INTRODUÇÃO A MICRO

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<p>Microbiologia e</p><p>Imunologia</p><p>FACULDADE SANTA BÁRBARA</p><p>CURSO: ENFERMAGEM</p><p>Profa MSc. Samara Malaquias Cavalcante</p><p>Objetivo</p><p>Fornecer aos alunos conhecimentos</p><p>relativos à morfologia e estrutura das</p><p>células microbianas, mecanismos de</p><p>aquisição de resitência a drogas e</p><p>relações parasito-hospedeiro com</p><p>ênfase para as defesas constitutivas e</p><p>induzidas do hospedeiro e os fatores de</p><p>virulência dos microrganismos.</p><p>Dinâmica</p><p>• Aulas síncronas</p><p>• Estudo Dirigido;</p><p>• Participação nas aulas;</p><p>• Jogos Gameficados;</p><p>• Mapa Conceitual</p><p>AVALIAÇÃO</p><p>• AV1 – 0 a 6 pt</p><p>• PD – 0 a 4 pt</p><p>= MÉDIA 1</p><p>• AV2 – 0 a 6 pt</p><p>• PD – 0 a 4 pt</p><p>= MÉDIA 2</p><p>23/04 – PRIMEIRA AVALIAÇÃO</p><p>18/06 – SEGUNDA AVALIAÇÃO</p><p>EMENTA</p><p>1. Introdução ao estudo dos microorganismos.</p><p>2. Estudo da relação parasito-hospedeiro nas infecções.</p><p>3. Estudo das populações bacterianas de interesse</p><p>ambiental e patológico.</p><p>4. Introdução à Imunologia, classificação da resposta</p><p>imune.</p><p>5. Células e órgãos envolvidos nas respostas imunes.</p><p>6. Caracterização de conceitos de antígenos e</p><p>anticorpos.</p><p>7. Complexo principal de histocompatibilidade.</p><p>8. Estudo da estrutura e função das Imunoglobulinas.</p><p>9. Estudo dos Mecanismos efetores da imunidade.</p><p>10. Imunizações.</p><p>BIBLIOGRAFIA BÁSICA</p><p>1. TORTORA, Gerard J.; FUNKE, Berdell R.; CASE,</p><p>Christine L. Microbiologia. 12. ed. Porto Alegre:</p><p>Artmed, 2017.</p><p>2. SALVATIERRA, Clabijo. M. Microbiologia. Editora</p><p>Saraiva, 2019</p><p>3. MURRAY, Patrick. Microbiologia Médica. Editora</p><p>Grupo GEN, 2017.</p><p>BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR</p><p>1. DELVES, Peter J. E. ROITT - Fundamentos de Imunologia,</p><p>13ª edição. Editora Grupo GEN, 2018. MADIGAN, Michael</p><p>T.;</p><p>2. MARTINKO, John M.; PARKER, Jack. Microbiologia de</p><p>Brock. 14 ed. Editora Pearson, 2016.</p><p>3. LEVINSON, Warren. Microbiologia Médica e Imunologia.</p><p>Editora Grupo A, 2016.</p><p>4. GOERING, Richard V. et al. Mims Microbiologia Médica e</p><p>Imunologia. Editora Grupo GEN, 2020.</p><p>5. ENGELKIRK/BURTON'S. Burton Microbiologia para as</p><p>Ciências da Saúde. Editora GEN, 2012.</p><p>OBJETIVOS DE HOJE:</p><p>1. Contextualizar a Microbiologia aos eventos históricos;</p><p>2. Identificar as teorias da origem da vida e os respectivos cientistas</p><p>que a elaboraram;</p><p>3. Conhecer a diversidade dos microrganismos e sua relevância;</p><p>4. Analisar os benefícios e malefícios que os microrganismos podem</p><p>causar;</p><p>5. Entender a importância da microbiologia na vida dos seres</p><p>humanos correlacionando situações reais.</p><p>Aula 01. Histórico, Conceito e Importância da</p><p>Microbiologia</p><p>TEMA DA AULA: HISTÓRIA DA EVOLUÇÃO DA MICROBIOLOGIA, SUAS APLICAÇÕES E OS</p><p>MICRORGANISMOS</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Conceitos Básicos na Microbiologia</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Microbiologia.</p><p>Estudo dos microrganismos (uso de microscópio para o estudo).</p><p>Diversidade e evolução das células microbianas.</p><p>Bactérias Fungos Protozoários VírusAlgas</p><p>Essenciais para a vida em todos os</p><p>ambientes.