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Isolamento e identificação dos
Estafilococos
Importância Clínica dos
EstafilococosStaphylococcus aureus
Intoxicação alimentar (produção de enterotoxinas)
Síndrome do choque tóxico
Infecções hospitalares
Osteomielite
Endocardite
Bacteremia
MRSA (Staphylococcus aureus resistente à meticilina)
VRSA (Staphylococcus aureus resistente à vancomicina)
VISA (Staphylococcus aureus com resistencia intermediária à
vancomicina)
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saprophyticus
Abcessos
Síndrome da pele escaldada
Toxina:
Esfoliatina
Intoxicação alimentar
Síndrome do choque tóxico
Isolamento dos Estafilococos
Staphylococcus aureus
Staphylococcus
epidermidis
Staphylococcus
saprophyticus
Identificação de Estafilococos
1) Prova da Catalase
2) Prova da Coagulase
3) Resistência à Novobiocina
4) Crescimento em ágar Manitol
5) Prova da DNAse
Prova da Catalase
Conversão de peróxido de hidrogênio a 3% em água e oxigênio
pela ação da catalase.
2H2O2 → H2O + O2
+
Estafilococo
s
-
Estreptococos
OBS: Cuidado para não coletar ágar sangue junto com a colônia usada
no teste → falso positivo porque o sangue do agar contém catalase.
Prova da Catalase
Staphylococcus spp Streptococcus spp
S. epidermidis
S. saprophyticus
Fibrinogênio →
Fibrina
+ -
S. aureus
Prova da Coagulase
Inocular colônia de bactéria em plasma de coelho → incubar 37 ºC por
1-4 horas e observar formação de fibrina
Prova da coagulase em tubo
Staphy test
Ágar Manitol (7,5% NaCl)
Manitol salgado
Crescimento
e fermentação
(amarelo)
Sem Crescimento
ou sem fermentação
 (rosa ou vermelho)
S. aureus S. epidermidis
S. saprophyticus
Ágar Manitol (7,5% NaCl)
Prova da DNAse
Ágar DNAse
S. aureus
+ -
S. epidermidis
S. saprophyticus
Semear uma colônia em ágar DNAse e incubar a 35 graus por 24 horas.
No momento da leitura adicionar HCl 1N sobre a placa, aguardar 30
segundos e observar a formação de um halo claro ao redor da colônia.
PROVA DA DNAse
Prova de sensibilidade à Novobiocina
Ágar Mueller-Hinton com disco de Novobiocina (5 microgramas)
Sensível
( - ) Resistente
(+)
S. aureus
S. epidermidis
S. saprophyticus
Tabela para identificação de cocos
Gram + Catalase +
(Staphylococcus spp.)
Coagulase Manitol DNAse Novobiocina
S. aureus + + + Sensível
S. epidermidis - - - Sensível
S. saprophyticus - - - Resistente
Todos são Catalase +
Identificação de MRSA
• Teste de sensibilidade à oxacilina
• Teste de sensibilidade à cefoxitina
• PCR para o gene mecA
• Detecção de PBP2a por aglutinação
Teste de sensibilidade à
oxacilina e cefoxitina
PCR para mecA
Aglutinação – Slidex
(Biomerieux)