Vidraria volumetrica e principios de pipetagem

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20/03/2024
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Tecnologias Laboratoriais Aplicadas
Vidraria volumétrica & Princípios da pipetagem
Prof. Dr. Alexandre Dermargos
e-mail: adermargos@cruzeirodosul.edu.br 
alexandre.dermargos@gmail.com
2024
Proveta ou Cilindro Graduado
• Serve para medidas de volumes de líquidos;
• Não pode ser aquecida;
• Vidraria de maior exatidão que os béqueres
ou erlenmeyers;
• Vidraria de menor exatidão que os balões
volumétricos
• As provetas apresentam diferentes
capacidades;
https://docplayer.com.br/67959450-Figura-2-surgimento-do-menisco-nos-equipamentos-volumetricos.html
https://www.passeidireto.com/pergunta/68982357/ao-utilizar-a-proveta-o-balao-volumetrico-e-a-pipeta-qual-a-determinada-posicao-
https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/286168/mod_resource/content/1/Exp_1_Medidas_V_m_T.pdf
Forma de leitura de volumes em frascos graduados
No caso da solução ser muito escura devemos tomar como referência
a parte superior do menisco, ou seja as bordas.
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Evitando a paralaxe
A superfície de um líquido confinado num tubo estreito exibe uma curvatura
marcante, ou menisco, que consiste na interface entre o ar e o líquido a ser medido.
Para acerto do menisco, seu olho deve estar no nível da superfície do líquido para
assim evitar um erro devido à paralaxe (A).
Paralaxe é um fenômeno que ocorre através da observação errada do valor na escala
analógica do instrumento, devido ao ângulo de visão
Balão Volumétrico
• Usado para preparar e diluir soluções;
• Apresenta fundo chato, um gargalo,
junta esmirilhada e um tampa que se
ajusta perfeitamente na junta
esmirilhada;
• No gargalho há uma marca que indica a
capacidade exata do balão;
• Apresentam capacidade variadas;
https://enem.estuda.com/questoes/?resolver=&prova=&q=&inicio=3&q=&cat=4&subcat%5B%5D=2605&dificuldade=
https://www.specialglass.com.br/afericao-e-calibracao-vidrarias
https://www.splabor.com.br/blog/micropipeta-2/aprendendo-mais-aspectos-importantes-sobre-pipetagem/
Pipeta de Pasteur
Conformação bem simples geralmente
produzida em plástico e são
descartáveis, criada pelo médico
francês Louis Pasteur. Não apresenta
abertura no topo, apenas em sua base
para entrada de líquido. Possui um
“balão” que, quando pressionado,
expele o ar para o exterior da pipeta e
posteriormente o líquido é sugado para
o interior.
Usada para lavagem de vidrarias com
solventes não aquosos ou então para
transferências.
http://www.vidrariadelaboratorio.com.br/vidrarias-de-laboratorio-2/
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Pipetas
• Usadas para medir e transferir pequenos volumes de líquidos;
• Não pode ser aquecida;
• Possui capacidade variável;
• São classificadas em graduadas e volumétricas;
• As pipetas volumétricas são altamente precisas e são utilizadas para tomar um
único e fixo volume de solução.
• As pipetas graduadas apresentam escala e podem tomar diferentes volumes
de líquido em função da capacidade máxima da pipeta.
Pipetas
Pipeta Graduada ou Medidora
Consiste em um tubo de vidro graduado
uniformemente em seu comprimento. Existem 2
tipos:
Pipeta graduada de escoamento parcial: calibrada
entre duas marcas, apresenta no topo duas linhas
coloridas;
Pipeta graduada de escoamento total
(sorológica), graduada até a extremidade inferior,
apresenta no topo uma linha colorida.
Pipeta Volumétrica ou Transferidora
Planejada para medir um volume fixo de líquido,
constituindo-se de um bulbo cilíndrico contendo um tubo
estreito em cada extremidade (Figura 1 A).
Esse modelo possibilita o transporte de apenas uma
determinada quantidade de volume – possui um bulbo
cilíndrico contendo um tubo estreito em cada extremidade, e
a marca do volume fica gravada na parte superior do tubo.
Também não pode ser aquecida devido a sua grande precisão
de medida
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http://www.vidrariadelaboratorio.com.br/vidrarias-de-laboratorio-2/
Esse modelo possibilita o transporte de apenas uma
determinada quantidade de volume – possui um
bulbo cilíndrico contendo um tubo estreito em cada
extremidade, e a marca do volume fica gravada na
parte superior do tubo. Também não pode ser
aquecida devido a sua grande precisão de medida.
Pipetador tipo Pera
• Acoplado a uma pipeta ajuda a “puxar” e a
“expelir” pequenos volumes de líquidos.
http://www.vidrariadelaboratorio.com.br/vidrarias-de-laboratorio-2/
Utilização de pipeta
volumétrica. O volume
restante na ponta da pipeta
não deve ser retirado – o
volume correto já leva em
conta este resíduo
https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/286168/mod_resource/content/1/Exp_1_Medidas_V_m_T.pdf
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CUIDADOS NECESSÁRIOS PARA USO CORRETO DAS PIPETAS 
• Não pipetar com a boca. Utilizar sempre um dispositivo para a pipetagem (Figura 2);
• Utilizar pipetas íntegras, limpas e secas. Descartar as pipetas que apresentem pontas
quebradas;
• Utilizar pipetas com volume total o mais próximo possível do volume a ser medido;
• Utilizar a pipeta sempre na posição vertical (tanto para aspirar como para desprezar
o líquido) e o fluxo do líquido deve ser contínuo.