</p><p>Menos de 1% dos microrganismos conhecidos são</p><p>causadores de doenças.</p><p>A maioria dos mcos é, direta ou indiretamente,</p><p>benéfica para outros organismos, incluindo seres</p><p>humanos.</p><p>Conceitos Básicos na Microbiologia</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Conceitos Básicos na Microbiologia</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Organismos celulares são designados por dois nomes: GÊNERO e ESPÉCIE.</p><p>Escherichia coli Giardia intestinalis</p><p>BACTÉRIA PROTOZOÁRIO</p><p>A nomenclatura</p><p>dos vírus é</p><p>menos precisa.</p><p>O sistema de nomenclatura (nomeação) para organismos</p><p>em uso atualmente foi estabelecido, em 1735, por Carolus</p><p>Linnaeus.</p><p>GÊNERO: iniciado com letra maiúscula | EPÍTETO/ESPÉCIE: letra minúscula.</p><p>Escritos em itálico</p><p>Eventos Históricos</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Lucrécio</p><p>Hipócrates</p><p>400 a.C.</p><p>Percebeu que as</p><p>doenças podiam</p><p>ser transmitidas</p><p>entre pessoas</p><p>através de</p><p>objetos Tucídides</p><p>Recuperados da</p><p>peste podiam auxiliar</p><p>outras vítimas sem</p><p>contrair a doença</p><p>novamente</p><p>Varrão</p><p>Animais minúsculos</p><p>e invisíveis</p><p>entravam no corpo</p><p>pela boca e nariz,</p><p>causando doença.</p><p>Descreveu as</p><p>“sementes” da</p><p>doença em seu</p><p>poema ‘A natureza</p><p>das coisas’</p><p>Eventos Históricos</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Eventos Históricos</p><p>1 2 3 4 5</p><p>O triunfo da morte, de Pieter Brueghel.</p><p>PESTE NEGRA.</p><p>Matou ~ 25 milhões de pessoas em 5</p><p>anos.</p><p>Ossuário no mosteiro de Sedlec, próximo</p><p>a Praga. Vítimas do surto de peste (1374-</p><p>1351)</p><p>Eventos Históricos</p><p>1 2 3 4 5</p><p>1665. Robert Hooke</p><p>- Microscópio</p><p>- Cunhou o termo ‘célula’</p><p>Anton van Leeuwenhoek</p><p>(1632-1723)</p><p>Criador de lentes de</p><p>aumento (300x)</p><p>“posso julgar por mim</p><p>mesmo (apesar de</p><p>limpar a minha boca)</p><p>que todas as pessoas</p><p>que vivem na Holanda</p><p>não são tantas quanto</p><p>os animais vivos que</p><p>carrego em minha</p><p>própria boca hoje”</p><p>Eventos Históricos</p><p>1 2 3 4 5</p><p>TEORIA CELULAR</p><p>Schleiden e Schwann.</p><p>Células constituem as unidades</p><p>fundamentais da vida e</p><p>realizam todas as funções</p><p>básicas dos seres vivos.</p><p>Teoria aplicada a</p><p>todos os</p><p>microrganismos</p><p>celulares, até</p><p>hoje. Vírus são a</p><p>exceção.</p><p>TEORIA GERMINAL DAS DOENÇAS</p><p>Microrganismos podem invadir outros organismos e causar doenças</p><p>(meados do séc XIX).</p><p>GERAÇÃO ESPONTÂNEATEORIA GERMINAL DAS DOENÇAS</p><p>Teorias de Origem da Vida e Primeiros Cientistas</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Crença em microrganismos</p><p>causadores de doenças.</p><p>Surgimento de</p><p>microrganismos a partir de</p><p>matéria não viva.</p><p>Como/pra quê compreender</p><p>transmissão e controle de</p><p>doenças?FAKE NEWS da antiguidade:</p><p>- Roedores originavam-se de grãos</p><p>úmidos;</p><p>- Insetos originavam-se da poeira;</p><p>- Vermes e rãs, originários da lama!</p><p>Refutaram a geração espontânea!</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Francesco Redi, XVII.