Prática - PCR

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<p>O teste de PCR detecta proteína C reativa, que é uma adjuvante mediadora</p><p>da fase aguda do processo inflamatório, presente no soro de pacientes. A</p><p>partir de partículas de látex estabilizadas e sensibilizadas com anticorpo anti-</p><p>proteína C-reativa, é possível detectar a proteína quando estiver em</p><p>concentração maior do que 6,0 mg/L através da reação de aglutinação.</p><p>Coleta-se uma amostra de sangue</p><p>do indivíduo (não precisa estar em</p><p>jejum) que deverá ser armazenada em</p><p>um tubo para separação do soro</p><p>(com ou sem ativador de coágulo), e</p><p>centrifugado após coleta.</p><p>Seu armazenagem deve ser em</p><p>ambiente refrigerado por até 2 dias</p><p>em temperatura de 2-8 ºC.</p><p>TESTE QUANTITATIVO</p><p>a) Homogeneizar a suspensão de látex</p><p>e pipetar 25μl na mesma área da</p><p>amostra.</p><p>b) Pipetar 25μl das amostras (soro do</p><p>paciente) em uma área do cartão-</p><p>teste.</p><p>c) Misturar bem com o uso de vareta</p><p>plástica em movimentos circulares.</p><p>d) Após DOIS minutos, observar</p><p>(movimentando o cartão) se houve ou</p><p>não aglutinação, comparando a</p><p>amostra do paciente com os</p><p>resultados obtidos com o controle</p><p>positivo e controle negativo.</p><p>TESTE SEMI-QUANTITATIVO</p><p>a) Preparar diluições seriadas do soro</p><p>(1/2,1/4, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64) utilizando</p><p>solução salina.</p><p>b) Homogeneizar a suspensão de látex e</p><p>pipetar 25μl na mesma área da amostra.</p><p>c) Pipetar 25μl das amostras (soro do</p><p>paciente) em uma área do cartão-teste.</p><p>d) Misturar bem com o uso de vareta</p><p>plástica e/ou em movimentos circulares.</p><p>e) Após DOIS minutos, observar</p><p>(movimentando o cartão) se houve ou</p><p>não aglutinação.</p><p>Será considerado título a maior</p><p>concentração da amostra que</p><p>apresentar aglutinação macroscópica.</p><p>2. PESQUISA DE PROTEÍNA C REATIVA (PCR)</p><p>COLETA E ARMAZENAMENTO</p><p>CONCEITO</p><p>PROCEDIMENTO</p><p>O sangue deverá</p><p>ser centrifugado e</p><p>utilizado apenas o</p><p>soro.</p><p>CITRATO</p><p>DE</p><p>SÓDIO</p><p>CITRATO</p><p>DE</p><p>SÓDIO</p><p>SORO: COM</p><p>OU SEM</p><p>ATIVADOR DE</p><p>COÁGULO</p><p>HEPARINA</p><p>EDTA</p><p>FLUORETO</p><p>DE</p><p>SODIO</p><p>Resultado Negativo:</p><p>Resultado Positivo:</p><p>Calculo de concentração de PCR:</p><p>6 x 8 = 48mg/L.</p><p>Total ausência de aglutinação. Concentração inferior</p><p>a 6mg/L.</p><p>Aglutinação tênue ou nítida.</p><p>Concentração (mg/L) = 6xD, onde 6 é a sensibilidade</p><p>do teste e D, a maior diluição que apresenta</p><p>aglutinação.</p><p>EXEMPLO: Se o título obtido for 1:8, a concentração</p><p>aproximada de PCR existente na amostra será:</p><p>[ ANÁLISE DO RESULTADO ]</p><p>Cartão de Teste de PCR</p><p>NEGATIVO POSITIVO NEGATIVO</p><p>Sempre leia e siga as orientação do manual de instruções</p><p>do fabricante do teste.</p>