Citologia e Microscopia

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MÉTODOS DE ESTUDO 
DAS CÉLULAS
Ciências, 8º Série
Características gerais da célula e suas estruturas
“... A célula é a unidade básica, estrutural e
funcional de todos os seres vivos...”
A área da Biologia que estuda a célula, no que diz 
respeito à sua estrutura e funcionamento.
Kytos (célula) + Logos (estudo)
TEORIA CELULAR: versão moderna
1) as células são as unidades morfológicas e fisiológicas
de todos os organismos vivos;
2) as propriedades de um dado organismo dependem
daquelas de cada uma de suas células;
3) as células originam-se somente de outras células, das
quais herdam suas características;
4) a menor unidade da vida é a célula.
DIVERSIDADE DAS CÉLULAS
VIRÚS
EUCARIONTES
PROCARIONTES
VIRUS
 PARASITAS INTRACELULARES OBRIGATÓRIOS
 DNA ou RNA
 Vírus animais, vírus vegetais e bacteriófagos
 Parte central (informação genética), parte periférica 
(proteínas), invólucro lipoprotéico
CÉLULAS 
PROCARIONTES
Bactérias
 caracterizam-se pela 
pobreza de membranas
 possuem: -membrana 
plasmática
-parede extracelular (proteção 
mecânica)
-citoplasma não 
compartimentalizado 
(polirribossomos)
-nucleóides
-não existe citoesqueleto
CÉLULAS EUCARIONTES
Células Animais e Vegetais
 caracterizam-se pela riqueza de membranas
 núcleo e citoplasma bem delimitados por membranas (trânsito 
constante de moléculas)
 formam compartimentos internos que separam os diversos 
processos metabólicos
 possuem citoesqueleto
MÉTODOS DE ESTUDOS EM BIOLOGIA CELULAR
Tipos de Microscópios
Microscopia de Luz
Convencional
Contraste de Fase
Contraste Interferencial
Campo Escuro
Polarização
Fluorescência
Confocal a Laser
Microscopia eletrônica
Transmissão
Alta Voltagem
Varredura
Outros tipos de microscópio
Tunelamento Quântico
Força Atômica
Microespectrofotometria
MÉTODOS DE ESTUDOS EM BIOLOGIA CELULAR
Com coloração 
fluorescente
Cores de
interferência
Diferenças de
índices de 
refração
Campo
escuro
Sem 
coloração
Com coloração
MICROSCOPIA
MÉTODOS DE ESTUDOS EM BIOLOGIA CELULAR
Componentes de um microscópio:
Componentes ópticos:
Fonte de luz
Sistema de lentes (condensador, 
objetiva, ocular)
Componentes 
Mecânicos:
Base ou pé
Canhão
Revólver
Platina
Parafusos macro e micrométricos
Charriot
MÉTODOS DE ESTUDOS EM BIOLOGIA CELULAR
Componentes de 
um microscópio
1. Base ou pé
2. Fonte de luz
3. Parafusos de foco
4. Braço ou haste
5. Condensador
6. Platina
7. Charriot
8. Objetivas
9. Revólver
10. Canhão
11. Ocular
Componentes e manuseio de um 
microscópio de luz binocular
LAB – PAP 071 – Bioenergética 
e metabolismo
• Identificar a localização, a partir de coloração, 
das mitocôndrias, correlacionando as afinidades 
pelos corantes aos aspectos funcionais e 
bioquímicos da organela. 
• Compreender a função das mitocôndrias nos 
processos oxi-redutores celulares. 
• Caracterizar as imagens formadas ao 
microscópio óptico das diferentes preparações 
histológicas. 
• Mitocôndrias (setas): grânul
os pequenos corados em 
negro (aspecto de areia fina) 
(corado pela eosina) Por 
causa da 
pequena dimensão, não é 
possível identificar 
perfeitamente a 
estrutura; são identificadas 
pela coloração negra. As 
mitocôndrias são organelas 
diferenciadas, encontradas 
nas células dos eucariontes, 
auxiliando no processo de 
produção de energia. 
Coloração: Polak / Contra-
coloração: Eosina. Barra = 
40µm.
O que é uma mitocôndria?
• São organelas celulares 
encontradas exclusivamente 
nas células eucariontes. É 
nelas que ocorre a 
respiração celular, um 
processo em que moléculas 
orgânicas são utilizadas na 
fabricação de adenosina 
trifosfato (ATP), que é a 
principal fonte de energia 
das células.
LAB – PAP 072 
ESPECIALIZAÇÕES DE SUPERFÍCIE LIVRE 
• Borda estriada: Na 
superfície apical das 
células, voltada para a 
cavidade do órgão, 
observa-se um tipo de 
espacialização de 
membrana, denominada 
de borda em escova ou 
borda estriada (setas) na 
microscopia de luz, na 
microscopia eletrônica 
essa mesma estrutura 
recebe a denominação de 
microvilosidade, e tem 
como característica ser 
imóvel e aumentar área de 
absorção.