</p><p>Louis Pasteur. Frasco “pescoço de cisne”</p><p>Teorias de Origem da Vida e Primeiros Cientistas</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Teorias de Origem da Vida e Primeiros Cientistas</p><p>QUESTÕES DE FIXAÇÃO</p><p>1. O experimento de Louis Pasteur foi essencial para</p><p>acabar com a ideia errônea existente na época sobre</p><p>a origem da vida. A teoria que entrou em descrédito</p><p>por causa dos experimentos de Pasteur foi:</p><p>a) a teoria celular</p><p>b) a panspermia</p><p>c) a teoria da biogênese</p><p>d) a teoria da abiogênese</p><p>e) a ancestralidade comum</p><p>QUESTÕES DE FIXAÇÃO</p><p>2. O experimento de Pasteur foi muito importante para demonstrar que</p><p>a vida surge apenas de um organismo preexistente. Todas as</p><p>afirmações a seguir referem-se a esse experimento, com exceção da:</p><p>a) Em seu experimento, Pasteur utilizou um caldo nutritivo que foi</p><p>aquecido.</p><p>b) Pasteur, em seu experimento, utilizou frascos cobertos por gaze para</p><p>impedir que micro-organismos entrassem em contato com o caldo</p><p>nutritivo.</p><p>c) No experimento de Pasteur, observou-se a ausência de crescimento</p><p>de micro-organismos mesmo o caldo apresentando contato com o ar.</p><p>d) Para provar que sua ideia estava correta, Pasteur quebrou os</p><p>gargalos dos frascos utilizados e deixou o material em contato com ar.</p><p>e) A estrutura do frasco utilizado por Pasteur permitia o contato com o</p><p>ar, mas impedia o acesso de micro-organismos.</p><p>QUESTÕES DE FIXAÇÃO</p><p>3 - (PUC-RIO) Louis Pasteur derrubou a teoria da abiogênese,</p><p>pois comprovou que a vida não surgia espontaneamente. Para</p><p>isso, ele realizou um experimento utilizando um frasco com</p><p>gargalo em forma de pescoço de cisne que impedia:</p><p>a) A alteração do pH do líquido dentro do frasco.</p><p>b) A alteração da temperatura do líquido dentro do frasco.</p><p>c) O contato do oxigênio presente no ar com o líquido dentro do</p><p>frasco.</p><p>d) O contato do vapor d’água presente no ar com o líquido</p><p>dentro do frasco.</p><p>e) O contato de microrganismos presentes no ar com o líquido</p><p>dentro do frasco.</p><p>QUESTÕES DE FIXAÇÃO</p><p>4 - Pasteur desenvolveu um processo utilizado</p><p>até os dias atuais que consiste no aquecimento</p><p>e resfriamento brusco de um produto com a</p><p>finalidade de retirar os micro-organismo ali</p><p>presentes. Essa técnica é conhecida como:</p><p>a) Defumação.</p><p>b) Banho-maria.</p><p>c) Pasteurização.</p><p>d) Refrigeração.</p><p>e) Termificação.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Teorias de Origem da Vida e Primeiros Cientistas</p><p>Identificou bactérias (tuberculose e cólera), observou células em divisão ativa</p><p>e dormentes (esporos) e desenvolveu técnicas para o estudo in vitro.</p><p>Robert Koch.</p><p>POSTULADOS DE KOCH</p><p>ASSOCIAR DETERMINADO MICRORGANISMO A UMA DOENÇA</p><p>ESPECÍFICA</p><p>1</p><p>O agente causador específico</p><p>precisa ser encontrado</p><p>em</p><p>todos os casos da doença.</p><p>2</p><p>O organismo causador da</p><p>doença deve ser isolado em</p><p>cultura pura.</p><p>3</p><p>A inoculação de uma amostra</p><p>da cultura em um animal</p><p>saudável e suscetível deve</p><p>produzir a mesma doença.</p><p>4</p><p>O organismo causador da</p><p>doença deve ser recuperado</p><p>a partir do animal inoculado.</p><p>Avanço na</p><p>teoria germinal</p><p>da doença!