação reversa examina o efeito da variável dependente na
variável independente.
 Por outro lado, a tipagem envolve a recolha de dados sobre a variável dependente num
determinado momento e, em seguida, a recolha de dados sobre a variável independente num
momento posterior. Este método examina se a variável dependente afeta a variável
independente.
 Em resumo, a tipagem direta examina o efeito da variável independente na variável
dependente, enquanto a digitação reversa examina o efeito da variável dependente na
variável independente.
B. Descreva o que foi visualizado
 Na aula prática foi realizado teste de tipagem direta com os antígenos A, B e D, este último
para determinação do fator Rh, onde o tipo A aglutina com o antígeno A.
 O tipo B aglutina com B, AB com ambos e O não. aglutina com algo diferente do antígeno
D aglutina se o fator Rh for positivo.
C. Adicione uma ou mais fotos foto do resultado do teste realizado na aula que
represente a diferença entre a metodologia direta e indireta.
 Imagem 01: Lâminas Imagem 02: Tubos
 Resultado: A+ positivo Resultado: positivo
Obs: Não houve prática de Coombs direto e indireto, e a prática de prova cruzada não teve reagente
na prática.
D. Como devemos atribuir o laudo para o paciente;
 O laudo deve indicar qual método de teste foi utilizado, bem como os resultados dos
reagentes do método de teste e, por fim, o grupo sanguíneo e o fator Rh do sangue do 
paciente.
2. TESTE RÁPIDO
 Um teste rápido é um teste diagnóstico que fornece resultados em um curto período de
tempo, geralmente em minutos, em comparação com outros testes laboratoriais que podem
levar horas ou dias para produzir resultados. Esses testes são projetados para detectar
rapidamente a presença de um antígeno ou anticorpo específico em uma amostra biológica,
como sangue, urina, saliva, entre outros.
 Os testes rápidos são frequentemente usados ​​em uma variedade de medicamentos,
incluindo a detecção de doenças infecciosas como HIV, hepatite, sífilis, dengue e COVID-
19. Também pode ser usado para testes de drogas, detecção de gravidez, monitoramento de
açúcar no sangue e muito mais.
 Esses testes geralmente são baseados em métodos imunológicos, como imunoensaios ou
imunocromatografia, que envolvem a interação entre antígenos e anticorpos específicos.
Uma amostra biológica é colocada em uma lâmina, cassete ou dispositivo similar contendo
reagentes capazes de detectar a presença de um antígeno ou anticorpo de interesse. Os
resultados podem ser identificados por mudanças de cor, linhas de teste ou outros
indicadores.
 A. Qual o princípio do teste rápido? como é realizada a leitura?
 Os testes rápidos são recomendados para testes pessoais que podem ser realizados,
lidos e interpretados em 30 minutos e baseiam-se na detecção de anticorpos (com antígenos
imobilizados) ou antígenos (com anticorpos imobilizados, geralmente proteínas sintéticas)
que reagem com o que se deseja testar.
 A sua leitura baseia-se na observação geral das “faixas” com a tira de controle (positiva)
e na análise se aparece outra (se aparecer indica positivo; caso contrário, negativo).
 B. Essa metodologia pesquisa qual tipo de molécula?
 A metodologia de triagem sanguínea é usada para pesquisa antígenos de grupos sanguíneos
na superfície dos glóbulos vermelhos. Esses antígenos são moléculas proteicas ou
glicoproteicas que indicam divergentes tipos sanguíneos, como os antígenos do sistema
ABO (A, B, AB, O) e do sistema Rh (positivo ou negativo). Portanto, as moléculas de
antígenos de grupos sanguíneos são observadas na metodologia de triagem sanguínea.
 C. Adicione uma foto do resultado do teste realizado na aula
 O teste rápido foi utilizado em sala de aula para detecção do HIV e, embora o fabricante
tenha permitido o uso de plasma, os resultados foram negativos, conforme ilustrado a seguir.
