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Identificação de Cocos Gram-Positivos Prof. Me. Gabriel Henrique Taufner Escola Superior São Francisco de Assis Doutorando em Biotecnologia – RENORBIO Núcleo de Bioengenharia Tecidual – UFES falecomgabriel@outlook.com.br 1) Bactérias do gênero Streptococcus; 2) Identificação de Streptococcus; 3) Atividade de fixação. Sumário Principais Bactérias Cocos Gram-Positivos Aeróbios ou Anaeróbios Facultativos Catalase + Staphylococcus & Micrococcus Catalase – Streptococcus & Enterococcus Principais Bactérias Cocos Gram-Positivos Família Micrococaceae • Aeróbios facultativos* • S. aureus, S. epidermidis, S. saprophyticus Família Streptococaceae • Anaeróbios facultativos** • S. pyogenes, S. pneumoniae *Usam oxigênio quando este se encontram no meio, porém, quando ausente utilizam-se de meios fermentativos ** Não necessitam de oxigênio, porém, na presença do mesmo também podem utiliza-lo sobrevivem Gênero Streptococcus Habitam diferentes tipos de ambientes, alguns fazem parte da microbiota normal, principalmente das vias aéreas superiores e do TGI. Alguns são patógenos primários outros são classificados como oportunistas. Cocos catalase negativos arranjados em forma de cadeias Colonização de Pele e Mucosas Porta de Entrada no Tecido??? Gênero Streptococcus β-hemolíticos α-hemolíticos γ-hemolíticos Gênero Streptococcus 1. β-hemolíticos (100%) - S. pyogenes - S. agalactiae 2. α-hemolíticos (50%) - S. pneumoniae - S. viridans 3. γ-hemolíticos (0%) - Enterococcus faecalis (s. faecalis) Gênero Streptococcus Classificação de Lancefield Sorologia do tipo de carboidrato C existente na parede celular bacteriana Fatores de Virulência 1. Exotoxinas - SpeA, SpeB, SpeC e SpeF - Proteína M 2. Adesinas – Adesão - Proteína M - Ácido Lipoteicóico - Proteína F 3. Invasinas (enzimas) - Streptolisinas - Streptoquinases - Proteases, etc. 4. Cápsula – opsonização Gênero Streptococcus As exotoxinas pirogênicas estreptocócicas (SpeA, SpeB, SpeC e SpeF) e a proteína M são considerados superantígenos! Gênero Streptococcus Streptococcus pyogenes Cocos β-hemolíticos – Grupo A de Lancefield P io d e rm it e F a ri n g it e E ri si p e la E sc a rl a ti n a Streptococcus pyogenes Cocos β-hemolíticos – Grupo A de Lancefield Infecções Piogênicas, Supurativas e Não-Supurativas Streptococcus agalactiae Cocos β-hemolíticos – Grupo B de Lancefield Streptococcus pneumoniae Cocos α-hemolíticos / FREE LANCEFIELD Linhagens encapsuladas: bacteremia S . vi ri d a ns S. salivarius S. mutans S. sobrinus Streptococcus viridans Cocos α-hemolíticos / FREE LANCEFIELD Streptococcus faecalis / Enterococcus faecalis Cocos γ-hemolíticos – Grupo D de Lancefield A infecção surge quando a bactéria é transmitida do seu habitat normal para outros órgão e tecidos. Frequentemente causam infecções no TU decorrentes de feridas causadas durante cirurgias e/ou uso de cateter. Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o B a c t e r i o l ó g i c o Colônias de Bactérias Catalase + Catalase - Micrococcus/Staphylococcus Streptococcus/Enterococcus α-hemóliseβ-hemólise γ-hemólise S R S R S. faecalis S. pyogenes S. agalactiae S. pneumoniae S. viridans Optoquina Ágar Sangue CAMP testBacitracina Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o B a c t e r i o l ó g i c o Colônias de Bactérias Catalase + Catalase - Micrococcus/Staphylococcus Streptococcus / Enterococcus α-hemóliseβ-hemólise γ-hemólise S R S R S. faecalis S. pyogenes S. agalactiae S. pneumoniae S. viridans Optoquina Ágar Sangue Bacitracina CAMP testPACIENTE C/ SUSPEITA DE FARINGITE! Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o B a c t e r i o l ó g i c o Prova da Catalase ✓ O teste da catalase consiste na mistura entre bactérias e água oxigenada com o intuito de identificar se os MO estudados produzem a enzima catalase, responsável por metabolizar o peróxido de hidrogênio transformando-o em água e oxigênio. Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o B a c t e r i o l ó g i c o Colônias de Bactérias Catalase + Catalase - Micrococcus/Staphylococcus Streptococcus / Enterococcus α-hemóliseβ-hemólise γ-hemólise S R S R S. faecalis S. pyogenes S. agalactiae S. pneumoniae S. viridans Optoquina Ágar Sangue CAMP testBacitracina Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o B a c t e r i o l ó g i c o Prova da Hemólise ✓ Utilizando o meio ágar sangue de carneiro (5%), busca-se identificar a capacidade das colônias bacterianas em provocar a lise de eritrócitos. Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o B a c t e r i o l ó g i c o Colônias de Bactérias Catalase + Catalase - Micrococcus/Staphylococcus Streptococcus α-hemóliseβ-hemólise γ-hemólise S R S R S. faecalis S. pyogenes S. agalactiae S. pneumoniae S. viridans Bacitracina Optoquina Ágar Sangue CAMP test FARINGITE POR STREPTOCOCCUS PYOGENES! Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o – C a r a c t e r i z a ç ã o d o M O e C o l ô n i a s Prova da Bacitracina ✓ Utilizando o antibiótico bacitracina é possível classificar os Streptococcus em S. pyogenes e S. agalactiae. Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o – C a r a c t e r i z a ç ã o d o M O e C o l ô n i a s S. pyogenes S. agalactiae Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o – C a r a c t e r i z a ç ã o d o M O e C o l ô n i a s CAMP test ✓ Utilizando uma cepa de S. aureus que produz beta hemolisina o teste visa diferenciar S. agalactiae de S. pyogenes através do sinergismos hemolítico ocasionado pelo contato da beta hemolisina produzida pelo S. agalactiae. Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o – C a r a c t e r i z a ç ã o d o M O e C o l ô n i a s Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o B a c t e r i o l ó g i c o Colônias de Bactérias Catalase + Catalase - Micrococcus/Staphylococcus Streptococcus α-hemóliseβ-hemólise γ-hemólise S R S R S. Faecalis E. faecalis S. pyogenes S. agalactiae S. pneumoniae S. viridans Optoquina Ágar Sangue Bacitracina CAMP test Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o – C a r a c t e r i z a ç ã o d o M O e C o l ô n i a s Prova da Optoquina ✓ Utilizando o antibiótico optoquina é possível classificar os Streptococcus em S. pneumoniae e S. viridans. Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o S o r o l ó g i c o Identificação de Estreptolisina O, enzima produzida por S. pyogenes Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o S o r o l ó g i c o Identificação da Classificação de Lancefield Gênero Streptococcus D i a g n ó s t i c o B a c t e r i o l ó g i c o Re s u m i d o Questões de Fixação 1. Como são identificados bactérias do gênero Streptococcus? Basta fazer a coloração de Gram para identifica-las? 2. Está correto afirmar que somente os Streptococcus b- hemolíticos são patogênicos para o homem? 3. Descreva resumidamente as etapas de identificação bacteriológica dos seguintes microrganismos: - Streptococcus agalactiae - Streptococcus pneumoniae Slide 1 Slide 2 Slide 3 Slide 4 Slide 5 Slide 6 Slide 7 Slide 8 Slide 9 Slide 10 Slide 11 Slide 12 Slide 13 Slide 14 Slide 15 Slide 16 Slide 17 Slide 18 Slide 19 Slide 20 Slide 21 Slide 22 Slide 23 Slide 24 Slide 25 Slide 26 Slide 27 Slide 28 Slide 29 Slide 30 Slide 31 Slide 32