</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Teorias de Origem da Vida e Primeiros Cientistas</p><p>POSTULADOS DE KOCH</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Diversidade dos Microrganismos e Relevância</p><p>Microrganismos são classificados em 3 domínios: Bacteria, Archaea e</p><p>Eukarya.</p><p>EUKARYA</p><p>BACTÉRIA</p><p>ARCHAEA</p><p>Animais, plantas e fungos</p><p>(macrorganismos)</p><p>Todos os procariotos patogênicos, além de outros não</p><p>patogênicos. Paredes celulares contêm peptideoglicano.</p><p>Procariotos que não possuem peptideoglicano em suas</p><p>paredes celulares.</p><p>Metanógeno</p><p>s</p><p>Anaeróbios estritos, que produzem CH4 a partir de CO2 e</p><p>H2</p><p>Halófilos ↑ [ ] de sais</p><p>Hipertermófil</p><p>os</p><p>↑ temperaturas</p><p>PROCARIOTOS</p><p>Não são conhecidas arqueias que</p><p>causem doenças em seres</p><p>humanos.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Diversidade dos Microrganismos e Relevância</p><p>Hierarquia Taxonômica</p><p>Espécie eucariótica é um grupo</p><p>de organismos intimamente</p><p>relacionados que se reproduzem</p><p>entre si.</p><p>Espécie procariótica apresenta</p><p>divisão celular sem ligação</p><p>direta com a conjugação sexual</p><p>(não é frequente, nem</p><p>tampouco requer que seja</p><p>espécie-específica). Define-se,</p><p>apenas, como uma. população</p><p>de células com características</p><p>similares</p><p>• Unicelulares;</p><p>• Procarióticas (não tem o material genético envolto por uma membrana</p><p>nuclear especial);</p><p>• Possuem diferentes formatos;</p><p>• Parede celular composta por peptideoglicano (complexo de CHO e PTN);</p><p>• Reprodução: divisão em duas células iguais (fissão binária);</p><p>• Nutrem-se de compostos orgânicos - em sua maioria - e inorgânicos, e</p><p>podem realizar fotossíntese.</p><p>• Movimento usa apêndices, flagelos, semelhante ao nado.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Diversidade dos Microrganismos e Relevância</p><p>Bactérias</p><p>Fungos</p><p>Protozoários</p><p>Vírus</p><p>Algas</p><p>Tipos de Microrganismos</p><p>• Unicelulares (ex.: leveduras) ou multicelulares (ex.: cogumelos);</p><p>• Eucariotos (núcleo, contendo DNA, circundado por membrana nuclear);</p><p>• Parede celular composta, principalmente, por quitina;</p><p>• Não realizam fotossíntese.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Diversidade dos Microrganismos e Relevância</p><p>Bactérias</p><p>Fungos</p><p>Protozoári</p><p>os</p><p>Vírus</p><p>Algas</p><p>Tipos de Microrganismos</p><p>• Bolores (fungos mais comuns):</p><p>Formam massas visíveis, micélios, compostas de</p><p>longos filamentos (hifas), que se ramificam e se</p><p>entrelaçam.</p><p>MUCOR, bolor de pão típico</p><p>• Unicelulares;</p><p>• Eucariotos;</p><p>• Movimentam-se através de pseudópodes (pés falsos), flagelos (longos)</p><p>ou cílios (curtos);</p><p>• Apresentam formas variadas, vivendo livremente como parasitos,</p><p>absorvendo ou ingerindo compostos orgânicos do ambiente;</p><p>• Alguns são fotossintéticos (ex.: Euglena);</p><p>• Reprodução sexuada ou assexuada.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Diversidade dos Microrganismos e Relevância</p><p>Bactérias</p><p>Fungos</p><p>Protozoários</p><p>Vírus</p><p>Algas</p><p>Tipos de Microrganismos</p><p>Ameba</p><p>• Acelulares;</p><p>• Partícula formada por um núcleo formado por um tipo de ác. nucleico</p><p>(DNA ou RNA);</p><p>• O núcleo é circundado por uma camada proteica e, muitas vezes,</p><p>envolva por uma cada lipídica (envelope);</p><p>• Só se reproduzem utilizando a maquinaria celular de outros organismos;</p><p>• Não são considerados organismos vivos, porque são inertes fora de</p><p>hospedeiros vivos.