Bureta
• Usada para medidas precisas de líquidos;
• Usada em análises volumétricas para
determinar o volume de solução titilante que
reage com uma determinada quantidade de
solução a ser titulada;
• Podem ser utilizadas também para a
transferência de volumes precisos de líquidos.
Na parte inferior das buretas há uma torneira
por onde escoa o liquido a ser transferido;
• É sempre utilizada presa ao suporte universal
por garras próprias para isto.
https://pt.dreamstime.com/photos-images/t%C3%A9cnica-da-titula%C3%A7%C3%A3o.html
• As micropipetas são utilizadas para a pipetagem de pequenos
volumes (microlitros - µL).
• Elas devem apresentar boa exatidão e precisão.
• Nos laboratórios, geralmente são designadas pela letra P
seguida pelo volume máximo que podem pipetar. Ex: P1000,
P200, P20.
Micropipetas e equipamentos volúmétricos
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Partes de uma micropipeta
https://slideplayer.com.br/slide/10745887/
https://slideplayer.com.br/slide/2897893/
As micropipetas são instrumentos de laboratório utilizados para
transferência com precisão, de pequenos volumes de líquido. Podem
ser simples, que só empregam uma ponteira e podem ser de
volumes fixo ou variável (Figura A) ou multicanal (Figura B) , que
permitem uso de várias ponteiras simultaneamente, pipetando o
mesmo volume em todas elas
https://kasvi.com.br/micropipeta-funcionamento-estrutura-sistema-medicao/ https://kasvi.com.br/micropipeta-funcionamento-estrutura-sistema-medicao/
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https://kasvi.com.br/micropipeta-funcionamento-estrutura-sistema-medicao/
Pressione com movimento de rotação
Evite penetrar a ponteira como se a pipeta
fosse uma faca
Volume mínimo (µL)Volume recomendado 
(µL)
Modelo
0,002
0,02
0,02
0,2
0,2
2,0
2,0
0,1 a 2
0,5 a 10
2 a 20
10 a 100
50 a 200
100 a 1000
500 a 5000
P-2
P-10
P-20
P-100
P-200
P-1000
P-5000
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https://kasvi.com.br/micropipeta-funcionamento-estrutura-sistema-medicao/
https://slideplayer.com.br/slide/10745887/
Posição de pipetagem Enquanto aspirar, mantenha a ponteira a uma profundidade constante 
abaixo da superfície do líquido;
http://www.ufscar.br/~dq-gaia/images_2007/micropipetas
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• Guardar a pipeta corretamente;
• Segurar somente pelo corpo;
• Usar ponteiras compatíveis e fixá-las da forma
correta;
• Ajustar o volume conforme o modelo;
• Cuidado com a velocidade de aspiração e 
dispensação da solução;
• Ejeção da ponteira;
Garantindo uma boa medida com a sua 
micropipeta
https://slideplayer.com.br/slide/10745887/
Fatores que provocam pouca precisão
selo e o’ringVedação interna 
arranhões
desgaste por tempo de uso /
Porta-cone
aerossol e corrosãoPistão
Periodicidade de limpeza
compatibilidade quimica
quantidade a ser usada 
Lubrificante
compatibilidade e qualidadePonteira
inadequadaTécnica de operação
https://slideplayer.com.br/slide/10745887/
Prologando a vida útil da micropipeta
• Realizar a manutenção preventiva (limpeza);
• Não deixar a micropipeta de cabeça para baixo ou deitadacom solução na ponteira;
• Se possível, utilizar ponteiras com filtro
• Não forçar ajuste de volume, além da capacidade de volume da micropipeta;
• Troca de peças (por desgaste);
• Trocar o selo o´ring e calibra-la (1x ao ano)
Cuidados na Utilização
1. Selecionar a micropipeta a ser usada, de acordo com o volume a ser medido. Medir o volume somente no
intervalo permitido para cada pipeta.
2. Para pipetar líquidos ou amostras diferentes utilizar ponteiras diferentes para evitar contaminações.
3. Manter a pipeta na posição vertical e efetuar a aspiração do líquido lentamente, dando uma pausa de uma
fração de segundos após a aspiração.
4. Se a ponteira é imersa profundamente, gotículas da amostra ficarão na parede externa da ponteira e se somarão
ao volume transferido.
5. Nunca mover a pipeta da posição vertical quando estiver com líquido na ponteira.
6. Após o uso as pipetas devem ser mantidas em estantes apropriadas.
7. Ao usar a pipeta pela 1ª vez ou após longo período sem utilizá-la, pressione o botão várias vezes.
8. Quedas da micropipetas ou forte impactos podem danificar embalo e pistão alterando o volume.