Roteiro da Atividade Presencial - AP2 - Aluno (1)

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· ATIVIDADE PRESENCIAL 02
Disciplina: Bioquímica Clínica
Unidades Temáticas do Material Didático: Unidade II 
Professor(a): Eleandro Aparecido Tronchini
Atividade 
- Solicitar com antecedência aos técnicos do laboratório que deixem as aulas práticas montadas na bancada, contendo os materiais e reagentes necessárias.
- Recepcionar os alunos no laboratório de Bioquímica clínica;
- Solicitar aos alunos para lavarem as mãos antes de iniciar a atividade;
- Cobrar o uso de EPIs (sapato fechado, touca, máscara, jaleco, óculos e luva);
- Cada bancada deve apresentar um roteiro da aula prática;
- Dividam os alunos em grupos, com no máximo, 02 alunos por bancada.
. Conteúdos 
Os conteúdos abordados nesta atividade são referentes a técnica de determinação de Colesterol Total e Determinação de Triglicerídeo. É de suma importância que os alunos assistam as aulas gravada das unidades II e III da disciplina Bioquímica clínica. 
- Espectrofotômetro;
- Centrifuga;
- Pipetas automática;
- Ponteiras;
- Estantes para tubos;
- Banho maria;
- Etiqueta para identificação;
- Seringa e agulha para coleta de sangue;
-Garrote;
- Tubo de coleta de sangue – tampa vermelha (soro)
- Kit enzimático para determinação de colesterol total e triglicerídeos;
Objetivo da atividade 
- Promover ao aluno a associação dos conhecimentos teóricos das disciplinas juntamente com a prática. 
-Tornar os acadêmicos do curso aptos a desenvolver a rotina de trabalho dentro do contexto do laboratório de análises clínicas, permitindo assim uma boa atuação no mercado e prestar uma boa qualidade dos serviços.
4. Importância do Conteúdo 
Espera-se que ao final desta atividade, os acadêmicos sejam capazes de: 
· Identificar os equipamentos usados no laboratório para determinação das dosagens sanguínea de colesterol total e triglicerídeos;
· Compreender a importância da rotina de trabalho dentro do laboratório de análises clínica;
· Compreender a importância de cada etapa para o desenvolvimento do exame a ser realizado;
· Entender a interpretação dos exames em questão;
Contextualização e preparação para o estudo
 Prezado acadêmico, iremos iniciar o estudo da nossa atividade pratica, com a determinação de Colesterol Total na parte I e determinação de Triglicerídeos na parte II, desejo um excelente estudo a todos!
É importante destacar importante que o processo de coleta de sangue é uma etapa inicial muito importante para um resultado seguro da determinação do colesterol total e triglicerídeos. 
A dosagem do colesterol no sangue, juntamente com a de triglicérides e de colesterol HDL, é empregada principalmente na avaliação de risco de doença arterial coronariana e no monitoramento de pacientes com hipotireiodismo, diabéticos e obesos.
Descrição da atividade 
Coleta de sangue
Escolher um aluno e realizar a coleta de sangue para obtenção do soro para as analises de colesterol total e triglicerídeos;
OBS: Deixar o soro armazenado na geladeira em epeendorf e identificado para o dia seguinte, para realizar a dosagens de triglicerídeos;
PARTE I
Determinação de Colesterol Total
Amostra: Soro
Procedimento Técnico Manual
Espectrofotômetro (leitura entre 490 e 510 nm);
Tubos e Pipetas;
Banho-Maria a 37°C;	
Cronômetro.
Kit enzimático para determinação do colesterol total;
Procedimento Manual
A – Condições do Teste
Leitura: Comprimento de onda 500 nm;
Medida: Contra o Branco;
 Tipo de reação: Ponto final;
 B-Técnica de Análise
1-Identificar 3 tubos de ensaio com “Branco”,” Teste” e “Padrão” e proceder:
	Tubos
	Branco
	Teste
	Padrão
	 
 Soro
	 
---------
	 
10 µL
	 
--------
	 
 Padrão (1)
	 
