Enterobacterias

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<p>Enterobactérias</p><p>Respostas</p><p>Atividade</p><p>Podem ser oxidase positiva (Pseudomonas spp. ) ou negativa (Acinetobacter spp.)</p><p>Bacilo Gram negativo fermentador de glicose, oxidase negativa, móveis ou não.</p><p>Proteína flagelar termolábel, responsável pela aderência bacteriana em uroepitélio.</p><p>Meio de cultura seletivo e diferencial: cresce somente bacilos Gram negativos,</p><p>contém sais biliares que inibem a microbiota contaminante e cristal violeta.</p><p>Cápsula antigênica termolábel, proteção contra fagocitose aumentando a virulência</p><p>bacteriana.</p><p>Endotoxina termoestável presente na parede celular.</p><p>1. Enterobactérias; 2. BGNNF; 3. ágar Macconkey; 4. antígeno H; 5. antígeno K; 6. LPS</p><p>2</p><p>1</p><p>3</p><p>4</p><p>5</p><p>6</p><p>Interatividade</p><p>A. Liberação de amônia alcalinizando o meio de cultura</p><p>B. Detectar a coloração verde após adicionar cloreto férrico a 10%</p><p>C. Permanece roxo quando positivo</p><p>D. Meio de cultura de verde para azul em até 96h quando positivo.</p><p>E. Fermentação de açúcares acidificando o meio de cultura de</p><p>vermelho para amarelo.</p><p>F. Verificação de flagelo em meio de cultura semi-sólido.</p><p>G. Anel violeta após pingar o reativo de Kovacs</p><p>1. Indol; 2. Motilidade; 3. TSI; 4. Fenilalanina; 5. Ureia; 6. Citrato; 7. Lisina</p><p>5</p><p>4</p><p>7</p><p>6</p><p>3</p><p>2</p><p>1</p><p>Interatividade</p><p>A) Identifique o micro-organismo.</p><p>Lisina fenilalania TSI Indol Motilidade Citrato uréia</p><p>E.coli</p><p>Interatividade</p><p>B) Identifique o micro-organismo.</p><p>Lisina fenilalania TSI Indol Motilidade Citrato uréia</p><p>+</p><p>P. vulgaris</p><p>C)</p><p>Identifique</p><p>MO.</p><p>TSI fenilalanina</p><p>Motilidade</p><p>indol</p><p>negativos</p><p>ureia</p><p>citrato</p><p>Klebsiella pneumoniae</p><p>(indol -, mot -, citrato</p><p>+, H2S-, ureia+, fenil-,</p><p>gás CO2+)</p><p>D)</p><p>Identifique o</p><p>MO.</p><p>MOT</p><p>positiva</p><p>fenilalaninaureiaTSI</p><p>Serratia marcenscens</p><p>(indol -, mot +, citrato+,</p><p>H2S-, ureia +,</p><p>fenilalanina -, gás de</p><p>glicose +)</p><p>Lisina +</p><p>• Explique como é feito a prova da oxidase. As enterobactérias possuem essa</p><p>enzima?</p><p>R: utilizamos uma tira com reagente para detectar a oxidase. Após inocular a</p><p>bactéria a coloração da fita reagente muda de cor para roxo (oxidase positiva).</p><p>A não alteração da cor indica oxidase negativa como as Enterobactérias.</p><p>• Quais as principais características das enterobactérias?</p><p>R. todas são bacilos Gram negativos retos, anaeróbios facultativos, oxidase</p><p>negativas, catalase positiva, e fermentam a glicose. Podem ter flagelo ou não e</p><p>podem fermentar a lactose ou não.</p><p>• Explique a prova da catalase.</p><p>R. Enzima que degrada o peróxido de hidrogênio em água e gás carbônico.</p><p>Após inocular uma colônia de bactéria em H2O2 observamos bolhas de ar</p><p>(catalase positiva).</p><p>Interatividade</p><p>E) Identifique o micro-organismo.</p><p>Lisina fenilalania TSI Indol Motilidade Citrato uréia</p><p>BGNNF</p><p>Caso clínico</p><p>Paciente de 50 anos de idade, sexo feminino, procurou a emergência</p><p>hospitalar com febre, cansaço e tosse. O exame clínico apresentou um</p><p>quadro de pneumonia confirmado com RX do tórax. A cultura do</p><p>escarro foi realizada antes da antibioticoterapia e mostrou crescimento</p><p>de bacilos Gram negativos, oxidase negativa, glicose positiva, indol e</p><p>citrato +, H2S neg; uréase e lisina +; gás de glicose +; motilidade neg. As</p><p>colônias em agar MacConckey ficaram de coloração rosa.</p><p>1) Qual o agente etiológico?</p><p>2) Por que as colônias ficaram rosas em agar MC?</p><p>Klebsiella oxytoca.</p><p>Fermentação da lactose.</p><p>• Todas as Enterobactérias fermentam a glicose e a lactose?</p><p>R. todas fermentam a glicose e algumas fermentam a lactose.</p><p>• Qual meio de cultura podemos observar a fermentação da lactose?</p><p>R ágar MacConckey (colônias rosas), ágar Cled (colônias amarelas).</p><p>• Dê dois exemplos de Enterobactérias.</p><p>R. Eschericia coli e Klebsiella sp. (lactose positiva); Salmonella sp. Shigella sp.</p><p>(lactose negativa).</p><p>• Cite e explique os fatores de virulência das enterobactérias.</p><p>R. antígeno K (cápsula): proteção contra a fagocitose;</p><p>LPS (polissacarídeo O e lipÍdeo A)e (fica na parede celular): endotoxina</p><p>(manifestações tóxicas em infecções;</p><p>antígeno H (flagelo bacteriano): adesão.</p><p>• Para a identificação laboratorial das enterobactérias utilizamos as provas</p><p>bioquímicas. Explique o princípio e a leitura de cada uma: Indol, Citrato, Lisina,</p><p>Motilidade, Uréia, fenilalanina e TSI.</p><p>R:</p><p>Indol: verificação da degradação do amino</p><p>Ácido triptofano produzindo indol (anél violeta pós pingar o reativo de Kovacs).</p><p>Citrato: utilização do citrato como fonte de carbono alcalinizando o meio de</p><p>cultura (positivo azul).</p><p>Lisina: capacidade de descarboxilar a lisina alcalinizando o meio de cultura</p><p>(positivo permanece roxo), negativo fermentou a glicose, acidificando o meio</p><p>(muda para amarelo).</p><p>Motilidade: verificada em meio semi-sólido, a bactéria turma o meio de cultura.</p><p>Negativo: crescimento apenas na linha de inoculação.</p><p>Uréia: verificar se a bactéria possui a enzima urease que degrada a uréia em</p><p>amônia com alcalinização do meio de cultura (positivo pink). Negativo amarelo</p><p>(bactéria não tem a enzima e consumiu a glicose do meio).</p><p>Fenilalanina: verificação da degradação do aminoácido pingando o cloreto</p><p>férrico a 10% (mudança da cor do meio pra verde escuro).</p><p>TSI: verificação da fermentação dos três açúcares alterando a cor do meio de</p><p>vermelho para amarelo: glicose na base, sacarose no meio e lactose no ápice.</p><p>Produção de gás de glicose ou não (CO2) e presença de H2S evidenciado pela</p><p>formação do precipitado preto no meio de cultura (H2S reage com o ferro</p><p>dentro do meio e produz o sulfato ferroso).</p>