Estudo Dirigido MICROBIOLOGIA CLÍNICA 1

Prévia do material em texto

Discente: Bianca Alves Ferreira 
Disciplina: Microbiologia Clínica 
Curso: Farmácia 
Docente: Aline Teixeira Amorim 
Data: 09/10/2023 
 
ESTUDO DIRIGIDO – I UNIDADE 
 
1. Descreva as características de uma célula bacteriana. 
As células bacterianas possuem membrana plasmática, parede celular, 
área nucleotídica contendo o DNA. Observa-se citoplasma, ribossomos, 
cápsula, inclusão, plasmídeo, fimbrias e flagelos. O DNA circular é único 
considerado como genona haploide, ausência de mitocôndrias, complexo 
de golgi e reticulo endoplasmático. Assim como também, a membrana 
plasmática não contém colesterol, a parede celular sendo constituída de 
proteínas, peptídeos e peptideoglicano. A reprodução é assexuada e elas 
se dividem por fissão binária. A respiração ocorre através da membrana 
plasmática. 
2. Descreva os formatos e arranjos que as bactérias podem 
apresentar. 
Formatos em: Cocos: redondos e ovais. Alongados ou achatados. 
 Bacilos: cilíndricas, alongadas e forma de bastonete 
 Espiroquetas: vibriões, espirilo e espiroquetas 
Arranjos de cocos: diplococos, estreptococos, sarcinas, estafilococos 
Arranjos de bacilos:diplobacilo, estreptobacilos. 
3. Qual a constituição química da parede celular de gram positiva e 
gram negativa. 
Gram positiva: Múltiplas camadas de peptídeoglicano, ácidos teicoicos 
submerso no peptideoglicano e lipoteicoicos que se inicia na membrana 
plasmática e vai submergindo ao peptideoglicano. 
Gram negativa: Poucas camadas de peptideoglicano. E além da 
membrana plasmática externamente a parede celular, ela contém uma 
membrana lipídica que se chama membrana externa que contém o 
componente chamado LPS. 
4. Qual a importância clínica do LPS bacteriano? 
 É uma substância ligada à parede celular das bactérias gram-negativas 
com o propósito de manter a integridade das suas paredes celulares. A 
endotoxina é o principal componente da parede celular e é extremamente 
importante para a sobrevivência celular das bactérias. É responsável por 
várias características de doenças, como febre e choque (especialmente 
hipotensão), causadas por esses organismos. 
5. Descreva como funciona a coloração de Gram. 
• Cubra o esfregaço com violeta de cristal e agir por 1 minuto 
(corante); 
• Acrescenta lugol e deixar agir por 1 minuto (mordente); 
• Lavar com água, acrescentar álcool e deixar agir por 15 segundos 
(descoloração); 
• Lavar com água, coloca-se fucsina e deixar agir por 30 segundos 
(contracorante). 
Ao lavarmos as células com álcool, as bactérias gram negativas 
são descoradas, enquanto que as bactérias gram positivas retêm 
o complexo CV-1, devido a sua parede celular funcionar como uma 
barreira a eluição do complexo corante pelo álcool. 
6. Explique cada uma das fases do crescimento bacteriano em meio 
de cultura. 
• Fase de lag ou latência: Nesta fase os microrganismos não revelam um 
aumento de número em determinações de massa, toda via, geralmente 
demonstram que há um aumento, reflexo de um aumento no tamanho dos 
indivíduos. 
• Fase de log ou crescimento exponencial: Nesta fase os microrganismos 
se encontram na plenitude de suas capacidades, num meio cujo 
suprimentos de nutrientes é superior às necessidades do microrganismo. 
• Fase estacionária: Nesta fase, a velocidade de crescimento dos 
microrganismos vai diminuindo até atingir a fase em que o número de 
novos microrganismos é igual ao número de microrganismos que morre. 
As causas dessa parada de crescimento podem ser devido ao acúmulo 
de metabólitos tóxicos, o esgotamento de nutrientes e o esgotamento de 
O2. 
 • Fase de declínio ou morte: Nesta fase, a quantidade de microrganismos 
que morre torna-se progressivamente superior àquela dos que surgem. 
 
