PCR e Amplificação de DNA

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20/09/2023, 13:03 EPS Disciplina: BIOLOGIA MOLECULAR AV 1 de 4 7,00 pts Nota SIA: 9,00 pts ENSINEME: AMPLIFICAÇÃO IN VITRO DE DNA 1 Ref. 4119324 Pontos: A PCR é uma reação cíclica que depende de diversos fatores e reagentes, e pode ser aplicada em diversos contextos. Acerca da reação em cadeia da polimerase (PCR), assinale a opção correta: último passo da a polimerização, é a excisão da fita de DNA no sentido começando no primeiro nucleotídio do primer iniciador incorporado. A enzima termoestável direciona o posicionamento dos precursores de DNA dNTP iniciando a síntese de novas fitas de DNA. A temperatura ideal para a polimerização varia entre 25 °C e 45 °C. PCR é a tecnologia por meio da qual são produzidas bilhões de cópias de fragmentos de DNA. Os fragmentos do DNA amplificado pela PCR são chamados amplicons e podem ser tipificados usando- se diferentes métodos. A reação de PCR é dependente da atividade de cópia de fragmentos de DNA, catalisada pela enzima DNA sintetase. Os iniciadores são pequenos fragmentos sintéticos de DNA de fita dupla, usualmente com extremidade e complementares à sequência do segmento de DNA de interesse. 2. Ref.: 4125263 Pontos: A reação em cadeia da polimerase (PCR) tem sido usada frequentemente para a amplificação de ácidos nucleicos desde a década de 1980. Desde então, diversas variações da PCR foram feitas para melhorar sua capacidade de detecção e quantificação de DNA. Com relação à técnica de PCR em tempo real, assinale a alternativa correta: Tem como parâmetro importante o Ct (cycle que indica o ciclo da reação no qual a amplificação começa a ser detectada a níveis superiores ao ruído (background) e passa a acontecer de forma exponencial. Requer a otimização de um importante parâmetro que é a temperatura de desnaturação. Não pode ser aplicada na detecção de mutações, apesar de sua alta sensibilidade. Depende do uso de fluorescência, que é medida ao final da reação, tal como o produto de PCR comum é corrido em gel de agarose, geralmente visualizado em luz UV. Não permite, por meio do uso do verificar a curva de dissociação, mesmo em termocicladores modernos. ENSINEME: INTRODUÇÃO À BIOLOGIA MOLECULAR 3. 3992606 Pontos: Os RNAs de interferência conhecidos como miRNA e siRNA, são muito importantes para regulações pós transcricionais, devido sua capacidade de estimular a degradação RNAm, sobre esses RNAs assinale a https://simulado.estacio.br/alunos/ 1/4 13:03 EPS alternativa errada: siRNA e miRNA, possuem capacidade de serem utilizados como tratamento para algumas patologias, entretanto ainda precisamos compreender melhor como funcionam. miRNA e o siRNA são pequenos trechos de RNA com capacidade de degradar o RNAm, logo são responsáveis por alterações pós-traducionais. siRNA e miRNA são trechos de RNA produzidos na de forma exógena e endógena, respectivamente, a partir de quebra de sequencias de RNA dupla fita por uma endonuclease Dicer. miRNA tem origem endógena e siRNA exógena ou endógena. A descoberta do miRNA e siRNA nos levou a compreensão de mais um mecanismo de regulação gênica dos eucariotos. 4. Ref.: 7694403 Pontos: Para uma célula funcionar adequadamente, as proteínas necessárias devem ser sintetizadas no momento adequado. Todos os organismos e células controlam ou regulam a transcrição e tradução do seu DNA em em um organismo unicelular simples ou em um organismo multicelular complexo, cada célula controla quando e como seus genes são expressos. (Regulação da expressão gênica: como o genes são regulados. Acessado em 21/09/2022). Sobre o mecanismo de regulação gênica dos procariotos, avalie as afirmativas a I. A regulação da expressão em procariotos ocorre com menor custo energético, durante a estabilização da proteína, que é o produto da fase de tradução. II. A transcrição ocorre a partir do acoplamento da RNA polimerase em uma sequência de chamada de região promotora.