Biologia Molecular Gabarito 13

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A hibridização in situ é uma ferramenta diagnóstica de
doenças genéticas, como a distrofia muscular de Duchenne,
e infecciosas, como a infecção por papilomavírus humano
Questão 1 de 5
Corretas �5�
Em branco �0�
1 2 3 4 5
Exercicio
Sequenciamento, Clonagem e Técnicas
De Hibridização
Sair
A
B
C
D
E
�HPV) em colo uterino. Sobre as técnicas de hibridização in
situ, é incorreto afirmar que:
Utilizam sondas de anticorpos, capazes de
reconhecer a sequência-alvo;
São feitas em tecidos e células fixadas e
permeabilizadas, para preservação das estruturas
celulares e entrada das sondas, respectivamente;
As sondas podem ser marcadas com enzimas,
fluoróforos e radioatividade;
Permite a identificação com precisão do local na
célula ou tecido em que a sequência-alvo está;
Exigem leitura através de microscópios
especializados.
Resposta correta
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Gabarito Comentado
Na verdade, elas utilizam sondas de DNA ou RNA
complementares à sequência-alvo. Essas sondas são
projetadas para se ligar especificamente à sequência-
alvo, permitindo sua detecção e localização. Portanto, a
afirmação de que as sondas de anticorpos são usadas é
falsa.
2 Marcar para revisão
As técnicas de sequenciamento de Nova Geração �NGS�
baseiam-se em uma amplificação clonal antes da reação de
sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza
A
B
uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas
técnicas, assinale a opção correta.
Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, na
qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa,
aleatoriamente, e a PCR é realizada através de
pareamento de bases com fitas de DNA presentes
nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia
do sequenciador 454 (pirosequenciamento).
A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na
metodologia do sequenciador 454
(pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão
de água, em uma fase oleosa, formando gotículas
de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita
de DNA a ser sequenciada e uma "bead" para sua
ancoragem.
C
D
Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, na
qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa
aleatoriamente e a PCR é realizada através de
pareamento de bases com fitas de DNA presentes
nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia
do sequenciador Sanger.
A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na
metodologia do sequenciador Sanger e consiste em
uma emulsão de água em uma fase oleosa,
formando gotículas de óleo que contêm os
reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser
sequenciada e uma "bead" para sua ancoragem.
E
A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na
metodologia do sequenciador Illumina e consiste
em uma emulsão de água em uma fase oleosa,
formando gotículas de água que contêm os
reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser
sequenciada e uma "bead" para sua ancoragem.
Resposta correta
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Gabarito Comentado
Esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador
454, também conhecido como pirosequenciamento. A
PCR em emulsão consiste em uma emulsão de água em
uma fase oleosa, formando gotículas de água. Cada
gotícula contém os reagentes necessários para a reação
de PCR, uma fita de DNA que será sequenciada e uma
"bead" que serve como ponto de ancoragem para o
DNA. As outras alternativas estão incorretas porque
A
B
associam técnicas de PCR a sequenciadores de forma
equivocada.
3 Marcar para revisão
Alguns processos biotecnológicos podem ser empregados
na produção de bioderivados, como é o caso dos ensaios de
hibridização. Qual nome é dado para o processo de
hibridização em que o DNA é fixado e transferido para uma
membrana de nitrocelulose ou nylon?
Hibridização in situ
Hibridização por microarray
C
D
E
Southern Blot
Western Blot
Northern Blot
Resposta correta
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Gabarito Comentado
O processo de hibridização em que o DNA é fixado e
transferido para uma membrana de nitrocelulose ou
nylon é conhecido como Southern Blot. Este método é
utilizado para detectar a presença de uma sequência de
DNA específica em uma mistura complexa de DNA. A
técnica envolve a transferência de DNA de um gel para
uma membrana, seguida pela hibridização com uma
sonda de DNA marcada. Portanto, a alternativa correta é
a "Southern Blot".
4 Marcar para revisão
O desenvolvimento da engenharia genética permitiu a
retirada de genes de uma espécie e a posterior introdução
deles em outro indivíduo de espécie diferente. Com essa
ferramenta em mãos, o homem foi capaz de reproduzir
genes de interesse.
Com base nos conceitos de organismos geneticamente
modificados �OGMs�, assinale a alternativa correta.
COSTA, Marco Antônio F.; COSTA,
Maria de Fátima B. Biossegurança
de OGM: uma visão integrada. Rio
de Janeiro: Publit, 2009, p. 154,
com adaptações.
A
B
C
Os OGMs, na respectiva totalidade, são
considerados transgênicos.
Organismos que tiveram genes alterados apenas
quanto à respectiva posição ou expressão são
transgênicos.
Os transgênicos são produzidos através da
alteração de genes em organismos adultos, sendo a
modificação genética transmitida de uma célula a
outra através de transformação.
D
E
O setor da saúde não apresenta qualquer tipo de
questionamento em relação ao uso dos OGMs,
considerando os inúmeros benefícios trazidos por
eles para o setor.
Os OGMs são organismos cujo material genético
�RNA ou DNA) tenha sido modificado por qualquer
técnica.
Resposta correta
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Gabarito Comentado
Os OGMs são organismos cujo material genético �RNA
ou DNA) tenha sido modificado por qualquer técnica.
Isso está correto porque a definição de um organismo
geneticamente modificado �OGM) é exatamente essa:
um organismo cujo material genético foi alterado de
alguma forma que não ocorreria naturalmente pela
reprodução ou recombinação natural. As técnicas
usadas para criar OGMs geralmente envolvem a
manipulação direta do DNA ou RNA do organismo.
5 Marcar para revisão
O sequenciamento de DNA revolucionou nosso
conhecimento sobre o material genético e revelou que a
maior parte dele não codifica nenhuma proteína. Com
relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa
correta.
A
B
C
Os métodos de sequenciamento têm base na
produção de fragmentos de DNA de comprimento
crescente, que começam em um ponto comum e
possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas
respectivas extremidades.
Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado
um primer na extremidade 5' de uma das cadeias e,
com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a
cadeia complementar por completo.
Após o término da reação de sequenciamento, ela é
submetida à eletroforese capilar. Todos os
fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado
em um nucleotídeo diferente e cada um marcado
com um diferente fluoróforo, são separados pelas
respectivas cores.
D
E
Os nucleotídeos empregados nessa técnica são
quimicamente modificados de forma que não
apresentam um terminal hidroxila �3´�OH�,
impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela
DNA polimerase.
O método de Sanger revolucionou o
sequenciamento de DNA pela não utilização de
substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e
ficou conhecido como sequenciamento da segunda
geração.
Resposta correta
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Gabarito Comentado
Os nucleotídeos utilizados na técnica de
sequenciamento de DNA são quimicamente modificados
de forma a não apresentarem um terminal hidroxila �3´-
OH�. Isso é crucial para o processo, pois impedea
inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase.
Essa modificação química é uma característica
fundamental do método de sequenciamento de DNA,
permitindo a determinação precisa da sequência de
nucleotídeos.