-------
	 
-----
	 
10 µL
	 
Reagente de Cor (2)
	 
1000 µL
	 
1000 µL
	 
1000 µL
1- Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37°C por 10 minutos. O nível de água do banho-maria deve ser superior ao nível dos reagentes nos tubos.
2 - Fazer as leituras fotométricas do Padrão (AP) e do Teste (AT), zerando o aparelho com o Branco em 500 nm (490 a 510 nm). A cor é estável durante 1 hora.
Valores de Referência
Substituem os valores de referência e são determinados a partir de dados epidemiológicos, calculados estatisticamente, que relacionam os níveis do colesterol com a prevalência de doença arterial coronariana (DAC).
	Colesterol Total (Adulto)
	Colesterol Total (Criança e adoslecente)
	Valor desejável:
<200 mg/dL
	Valor desejável:
< 170 mg/dL
	Valor limítrofe:
200 a 239 mg/dL
	Valor limítrofe:
170 a 199 mg/dL
	Valor Elevado:
≥ 240 mg/dL
	Valor elevado:
≥ 200 mg/dL
 
Parte II
Determinação de Triglicerídeos
Aplicação Clínica
A dosagem dos Triglicérides no sangue, juntamente com o Colesterol e suas frações, é empregada principalmente para avaliar os riscos de Doença Arterial Coronariana (DAC). 
Amostra: Soro
Procedimento Técnico Manual
Espectrofotômetro (leitura entre 490 e 250 nm);
Tubos e Pipetas;
Cronômetro;
Banho- Maria.
Kit par dosagem de triglicerídeos;
Procedimento Manual
 1- Identificar 3 tubos de ensaio com "Branco", "Teste" e "Padrão" e pipetar: 
	Tubos
	Branco
	Teste
	Padrão
	Amostra
	---------
	10 mL
	---------
	Padrão
	---------
	---------
	10 mL
	Reagente de Cor
	1000 mL
	1000 mL
	1000 mL
2- Homogeneizar e incubar os tubos durante 10 minutos a 37ºC. O nível da água do banho-maria deve ser superior ao nível dos reagentes nos tubos.
3- Ler a absorbância do Padrão (AP) e do Teste (AT), zerando o aparelho com o Branco em 505 nm ou filtro verde (490-520 nm). A cor é estável por 1 hora.
Valores de Referência Adultos
	Valor desejável
	< 150 mg/dL
	Limiar elevado
	150 – 199 mg/dL
	Valor elevado
	200 – 499 mg/dL
	Valor muito elevado
	> 500 mg/dL
	Valores de Referência
	Menores de 10 anos
	De 10 a 19 anos
	Valor desejável
	< 100 mg/dL
	< 130 mg/dL
	Valor elevado
	 	> 100 mg/dL
	> 130 mg/dL
OBS: O processo correto de pipetarem as amostras é de suma importância para o resultado do exame. Portanto fiquem atentos a este processo.
5. Atividade Prática Presencial: (Para O Acadêmico Entregar)
1) Descreva a técnica de determinação do colesterol e triglicerídeos.
6. Fontes de pesquisa.
- Aulas conceituais da Disciplina Bioquímica clínica – Unidade II: Disponível no Ambiente Virtual de Aprendizagem.
10. Referências bibliográficas 
MOTTA, V. T. Bioquímica clínica: princípios e interpretações. 3ª edição. 2000
VIEIRA, A. D. C. et al. Bioquímica clínica: líquidos corporais. Porto Alegre: SAGAH, 2021.ATENÇÃO
· Os roteiros devem ser enviados, impreterivelmente, 15 dias antes do início da disciplina, visando possibilitar que todos os envolvidos realizem a preparação necessária para o desenvolvimento da atividade. No momento do envio para o Coordenador de Curso, copie no e-mail o tutor mediador da disciplina e a secretária do núcleo a qual o curso pertence.
· No segundo encontro presencial de cada semana deve ser dada continuidade ao desenvolvimento da atividade presencial proposta neste roteiro, esclarecendo dúvidas, discutindo resultados, estimulando a interação entre os alunos, etc.
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