7. Como as bactérias podem ser classificadas quanto à: 
a. Temperatura 
Psicrófilos 15°C; psicrotróficos 20°C; mesófilos 37°C; termófilos 
50-60°C; hipertermófilos 80-100°C. 
b. Gás Oxigênio (O2) 
Aeróbios obrigatórios: Exigem a presença de O2; 
Microaerófilos: Requerem pequenas quantidades de O2; 
Anaeróbios obrigatórios: Não toleram a presença de O2; 
Anaeróbios aerotolerantes: Não utilizam O2, mas este não é tóxico. 
8. Descreva os principais métodos de esterilização e desinfecção 
A esterilização é a inativação ou remoção de todos os microrganismos, 
incluindo os esporos bacterianos, os quais são altamente resistentes. 
Exemplo: esterilização a vapor, na autoclave com temperaturas 121°C. 
A desinfecção consiste na eliminação de muitos microrganismos, mas não 
de todos. Portanto, alguns organismos e esporos bacterianos sobrevivem. 
Exemplo: álcool, fenol, cloro, peroxido de hidrogênio. 
9. Diferencie os meios de cultura para crescimento bacteriano, e cite 
exemplos. 
a. Simples: Possui os nutrientes essenciais para o crescimento dos 
microrganismos pouco exigentes. Ex.: caldo simples. 
b. Seletivo: É um meio que favorece o crescimento de determinados 
microrganismos em detrimento de outros, geralmente devido à 
adição de substâncias inibidoras. Ex.: ágar MacConkey 
c. Diferencial: Este meio possui substâncias que evidenciam uma 
característica que permite separar um grupo ou uma espécie de 
microrganismos. Ex: ágar sangue diferencia staphylococus e 
streptococus alfa e beta hemolíticos, através do padrão de 
hemólise das hemácias do meio; ágar MacConkey diferencia as 
bactérias gram-negativas em lactose positiva ou lactose negativa. 
d. Enriquecido: Neste meio, além das fontes nutricionais usuais, 
são adicionados: sangue, soro, ovo, extrato de levedura, extratos 
teciduais, etc. Este meio de cultura permite o crescimento de 
microrganismos exigentes que necessitam de fatores de 
crescimento, porém não há inibição do crescimento de outros 
microrganismos. Ex.: ágar sangue. 
10. Descreva os procedimentos gerais para preparação e distribuição 
de meio de cultura: 
BHI ágar: Dissolver o BHI na H2O destilada e agitar bem; ferver em 
microondas ou placa aquecida agitando sempre para dissolver a água; 
autoclavar em garrafas a meia rosca por 15 minutos a 121º C; distribuir 
em placas ainda quente, antes de solidificar. 
BHI caldo: Dissolver o BHI na H2O destilada, agitar bem; autoclavar tubos 
ou garrafas a meia rosca por 15 minutos a 121º C; distribuir o BHI caldo 
estéril nos tubos. 
a. Descreva as provas bioquímicas utilizadas para identificação e 
diferenciação dos grupos de bactérias de interesse médico 
Estafilococos, estreptococos, enterococos e outros cocos gram 
positivos 
Prova da catalase: Com a alça bacteriológica ou com um palito coleta-
se o centro de uma colônia suspeita e esfrega-se em uma lâmina de 
vidro. Colocar sobre este esfregaço uma gota de água oxigenada a 
3% e observar a formação de bolhas. Estafilococos a prova é 
geralmente positiva, enquanto que para a estreptococos é negativa. 
Tolerância ao NaCl: Semear as provas nesse meio na concentração 
de 6,5 de Nacl, tornando-se um meio semisseletivo para o 
desenvolvimento de alguns microrganismos. É positivo para 
enterococos quando se observa uma turvação no meio. 
11. Explique por que o Ágar Manitol é seletivo e diferencial. 
Este é um meio seletivo utilizado para o isolamento de estafilococos. O 
meio consiste em caseína digerida e tecido animal, extrato de carne, 
manitol, sais e vermelho de fenol. Os estafilococos podem crescer na 
presença de elevadas concentrações de sal, e o S. aureus pode fermentar 
o manitol, produzindo colônias de coloração amarela nesse meio. 
12. Por que o Ágar Manitol fica amarelo após o crescimento dos S. 
aureus? 
O Staphylococcus aureus tem a capacidade de fermentar o manitol em 
meio contendo 7,5 % de cloreto de sódio, denominado ágar manitol 
salgado. O indicador de pH é o vermelho de fenol, que indica uma reação 
positiva quando o meio ao redor das colônias se torna amarelo, e negativa 
quando permanece avermelhado.As bactérias s.aureus produzem um 
ácido e ao se juntar com o Manitol ocorre a fermentação e muda-se para 
uma cor amarelada. 
13. Explique como ocorre a identificação de S. aureus e outros 
Staphylococcus não aures pela prova da Dnase. 
Pegar uma colônia por 24h. Derramar a solução de ácido clorídrico sobre 
a placa e se formar um halo claro ao redor da placa é positivo para 
staphylococcus aureus e não formando o halo é negativo e considera 
como staphylacoccus não aureus. 
14. Como é feita diferenciação de Staphylooccus não aureus? 
Prova da coagulase, teste de ágar monitol, teste de Dnease. 
15. Classifique o perfil de hemólise das bactérias crescidas em ágar 
sangue. 
Alfa-hemolíticas: Lise parcial das hemácias ao redor da colônia no ágar 
sangre; 
Beta-hemolíticas: Lise total das hemácias ao redor das colônias no ágar 
sangue; 
Gama-hemolíticas: Ausência de lise ao redor da colônia do ágar sangue. 
16. Qual o nome da enzima que confere a propriedade hemolítica 
aos Streptococcus pyogenes? 
ramnose n-acetilglicosamina 
17. Quais as características que distinguem os enterococos dos demais 
cocos Gram positivo e catalase negativo. 
Realizar teste de bile-esculina, porque é um meio seletivo para 
enterococos e streptecoccus bovis. No entanto para confirmação exata é 
fazer o teste de tolerância ao NaCl (6,5), por ser exclusivamente positivo 
para enterococos.