 Imagem 01:
 Resultado: Teste de HIV negativo
TESTE RÁPIDO - HCG
 O Teste Rápido HCG é um teste usado para detectar a presença do hormônio HCG na urina
ou no sangue. O HCG é produzido pelo corpo durante a gravidez e é um indicador confiável
de gravidez.
 Os resultados do teste rápido HCG são interpretados pela presença ou ausência de uma
linha de teste. Se aparecer uma linha, indica resultado positivo e presença do hormônio
HCG e sinal de gravidez. As tiras de teste não indicam um resultado negativo sem HCG.
Procedimento:
 A realização do teste as placas e as amostras foram checadas a temperatura entre 15 – 30
°C.
 Foi utilizado e tirado do envelope 2 fitas para teste.
10- Etapa: Na aula foi adicionado 500 Microlitros de soro, utilizando a pipeta automática
injetando o soro no tubo.
20- Etapa: Na sequência posicionamos a fita dentro do tubo deixando agir por 3 minutos.
Resultado: negativo
 Foi identificado 1 linha, Teste negativo.Imagem 01:
 Resultado: Negativo
D. Como devemos atribuir o laudo para o paciente
Deve ser elaborado um relatório de acordo com as instruções para realização do teste
rápido com a amostra de sangue, fluido corporal ou plasma utilizado no teste (dependendo
do fabricante e das instruções contidas no livro).
 Para testes rápidos, é importante ensinar aos pacientes como realizar o teste padrão-ouro.
E. Associe os aspectos de sensibilidade e especificidade para esse tipo de teste:
 A sensibilidade e a especificidade são critérios importantes para avaliar a eficácia dos testes
rápidos.
 A Sensibilidade é o tamanho de um teste identificar corretamente as pessoas que realmente
têm a doença ou uma doença relacionada. Quanto maior a sensibilidade, menor a
probabilidade de ser prejudicial ou de ter um efeito negativo em alguém gravemente doente.
 A Especificidade é a capacidade do teste de identificar com precisão pessoas que não têm
uma doença ou doença associada. Quanto maior a especificidade, menor o risco de falsos
positivos, ou seja, resultados positivos de pessoas que não estão realmente doentes.
 Portanto, para que os testes rápidos sejam eficazes, é importante minimizar os erros de
diagnóstico e ser altamente sensíveis e específicos.
TEMA DE AULA: AGLUTINAÇÃO
RELATÓRIO:
 O teste de aglutinação ASO é um exame laboratorial utilizado para detectar a presença de
anticorpos antistreptolisina O no sangue, o que indica uma resposta imune à infecção por
Streptococcus pyogenes. É útil no diagnóstico de doenças causadas por essas bactérias,
como infecções de garganta, febre reumática e glomerulonefrite estreptocócica. No entanto,
mais testes e avaliação clínica são necessários para confirmar o diagnóstico.
AGLUTINAÇÃO – AEO (ASO)
 Na aula prática seguimos cada etapa:
Procedimento:
10- Etapa: Distribuimos a suspensão de látex com uma pipeta 40µl na mesma área da
amostra.
20- Etapa: Pipetamos 40µl das amostras (soro do paciente, controles positivos e negativos)
na área do cartão-teste.
30- Etapa: Misturamos bem com o uso de vareta plástica em movimentos circulares.
40- Etapa: Após 2 minutos, compare a amostra do paciente com os resultados do grupo
controle positivo e do grupo controle negativo e verifique a presença ou ausência de
aglutinação (mover o cartão).
Resultado: Negativo
Total ausência de aglutinação. Concentração abaixo de 200 UI/mL.
 Imagem: 01
 Resultado: ASO negativo
TESTE DE AGLUTINAÇÃO - FATOR REMATÓIDE (FR)
 Teste de aglutinação: O fator reumatóide (FR) é um teste laboratorial usado para detectar a
presença de anticorpos do fator reumatóide no sangue, o que indica uma resposta imune
adversa associada a doenças autoimunes, como a artrite reumatóide.
 O fator reumatóide é um tipo de anticorpo que reage com uma proteína chamada
imunoglobulina G (IgG) no corpo. A presença do fator reumatóide no sangue indica uma
resposta imunológica negativa, onde o sistema imunológico ataca as próprias células e
tecidos do corpo, causando inflamação e danos.
