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Instituto de Ciências da Saúde Biologia, Histologia e Embriologia 1 Elementos Citoplasmáticos A membrana delimita o perímetro celular, separando o meio externo (LEC – líquido extracelular) do meio interno (LIC – líquido intracelular). O LIC, nos eucariontes, também recebe o nome de matriz citoplasmática, ou citosol. O citoplasma é uma solução em estado coloidal, ou seja, gelatinoso, e está presente em todos os tipos celulares, tanto eucariontes como também procariontes, devido a sua função. É no citoplasma que ocorrem todas as reações químicas da célula. Matriz Citoplasmática – Citosol O citosol se refere apenas à parte líquida do citoplasma. Essa solução tem característica gelatinosa e, em alguns pontos, pode apresentar maior ou menor consistência. Sua composição é bem variada entre os diferentes tipos celulares. Diversas macromoléculas são encontradas dispersas no citosol na forma de inclusões. O conteúdo das inclusões pode variar tanto entre as diferentes espécies, quanto entre os diferentes tecidos de uma mesma espécie. Nas células hepáticas e musculares, por exemplo, é comum encontrarmos inclusões de glicogênio, ou grânulos de glicogênio, que serão utilizadas como fonte de energia, uma vez que o glicogênio é um polissacarídeo. Outra forma de reserva de energia são as gotículas de lipídios, normalmente formadas por triacilglicerídio, que, embora possam existir em todas as células, são mais comuns em células hepáticas e musculares. Células como os melanócitos da pele e das mucosas têm seu citoplasma rico em um pigmento, a melanina, que confere proteção contra a radiação ultravioleta. Além disso, são encontrados dispersos no citoplasma os íons, moléculas carregadas positivas ou negativamente que são importantes para a manutenção da carga elétrica da membrana, da manutenção do pH celular, em torno de 7,2, e da pressão osmótica da célula. Ribossomos Os ribossomos são produzidos no nucléolo, um componente nuclear, e são formados por proteínas e RNA ribossômico. A maioria dos ribossomos é encontrada livre no citoplasma, mas também pode ser encontrada nas mitocôndrias e no retículo endoplasmático rugoso. Apenas uma parte das proteínas sintetizadas permanece no citoplasma, e o restante é encaminhado para o núcleo ou para as organelas. As proteínas sintetizadas pelos ribossomos mitocondriais acabam permanecendo na própria mitocôndria, enquanto aquelas sintetizadas pelos ribossomos associados ao retículo são normalmente secretadas para o meio externo. Instituto de Ciências da Saúde Biologia, Histologia e Embriologia 2 Retículo Endoplasmático O retículo endoplasmático é uma rede de membranas que apresenta uma conformação semelhante a um grupo de túbulos achatados. Eles se iniciam como um prolongamento do envoltório nuclear e se estendem por todo o citoplasma. Na região próxima ao núcleo, há uma série de ribossomos associados externamente, recebendo o nome de retículo endoplasmático rugoso. À medida que a estrutura se afasta do envoltório nuclear, os ribossomos vão diminuindo e a região que fica desprovida de ribossomos associados passa a se chamar retículo endoplasmático liso. O retículo endoplasmático rugoso (RER) tem sua função associada à síntese e modificação de proteínas que serão inseridas em outras organelas, na membrana plasmática ou que serão secretadas. É comum que o RER sempre esteja próximo ao complexo de Golgi, uma vez que essas duas organelas atuam em conjunto no processo de modificação e endereçamento das proteínas. Já o retículo endoplasmático liso (REL) tem sua função associada à síntese de lipídios e à modificação de algumas proteínas. Complexo de Golgi O complexo de Golgi sempre está posicionado próximo ao retículo endoplasmático rugoso devido às funções interligadas que ambos possuem na sinalização e no endereçamento de proteínas. Cada região do complexo de Golgi tem um papel específico nas modificações de proteínas que foram sintetizadas pelo RER. Existem regiões que são responsáveis por modificações químicas, como glicosilação (adição de carboidratos), fosforilação (adição de fosfato) ou proteólise (clivagem da proteína). Existem regiões que são responsáveis pelo empacotamento de proteínas em vesículas para sua distribuição em outros pontos da célula ou secreção. Lisossomos Dentre as diversas vesículas liberadas pelo complexo de Golgi, uma tem um destino diferente. Essas vesículas possuem um tamanho maior do que as outras e delimitam um espaço rico em enzimas digestivas de característica ácida. O pH dentro do lisossomo é 5,2. As enzimas existentes dentro do lisossomo são chamadas de hidrolases ácidas e são sintetizadas pelos ribossomos do retículo endoplasmático rugoso. O mecanismo de ação dessas enzimas está diretamente ligado à função dos lisossomos, que é a reciclagem de macromoléculas não funcionais e a digestão de substâncias adquiridas por fagocitose Instituto de Ciências da Saúde Biologia, Histologia e Embriologia 3 A digestão celular é um importante processo