LAB – PAP 072 
ESPECIALIZAÇÕES DE SUPERFÍCIE LIVRE
• Estereocílios: Revestindo 
o ducto, células epiteliais 
com especializações de 
membrana plasmática 
denominadas de 
estereocíclios (setas). 
Eles são imóveis, 
aumentam a área de 
absorção e mantém o 
espermatozóide na luz 
central do ducto.
O que é uma membrana 
plasmática?
❖Membrana Plasmática: É uma 
membrana muito fina que envolve a
célula. Ela é responsável pela troca 
de substâncias entre o meio 
interno e externo, pela proteção e 
pela forma da célula.
TRANSPORTE PASSIVO
O Transporte passivo 
ocorre a favor de um 
gradiente de 
concentração, sem 
gasto de energia para a 
célula. Temos três 
tipos de transporte 
passivo: DIFUSÃO 
SIMPLES, DIFUSÃO 
FACILITADA E 
OSMOSE.
DIFUSÃO SIMPLES
Ocorre do local de maior 
concentração para o de 
menor concentração, a 
favor de um gradiente de 
concentração.
Ex: difusão do oxigênio do 
sangue para os tecidos. 
DIFUSÃO FACILITADA
Permite o 
transporte de 
moléculas maiores 
como aminoácidos, 
monossacarídios, 
etc, que não 
conseguindo 
atravessar a 
bicamada lipídica, 
requerem que 
proteínas 
transportadoras 
facilitem sua 
passagem.
OSMOSE
Transporte de 
solvente, saindo o 
solvente do local de 
menor 
concentração em 
soluto para o local 
de maior 
concentração em 
soluto.
Citoquímica – Métodos de 
preparação de lâminas 
histológicas
PREPARO DAS AMOSTRAS...
➢Fixação = estabilização das estruturas celulares e intercelulares.
Fixação Química
1)-Fixadores químicos coagulantes: podem desnaturar as 
proteínas em graus variáveis conforme sua estrutura molecular. 
Ex: etanol. 
2)-Fixadores químicos não coagulantes: são os aldeídos reativos, 
como formaldeído e glutaraldeído, que formam ligações 
covalentes com os grupos de aa livres de proteínas, produzindo 
ligações cruzadas com as moléculas de proteínas adjacentes.
INCLUSÃO EM PARAFINA
1) Fixação
2) Desidratação (álcool 70%, 80%, 
95% e 100%)
3) Diafanização em álcool 100% + 
xilol
4) Passagem em xilol puro
5) Dois banhos de parafina (estufa) 
6) Inclusão em parafina em moldes 
apropriados
Processamento convencional
INCLUSÃO EM HISTORRESINA
1) Fixação
2) Desidratação (álcool 70% e 95%)
3) Embebição em mistura de resina + 
álcool 95%
4) Embebição em resina com 
catalizador
5) Inclusão em resina 
6) Polimerização em estufa
7) Colagem dos blocos em suporte 
PREPARO DAS AMOSTRAS...
Existe pouco conteúdo dentro das 
células que impedem a passagem da 
luz, assim células fixadas e 
seccionadas vistas ao microscópio 
óptico são transparentes, com exceção 
das células vegetais -cloroplastos!!!
Uma maneira de tornar as células 
visíveis é a utilização de corantes!!!
Corantes = grupos cromofóricos 
(responsáveis pela cor). 
COLORAÇÃO DAS LÂMINAS 
PERMANENTES
Hematoxilina e Eosina
CORANTE BÁSICO (grupamento cromofórico é 
catiônico +) → afinidade por elementos ácidos 
dentro das células – moléculas basófilas)
CORANTE ÁCIDO (grupamento cromofórico é 
aniônico -) → afinidade por elementos básicos 
dentro das células – moléculas acidófilas)
TECIDO EPITELIAL CORADO POR DIFERENTES CORANTES
Tecido sanguíneo
• Eritrócitos: O leucócito 
eosinólfilo(E) aparece 
contendo núcleo bilobulado 
e com o citoplasma repleto 
de grânulos corados pela 
eosina em vermelho 
intenso. Devido ao acúmulo 
de proteína arginina no 
"internum" destes grânulos 
lisossômicos eles aparecem 
bem corados. A porção do 
"externum" apresenta-se 
repleta de enzimas 
hidrolíticas típicas dos 
lisossomos. Esfregaço 
sanguíneo corado com May-
Grünwald-Giemsa.
Tecido Sanguíneo
Reticulócitos são hemácias imaturas. 
São produzidos pela medula óssea 
quando as células tronco se diferenciampara formar hemácias.
Duodeno
• O duodeno é um 
componente do 
intestino delgado, 
nele estão presentes 
as enterovilosidades. 
Grupo de células 
responsáveis pela 
absorção, formação 
do bolo alimentar e 
digestão dos 
alimentos 
absorvendo os 
nutrientes
Língua
Avaliação da divisão celular –
Núcleo interfásico
Extração do DNA da cebola
LAB-PAP 075 DIVISÃO CELULAR. COLORAÇÃO: 
HEMATOXILINA/EOSINA
• Nessa figura observam-se células
na fase de Intérfase (cabeça de
seta preta): cromatina organizada
em finos grânulos basófilos e
nucléolo evidente. Além disso,
também encontramos células em
divisão, nas fases:
• Prófase (cabeça de seta amarela)
– núcleos arredondados (inicio da
prófase), ausência de nucléolo,
presença de filamentos de
cromatina que gradativamente se
condensam organizados em forma
de um emaranhado ou como
pontos mais grosseiros.