Na aula prática seguimos cada etapa:
Procedimento:
10- passo: Foi utilizado 40 microlitro da amostra.
2- Passo: Foi aplicado 1 gota de reagente látex nas separações de placas separadas para a
amostra a ser testada com controles positivos e negativos.
3- passo: Foi Adicionado 40 microlitros de cada amostra não diluída e de cada controle não
diluído.
4- Passo: Misturar bem com um bastão descartável, e espalhe o líquido em cada parte de
divisão da placa. Foi utilizado um bastão diferente para cada amostra.
5- Passo: Agite a placa e gire manualmente por 2 minutos. Verificar a aglutinação sob luz
incidente.
Resultado: Negativo
Total ausência de aglutinação. A concentração é inferior a 8 UI/mL.
 Imagem 01:
 Resultado: Rematóide negativo
ELISA - HIV
Obs: Não teve equipamento para realização da prática.
Expectrofotômetro para a placa de ELISA.
TESTE DE AGLUTINAÇÃO - PCR
1. Na aula prática antes do uso foi verificado a temperatura ambiente.
2. Esgotamos o conteúdo do conta-gotas e agitar o PCR reagente látex atenciosamente;
3. Utlilizamos a pipeta automática para obter o resultados mais precisos.
4. Misturar bem com o uso de vareta plástica e/ou em movimentos circulares.
Procedimento:
1- passo: Adicionamos 40 μM microlitro de reagente PCR látex (uma gota) em partes
separadas da placa para amostras de testes e controles positivos e negativos.
2- passo: Adicionamos 40 μM microlitro de cada amostra não diluída e de cada controle não
diluído.
30- passo: Foi utilizado um bastão descartável, para misturar e distribuir o líquido
uniformemente em cada seção da placa. Usamos bastão diferentes para cada amostra.
40- passo: Gire suavemente a placa manualmente por 2 minutos e observe aglutinação sob
luz incidente.
Conclusão:
 Examinamos microscopicamente se houve reação de aglutinação, o que significa que o
conteúdo de PCR no soro foi igual ou superior a 6 mg/L.
 Imagem 01:
Resultado: PCR Negativo
3. ANTI-ESTREPTOLISINA O, FATOR REUMATÓIDE E PROTEÍNA C
REATIVA
 A. Descreva cada uma das metodologias, apontando as principais diferenças entre elas.
 O método de determinação da antiestreptolisina O (ASO) baseia se no teste de aglutinação
em látex, no qual partículas de látex são misturadas com estreptolisina O no soro do
paciente. A presença de anticorpos ASO no soro provoca o acúmulo partículas de látex.
 Os testes de fator reumatóide (FR) usam uma técnica de aglutinação em látex ou um ensaio
 imunoenzimático (ELISA) para detectar a presença de anticorpos IgM, IgG ou IgA que
reagem ao FR.
 Por fim, a proteína C reativa (PCR) é medida por meio de ensaio imunofelométrico ou
ensaio imunoenzimático, que utiliza anticorpos específicos para detectar PCR no soro do
paciente.
B. Aponte as aplicações de cada um dos testes;
 O teste ASO no entanto é usado principalmente para diagnosticar infecções causadas por
Streptococcus pyogenes, como febre reumática e glomerulonefrite pós-estreptocócica.
 O teste de FR é usado para diagnosticar doenças autoimunes, como artrite reumatóide e
síndrome de Sjögren. 
 O teste PCR é utilizado como marcador de inflamação, útil no diagnóstico e monitoramento
de doenças inflamatórias como artrite reumatóide, doença inflamatória intestinal infecções.
C. Adicione pelo menos uma foto dos resultados de uma das técnicas práticas na aula
 Imagem 01:
D. Considerando esse tipo de metodologia, o teste aplicado segue os preceitos de
especificidade ou sensibilidade? Por quê?