modulado pelos lisossomos, uma vez que permite tanto a destruição de elementos exógenos que possam ser prejudiciais para o organismo, como as bactérias, quanto possibilita a reciclagem de moléculas endógenas, permitindo a reutilização dos seus elementos para outros processos. O mecanismo de digestão celular está intimamente ligado aos processos de endocitose e exocitose e consiste na formação do endossomo e na sua posterior fusão com o lisossomo. A fusão endossomo‑lisossomo permite a mistura das enzimas ácidas com as macromoléculas a serem quebradas, formando o vacúolo digestivo. As moléculas menores geradas por esse processo atravessam a membrana do vacúolo e chegam ao citoplasma onde serão reutilizadas; já aquelas que não são interessantes para a célula permanecem no vacúolo, agora chamado de residual, e são eliminadas por exocitose. Mitocôndrias A mitocôndria é a organela mais complexa de todas. É dotada de uma organização única e a única a possuir seu próprio DNA. A mitocôndria é dotada de uma membrana externa dupla e uma membrana interna simples que se expande em direção ao seu interior, formando prolongamentos conhecidos como cristas mitocondriais. O espaço delimitado pelas membranas externas e interna é preenchido por um fluido conhecido como matriz mitocondrial. Nessa matriz são encontradas sequências circulares de DNA, o chamado DNA mitocondrial, e ribossomos livres. Instituto de Ciências da Saúde Biologia, Histologia e Embriologia 4 Todas as células possuem mitocôndrias. Essa organela é essencial para a sobrevivência da célula, uma vez que nela é produzida a maior parte da energia para a ocorrência das reações químicas necessárias para a manutenção da viabilidade celular – respiração celular. Na mitocôndria ocorrerão as reações bioenergéticas e as reações químicas oxidativas que irão produzir o ATP (adenosina trifosfato), molécula responsável por fornecer energia para as reações químicas da célula. Na matriz mitocondrial ocorrerá as reações do Ciclo de Krebs, processo responsável pela produção das coenzimas reduzidas. As coenzimas reduzidas são reservatórios de prótons e elétrons, elementos essenciais para a síntese de ATP. As coenzimas reduzidas serão oxidadas pelas proteínas da cadeia de transporte de elétrons, localizadas nas cristas mitocondriais. Como resultado dessa oxidação, os prótons e elétrons serão liberados e forçarão a passagem de prótons da matriz mitocondrial para o espaço intermenbranas. Os prótons do espaço intermembranas precisam retornar para a matriz mitocondrial e utilizam como passagem a proteína bomba ATP sintase. Ao passarem por essa proteína, os prótons possibilitam a união de um ADP com o fosfato inorgânico formando o ATP. Sem a energia produzida por esses processos, a célula é incapaz de sobreviverdevido à falta de energia. Citoesqueleto Celular Uma vez que o citosol é uma solução coloidal e, portanto, sem nenhuma rigidez, a manutenção da forma celular através apenas da membrana plasmática não seria possível. Para tanto, a célula possui uma rede de filamentos proteicos que funcionam como se fossem o alicerce de uma casa. É o chamado citoesqueleto celular. Dentre as funções atribuídas ao citoesqueleto, podemos citar: - Forma celular – a manutenção da forma celular e a grande variedade de morfologias celulares existentes são possíveis graças à forma como as proteínas do citoesqueleto estão distribuídas; - Movimentos celulares – a realização de movimentos celulares, como os que ocorrem durante a fagocitose e na contração muscular; - Movimentos intracelulares – a manutenção da posição das organelas, bem como o trânsito de vesículas pelo citoplasma e o processo de separação dos cromossomos durante a divisão celular. Para que todas essas funções possam ser realizadas, o citoesqueleto é formado por três classes de filamentos proteicos: - Microtúbulos, filamentos intermediários e filamentos de actina, que formam o citoesqueleto em si. A interação entre os diversos grupos de proteínas que formam o citoesqueleto permite que a célula se adapte rapidamente conforme a necessidade. Filamentos Intermediários Os filamentos intermediários atuam na manutenção da estrutura geral da célula e no suporte, e estão distribuídos ao longo de toda a área celular, concentrados ao redor do núcleo. A distribuição inadequada dos filamentos intermediários pode estar associada a algumas doenças. Células nervosas de pacientes que sofrem com a doença de Alzheimer possuem alterações na distribuição dos seus neurofilamentos. Na cirrose hepática de origem alcoólicas são observados hepatócitos com acúmulos de filamentos intermediários de queratina, formando inclusões chamadas de corpúsculos de Mallory. Instituto de Ciências da Saúde Biologia, Histologia e Embriologia 5 Microtúbulos São filamentos longos e delgados formados por uma proteína chamada de tubulina. Os monômeros de tubulina se unem formando dímeros que se associam em forma de hélice, mas que estão em constante reorganização e crescimento dentro do citoplasma celular. Embora estejam