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www.plastlabor.com.br / plabor@plastlabor.com.br / (21) 2501 0888 Página 1 de 2 INSTRUÇÕES DE USO PL 3522 ÁGAR CHROMOCULT COLIFORME VER: 09 – JUL / 2023 OBJETIVO Meio cromogênico seletivo e diferencial para contagem e detecção simultânea de coliformes totais e Escherichia coli em água potável e alimentos processados em até 24 horas. Recomendado pela ISO 9308-1 para análises de água potável, água purificada e alimentos processados. A presença de peptonas selecionadas, piruvato, sorbitol e tampão fosfato permitem o rápido crescimento das colônias, mesmo quando as bactérias se encontram em doses sub-letais. A combinação de dois substratos cromogênicos permite a detecção simultânea de coliformes e E. coli. baseada na capacidade da enzima ß-D-galactosidase, característica de coliformes, clivar o substrato Salmão-GAL, levando a formação de colônias vermelho-salmão para os coliformes; ao passo que a diferenciação da E. coli é baseada na clivagem de dois substratos por uma combinação de duas enzimas características da espécie - os substratos X-glicuronídeo pela enzima por ß-D- glucuronidase e o Salmon-GAL pela enzima ß-D-galactosidase - levando à formação de colônias de coloração azul escuro a violeta. Bactérias não coliformes podem crescer como colônias incolores. O Ágar Chromocult Coliforme contém tergitol 7 como um inibidor de bactérias Gram positivas, o qual não possui efeito negativo sobre o crescimento do coliformes e E. coli, tornando-o um meio de cultura ideal para a detecção desses microrganismos em um rápido intervalo de tempo. APRESENTAÇÃO PL 3522 – Embalagem com 10 placas descartáveis, tamanho 49x13mm, contendo 7 a 9 mL de meio de cultura. VALIDADE A data de validade está descrita no produto. COMPOSIÇÃO POR LITRO pH a 25ºC: 6,8 ± 0,2 PRECAUÇÕES DE UTILIZAÇÃO Este material se destina apenas ao diagnóstico in vitro. Não abrir a embalagem contendo o meio de cultura em área não estéril. A data de expiração aplica-se ao produto na sua embalagem intacta, quando armazenado em condições adequadas. Portanto, os meios não devem ser usados se houver algum sinal da deterioração, contaminação ou se a data de validade expirar. CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO O meio deverá ser armazenado em ambiente com temperatura controlada entre 2 - 15°C. Cabe ressaltar que, a faixa de temperatura escolhida para o seu armazenamento deverá ser seguida até o término do seu prazo de validade, a fim de evitar a formação de água de condensação no produto. Meio fotossensível - armazenar ao abrigo da luz. CONTROLE DE QUALIDADE O meio de cultura apresenta aspecto firme, com coloração âmbar claro translúcido. Nota: Cabe inspecionar o meio no momento do seu recebimento, a fim de verificar as características acima descritas. Nota: Considerando que o meio de cultura é um produto gelatinoso, e por isso pode apresentar em sua composição até 90% de água; ao sofrer variações de temperatura pode haver a geração de água de condensação na placa. Para diminuir essa possibilidade, recomenda- se guardar as placas com os meios de cultura virados para cima. É importante ressaltar que a água de condensação ocasionada por alguma variação de temperatura, não influencia no desempenho do produto, desde que, o mesmo não apresente ressecamento ou diminuição de espessura. AMOSTRAS Água potável, purificada e matrizes de alimentos processados, como salsichas, frango cozido e leite desnatado, que sejam objeto de estudo. PROCEDIMENTOS Aguardar que o meio atinja a temperatura ambiente antes da inoculação; 1. Realizar a análise através da técnica de membrana filtrante; 2. Com o auxílio de uma pinça estéril, colocar a membrana sob a superfície do meio; 3. Inocular as placas e incubar a 35 ± 2°C por 24 horas. Nota: Caso o meio apresente água de condensação, as placas podem secar em temperatura ambiente em área controlada, ou, a fim de reduzir o tempo de secagem, serem incubadas por aproximadamente 10 minutos em estufa de 35±2ºC. A repetição do processo de refrigeração/estabilização não é recomendada, uma vez que a constante troca de temperatura pode levar a desidratação do meio, expor o produto a contaminações ou gerar um acúmulo de água excessivo. LEITURA E INTERPRETAÇÃO Após o período de incubação, realizar a leitura do teste. As colônias de Escherichia coli possuem bom crescimento e coloração azul escuro a violeta. As colônias de Enterococcus faecalis apresentam crescimento parcial a nulo. As colônias de Citrobacter freundii e Klebsiella pneumoniae possuem um bom crescimento e coloração salmão a vermelho. Cabe ressaltar que a identificação final dos microrganismos requer testes adicionais. FERTILIDADE A fertilidade do meio deve ser testada frente à cepas puras que tenham origem conhecida e confiável, conforme quadro abaixo: ELIMINAÇÃO DE RESÍDUOS O descarte dos resíduos após a utilização dos tubos deve ser realizado após descontaminação em autoclave a 121°C durante, pelo menos 30 minutos. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS MERCK Use Information Sheet, 2023. ISO 9308-1:2014 Water quality — Enumeration of Escherichia coli and coliform bacteria — Part 1: Membrane filtration method for waters with low bacterial background floraGARANTIA A PlastLabor Ind. E Com. De Equip. Hosp. E Lab. Ltda. garante os seus produtos, desde que sejam utilizados como descrito nas respectivas instruções de uso e em referências nacionais e internacionais. A PlastLabor não se responsabiliza no caso de seus produtos serem comercializados e utilizados para outra finalidade diferente da descrita e aprovada pela PlastLabor. Todo diagnóstico clínico deve ser estabelecido em conjunto com demais evidências clínicas e não apenas em resultado laboratorial. Sob nenhuma Peptona 3,0g Cloreto de sódio 5,0g Fosfato de sódio 2,2g Fosfato hidrogenado de sódio 2,7g Piruvato de sódio 1,0g Triptofano 1,0g Sorbitol 1,0g Mistura cromogênea 0,4g Tergitol 7 0,15g Ágar 10,0g Cepas controle Resultados após incubação a 35 ± 2°C por 24 horas Escherichia coli - ATCC 8739 Crescimento bom / Colônias azul escuro a violeta Klebsiella aerogenes - ATCC 13048 Crescimento bom / Colônias salmão para vermelho Citrobacter freundii – ATCC 43864 Crescimento bom / Colônias salmão para vermelho Enterococcus faecalis – ATCC 19433 Nulo / Parcial www.plastlabor.com.br / plabor@plastlabor.com.br / (21) 2501 0888 Página 2 de 2 INSTRUÇÕES DE USO PL 3522 ÁGAR CHROMOCULT COLIFORME VER: 09 – JUL / 2023 hipótese, a PlastLabor se responsabiliza por eventuais danos causados pelo uso inadequado de seus produtos. SIGLA MIN Meio para monitoramento/diagnóstico FABRICADO POR: PLASTLABOR IND. E COM. DE EQUIPAMENTOS HOSP. E LAB. LTDA. Rua Arraias, 88 – Curicica CEP: 22.780-020 – Rio de Janeiro – RJ CNPJ: 31.864.051/0001-95 Insc. Est.: 83.535.113 Ind. Brasileira Resp. Técnico: Dr. Wagner Jorge Garcia CRBio - RJ 04994/02 SAC – Fone: (21) 2501-0888 www.plastlabor.com.br Email: plabor@plastlabor.com.br http://www.plastlabor.com.br/