 Em termos de especificidade e sensibilidade, o teste ASO apresenta alta sensibilidade, ou
seja, pode detectar anticorpos ASO em baixas concentrações, o que é importante no
diagnóstico de infecções estreptocócicas.
 No entanto, a sua especificidade é relativamente baixa, o que significa que podem ocorrer
resultados falsos positivos devido à presença de anticorpos ASO em outras condições
clínicas.
 O teste de FR tem alta sensibilidade, mas também baixa especificidade, o que pode levar a
resultados falsos positivos em algumas doenças não relacionadas. O teste PCR tem alta
sensibilidade e especificidade e é um marcador confiável de inflamação.
TESTE DE AGLUTINAÇÃO - VDRL
PROCEDIMENTO:
1. Na aula utilizamos a pipeta com 50µl das amostras (soro do paciente, controle positivo e
negativo) em uma cavidade da placa escavada (placa de Kline).
2. Dispensar 20µl da suspensão antigênico sobre a amostra.
3. Manualmente agitamos durante 4 minutos.
Conclusão:
4. Observe o solução imediatamente quatro minutos sob um microscópio com ampliação de
100x e compare a amostra do paciente com os resultados do controle positivo e negativo.
 Imagem 01: Imagem 02:Agitação VDRL Floculação no microscópico
4. VDRL
1. Descreva a metodologia e suas principais características
 O método VDRL (Venereal Disease Laboratory) é um exame laboratorial utilizado para
detectar a presença de anticorpos contra a bactéria Treponema pallidum causadora da sífilis.
 A principal característica e importante do teste VDRL é o uso da tecnologia de
hibridização, que combina a inibição das partículas do antígeno cardiolipina com o soro do
paciente. A frequência de anticorpos contra o Treponema pallidum no soro, acumula
partículas, o que indica resultado positivo para sífilis.
 O método VDRL é considerado um teste não treponêmico. Em outras palavras, em vez de
detectar diretamente a presença da bactéria, detecta a resposta do organismo à infecção .
 Portanto, é importante ressaltar que o teste VDRL pode produzir resultados falso-positivos
em determinadas situações, incluindo outras doenças autoimunes, gravidez, vacinações
recentes e infecções virais.
 Além disso, o teste VDRL é aplicado acima de tudo para o diagnóstico e monitoramento da
sífilis, e os resultados positivos são melhor confirmados com outros testes específicos, como
o teste de Treponema pallidum (TP-PA) e o teste de fluorescência de Treponema (FTA-
ABS).
 Em resumo, o método VDRL é um teste laboratorial utilizado para detectar a presença de
anticorpos contra a bactéria Treponema pallidum causadora da sífilis por meio da
aglutinação de partículas do antígeno cardiolipina. Este é um teste não treponêmico e é
validado com outros testes exclusivos.
2. Quais as principais diferenças entre esta técnica e as outras de aglutinação
praticadas na aula.
 Os testes treponêmicos e não treponêmicos são específicos para a sífilis, e outros testes de
aglutinação examinam os glóbulos vermelhos e o tipo sanguíneo.
3. Porque o efeito pró-zona pode ocorrer? E como você como analista clínico pode
solucionar essa interferência?
 O efeito pró-zona acontece quando há alta acúmulo de anticorpos no soro do paciente, que
podem formar um grande número de complexos imunes que não são capazes de sintetizar
partículas de látex. Isso procede em num resultado negativo, onde nenhuma aglutinação é
detectada mesmo na presença de anticorpos.
 Portanto para corrigir essa interferência, e como analistas clínico podem diluir o soro do
paciente com soro fisiológico, para retirar o soro e retirar o excesso de anticorpos. Isto
permite que a concentração adequada de anticorpos seja obtida para uma aglutinação
adequada.
 É importante seguir as instruções do fabricante do kit de teste para determinar a melhor
forma de lidar com os efeitos da pró-zona.
FONTES:
- Aula prática realizada no laboratório da Faculdade Uninassal em Petrolina-PE com a
presença do professor Artur Antunes de Souza da disciplina Imunologia Clínica.
- Avanços no diagnóstico e tratamento da artrite reumatoide. Disponível em:
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