distribuídos por todo o citoplasma, existe uma maior concentração desses filamentos na periferia da célula, enquanto no citoplasma eles formam uma rede interconectada que permite o trânsito de vesículas e outras estruturas. Os microtúbulos possuem várias funções dentro da célula, dentre elas podemos citar: - transporte intracelular de vesículas e organelas, como os lisossomos, as vesículas secretoras e os endossomos; - motilidade celular através dos cílios e dos flagelos; - movimentação dos cromossomos durante os eventos de mitose e meiose; - participação na citocinese e na formação dos centríolos; - motilidade celular, como observada na fagocitose; - manutenção da forma celular, em especial naquelas células que não são simétricas. Os microtúbulos citoplasmáticos desempenham a função de transporte de vesículas e organelas, na motilidade celular e na manutenção da forma celular. Os microtúbulos mitóticos são aqueles que participam da movimentação dos cromossomos. Os centríolos são formados por nove trincas de microtúbulos distribuídos de forma octogonal. São mais abundantes próximos ao núcleo e, ao seu redor, são encontrados vários monômeros de tubulina, essa estrutura também é responsável por iniciar a formação dos cílios e dos flagelos. Instituto de Ciências da Saúde Biologia, Histologia e Embriologia 6 Durante o processo de divisão celular também existe a participação dos centríolos, que atuarão na formação das fibras do fuso. Assim que se inicia o processo mitótico ou meiótico, os centríolos se posicionam nos polos celulares, determinando o local de onde partirão os fusos mitóticos que se ligarão aos centrômeros dos cromossomos, permitindo seu alinhamento e sua separação durante a anáfase. Cílios e Flagelos Os cílios e os flagelos são duas estruturas associadas à motilidade celular. Cílios e flagelos se diferenciam em relação ao tamanho e a função. Os cílios são projeções menores e numerosas que ficam localizadas na superfície apical de uma célula. No ser humano são encontrados nas tubas uterinas e no trato respiratório e associados a células que secretam muco. Permitem o impulso de uma partícula de poeira em direção ao meio externo, no caso do epitélio respiratório, ou a condução do óvulo em direção ao útero, no caso das tubas uterinas. Flagelos são estruturas únicas e longas encontradas apenas nos espermatozoides, quando se trata do ser humano. Os flagelos, ao se movimentarem, impulsionam os espermatozoides para frente através de um movimento semelhante ao de uma hélice em um barco. Flagelos precisam de uma maior quantidade de ATP para realizarem seu movimento; na base do flagelo são encontradas várias mitocôndrias que fornecem a energia necessária para que o movimento aconteça. Filamentos de Actina Dentre todos os filamentos que formam o citoesqueleto, os filamentos de actina, são os mais curtos, finos e flexíveis de todos. O filamento de actina é formado pela polimerização de vários monômeros de actina, que se organizam em um arranjo helicoidal de filamentos duplos. Dentre as principais funções estão: - Manutenção da forma celular; - Locomoção celular – movimentos amebóides; - Fluxo citoplasmático – movimentos de organelas no citoplasma; - Fixação e movimentos de proteínas de membrana - ancoragem; - Formação de microvilosidades – especializações celulares de células epiteliais. Embora possam ser encontradas em vários tipos celulares, as microvilosidades são mais abundantes nas células da mucosa intestinal devido a sua característica absortiva. A presença das microvilosidades na superfície apical das células aumenta a superfície de absorção celular. Estruturalmente, as microvilosidades são formadas por feixes paralelos de filamentos corticais de actina que se projetam para o meio externo; na base das microvilosidades, sustentando os feixes de actina, temos uma rede de filamentos intermediários. Algumas pessoas possuem uma alteração genética que as torna intolerantes a uma proteína presente nos grãos como trigo, aveia, cevada etc. Essa proteína é o glúten, e as pessoas que manifestam essa intolerância possuem a doença celíaca. A doença se caracteriza, dentre outras coisas, pela destruição das microvilosidades intestinais, prejudicando a absorções de nutrientes e provocando um quadro inflamatório com diferentes gravidades. Instituto de Ciências da Saúde Biologia, Histologia e Embriologia 7 Miofibrilas Conjuntos de proteínas do citoesqueleto de células musculares, cuja principal característica é a capacidade de adaptar‑se à atividade mecânica da célula, encurtando‑se durante a contração e alongando‑se durante o relaxamento. As miofibrilas são formadas por filamentos de actina (mais finos) e miosina (mais grossos) dispostos ao longo de toda a extensão da célula muscular e organizados na forma de sarcômeros. Quando o músculo está relaxado, os filamentos de actina e miosina estão separados; na presença de um estímulo adequado, os filamentos se aproximam e interagem provocando o encurtamento do sarcômero e a contração da musculatura.