• Metáfase (cabeça de seta azul) –
grau máximo de condensação dos
cromossomos dispostos no plano
equatorial da célula.
LAB-PAP 075 DIVISÃO CELULAR. 
COLORAÇÃO: HEMATOXILINA/EOSINA
• Corte de raiz de cebola. Nesse 
outro corte encontramos células 
em: Telófase (cabeça de seta verde) –
descondensação dos cromossomos, 
reorganização do núcleo e citocinese; 
Intérfase
Ciências, 8º Série
Características gerais da célula e suas estruturas
Tecidos que constituem o organismo 
humano
Tecido Epitelial 
• Tecido epitelial 
de revestimento 
simples cúbico. 
O revestimento 
dos túbulos 
coletores do rim 
(asteriscos – em 
corte transversal) 
apresentam uma 
única camada de 
células cúbicas.Corte de rim
• Tecido epitelial de 
revestimento 
estratificado 
pavimentoso 
queratinizado. Observe 
as várias camadas do 
epitélio. A camada mais 
externa é formada por 
células mortas (seta) 
cheias de queratina. Logo 
abaixo, aparece uma 
camada com células 
achatadas (pavimentosas) 
(cabeça de seta). As 
outras camadas 
apresentam células 
poliédricas (asterisco).
Corte de pele palmar
• Tecido epitelial de 
revestimento 
estratificado 
pavimentoso não-
queratinizado. Observa-
se que o epitélio é 
formado por várias 
camadas de células 
(estratificado), sendo a 
camada mais superficial 
formada por células 
achatadas 
(pavimentosas) (seta). 
Por se tratar de um 
epitélio estratificado a 
classificação em relação 
à forma das células é de 
acordo com a camada 
mais superficial.Corte de esôfago
O pâncreas contém células glandulares 
exócrinas e endócrinas sendo considerada 
uma glândula mista. Porção 
endócrina (ilhotas pancreáticas ou de 
Langerhans): pequenos aglomerados de 
células (coloração diferenciada), 
organizadas em cordões, entremeadas na 
porção exócrina. São reconhecidos dois 
tipos de células nestas ilhotas: células 
acidófilas (róseas, células alfa: secretoras 
de glucagon) (seta) e células basófilas 
(arroxeadas, células beta: secretoras de 
insulina) (cabeça de seta). Classificação 
da porção exócrina: glândula exócrina 
composta acinosa serosa: Porção exócrina 
(asterisco): Possui ductos de diferentes 
calibres (composto) e porções secretoras 
com formas arredondadas (acinosas) e 
produto de secreção seroso.
Corte de pâncreas.
Glândula endócrina vesicular ou 
folicular. A tireoide apresenta células 
cuboides (Tecido epitelial de revestimento 
simples cúbico - cabeça de seta) 
organizadas em vesículas ou folículos, 
contendo secreção (coloide - asteriscos) 
corada em rosa e bem homogênea. Por 
não possuir ductos, é denominada 
glândula endócrina. Observa-se na foto, 
também, a presença de vasos sanguíneos 
(setas).
Corte de tireoide.
Epidídimo 
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	Slide 10: MICROSCOPIA
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	Slide 13: Componentes e manuseio de um microscópio de luz binocular 
	Slide 14: LAB – PAP 071 – Bioenergética e metabolismo
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	Slide 16: O que é uma mitocôndria?
	Slide 17: LAB – PAP 072 ESPECIALIZAÇÕES DE SUPERFÍCIE LIVRE 
	Slide 18: LAB – PAP 072 ESPECIALIZAÇÕES DE SUPERFÍCIE LIVRE
	Slide 19: O que é uma membrana plasmática?
	Slide 20: TRANSPORTE PASSIVO
	Slide 21: DIFUSÃO SIMPLES
	Slide 22: DIFUSÃO FACILITADA
	Slide 23: OSMOSE
	Slide 24: Citoquímica – Métodos de preparação de lâminas histológicas
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	Slide 26
	Slide 27
	Slide 28
	Slide 29
	Slide 30: Tecido sanguíneo
	Slide 31: Tecido Sanguíneo
	Slide 32: Duodeno
	Slide 33: Língua
	Slide 34: Avaliação da divisão celular – Núcleo interfásico
	Slide 35: Extração do DNA da cebola
	Slide 36: LAB-PAP 075 DIVISÃO CELULAR. COLORAÇÃO: HEMATOXILINA/EOSINA 
	Slide 37: LAB-PAP 075 DIVISÃO CELULAR. COLORAÇÃO: HEMATOXILINA/EOSINA
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	Slide 39: Tecidos que constituem o organismo humano
	Slide 40: Tecido Epitelial 
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	Slide 42
	Slide 43
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	Slide 46: Epidídimo