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Centro Federal de Educação Tecnológica - Celso Suckow da Fonseca - (CEFET-RJ) Administração Lis Oliveira Soares Velloso Extração e Visualização do DNA do Morango Relatório aula prática - Science truck Nova Friburgo 2024 Sumário 1 Introdução . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 2 Objetivo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 3 Materiais e Métodos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 4 Resultados e Discussão . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 5 Conclusão . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7 6 Referências . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8 2 1 Introdução Uma das razões de se trabalhar com morangos é que eles se prestam muito bem à extração de DNA, porque são muito macios e fáceis de homogeneizar. Morangos maduros também produzem pectinases e celulases, que são enzimas que degradam a pectina e a celulose (respectivamente), presentes nas paredes celulares das células vegetais. Além disso, os morangos possuem muito DNA: eles possuem 8 (vito) cópias de cada conjunto de cromossomos. 3 2 Objetivo O objetivo deste experimento reside na extração do DNA de morangos, visando elucidar os princípios fundamentais subjacentes à técnica de extração de DNA e fornecer uma aplicação prática que ilustre a capacidade de isolar o material genético de organismos complexos. A extração do DNA do morango nos oferece a oportunidade única de visualizar diretamente o material genético em sua forma purificada, ampliando nossa compreensão da estrutura e função do DNA. Adicionalmente, este experimento propicia uma plataforma para discussão e exploração de conceitos-chave, tais como a estabilidade do DNA, a estrutura molecular do DNA e os procedimentos utilizados na extração e purificação do material genético, consolidando assim os conhecimentos teóricos em uma experiência prática de laboratório. 4 3 Materiais e Métodos Produtos: • Morangos; • Detergente; • Sal (NaCl) • Álcool (resfriado); • Água morna. Objetos: • Frasco reagente 1000ml (contendo o NaCl); • Pistilo; • Almofariz; • Medidor Graduado; • Pipeta e Micropipeta; • Becker de Plástico; • Proveta Graduada; • Lamínula; • Microscópio. EPIs: • Luva Cirúrgica; • Óculos (normal, de grau). 1) Preparação dos morangos: Removemos os talos e maceramos os morangos com o auxílio do almofariz e do pistilo. Capítulo 3. Materiais e Métodos 5 2) Preparação da solução de extração: Em um becker, misturamos a água morna com detergente e uma pitada de sal. Esta solução ajudou a romper as membranas celulares e a liberar o DNA. 3) Extração do DNA: Ainda no almofariz, adicionamos a solução de extração contendo os morangos. Amassamos os morangos gentilmente por alguns minutos, até que eles estarem completamente esmagados e a solução esteja homogeneizada. 4. Precipitação do DNA: Foi transferido aproximadamente 10 ml do líquido para um tubo de ensaio. Adiciona-se cuidadosamente uma quantidade igual de álcool resfriado à mistura, despejando-o lentamente sobre a superfície do líquido. 5. Observação do DNA: Após alguns minutos, o DNA começa a precipitar-se e formar uma substância viscosa na interface entre o álcool e a solução de extração. Foi retirado o DNA e posto sobre uma lamínula para observação no microscópio. 6 4 Resultados e Discussão 1. Maceração dos morangos na solução detergente: O detergente ajuda a romper as membranas celulares dos morangos, liberando o DNA. Isso ocorre devido às proprie- dades dos detergentes, que são capazes de solubilizar lipídios e proteínas presentes nas membranas celulares, permitindo o acesso ao DNA contido no núcleo das células. 2. Precipitação do DNA com álcool: A adição de álcool à solução detergentes/dna permite que o DNA se precipite. Isso ocorre porque o DNA é insolúvel em álcool, e quando o álcool é adicionado à solução, o DNA é desidratado e se torna menos solúvel, fazendo com que se aglomere e precipite. O álcool também diminui a solubilidade das moléculas de água, o que ajuda a DNA a precipitar-se. 7 5 Conclusão Portanto, pode-se concluir que os resultados obtidos reforçam a eficácia do protocolo empregado para a extração de DNA de morangos. A clara visualização do DNA precipitado na interface entre a solução de extração e o álcool indica uma extração bem-sucedida. A observação do DNA na forma de fios viscosos ou aglomerados, assim como sua ma- nipulação e enrolamento em um bastão de vidro, evidencia a qualidade e a pureza do material genético extraído. Como resultado, os objetivos inicialmente estabelecidos foram plenamente alcançados, proporcionando aos participantes uma compreensão abrangente dos princípios fundamentais subjacentes à extração de DNA e sua relevância prática em um contexto laboratorial. 8 6 Referências https://colegioeduardogomes.com.br/eg-em-foco/2806/opa-habemus-dna Sumário Introdução Objetivo Materiais e Métodos Resultados e Discussão Conclusão Referências
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