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Diversidade dos Microrganismos e Relevância</p><p>Bactérias</p><p>Fungos</p><p>Protozoários</p><p>Vírus</p><p>Algas</p><p>Tipos de Microrganismos</p><p>HIV (corado em</p><p>vermelho), em</p><p>células TCD4+</p><p>• Em geral, unicelulares;</p><p>• Eucariotos;</p><p>• Paredes de muitas delas compostas por celulose (CHO);</p><p>• Apresentam formas variadas;</p><p>• Fotossintéticas (geralmente, não requerem compostos orgânicos do</p><p>ambiente);</p><p>• Reprodução sexuada ou assexuada.</p><p>• Produtoras de O2 E CHO, utilizados por outros organismos, incluindo</p><p>animais.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Diversidade dos Microrganismos e Relevância</p><p>Bactérias</p><p>Fungos</p><p>Protozoários</p><p>Vírus</p><p>Algas</p><p>Tipos de Microrganismos</p><p>Volvox.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Vacina</p><p>Benefícios e malefícios que os mcos podem causar</p><p>Uma jovem relatou</p><p>que não contraia</p><p>varíola porque</p><p>esteve doente com</p><p>varíola bovina.</p><p>Edward Jenner,</p><p>médico, testou a</p><p>hipótese coletando</p><p>feridas das vacas.</p><p>Inoculou em um</p><p>voluntário de 8 anos,</p><p>através de pequenos</p><p>arranhões com</p><p>agulha</p><p>contaminada.</p><p>Arranhões</p><p>originaram bolhas.</p><p>Houve a forma leve</p><p>da doença e</p><p>recuperação plena.</p><p>Nunca mais o</p><p>garoto teve varíola</p><p>bovina e nem</p><p>varíola humana.</p><p>70 anos antes dos postulados de Koch...</p><p>Anos depois</p><p>Pasteur desvendou</p><p>o porque a</p><p>vacinação</p><p>funcionava!</p><p>A bactéria causadora da cólera perde</p><p>capacidade de causar doença</p><p>(virulência) após cultivo em laboratório</p><p>por longos períodos.</p><p>Vacina. Culturas de microrganismos</p><p>avirulentos utilizados para inoculação</p><p>preventiva.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Benefícios e malefícios que os mcos podem</p><p>causar</p><p>Quimioterapia</p><p>Após a relação entre</p><p>microrganismos e doenças ter</p><p>sido estabelecida, os médicos</p><p>microbiologistas direcionaram as</p><p>novas pesquisas para a busca</p><p>de substâncias que pudessem</p><p>destruir o microrganismo</p><p>patogênico sem causar nenhum</p><p>mal à pessoa ou ao animal</p><p>infectado.</p><p>O tratamento de uma doença através da utilização de substâncias químicas.</p><p>Antibióticos</p><p>Substâncias químicas produzidas naturalmente por</p><p>bactérias e fungos para atuar contra outros</p><p>microrganismos.</p><p>Medicamentos sintéticos</p><p>Agentes quimioterápicos preparados a partir de compostos</p><p>químicos em laboratório.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Benefícios e malefícios que os mcos podem</p><p>causarDescoberta da Quimioterapia</p><p>Paul Ehrlich</p><p>Especulou sobre uma “bala mágica” que pudesse combater e</p><p>destruir o patógeno sem prejudicar o hospedeiro. Em 1910,</p><p>descobriu o salvarsan (derivado do arsênico), efetivo contra sífilis.</p><p>Alexander Fleming (descobriu lisozima, em fluidos corporais, podendo matar</p><p>bactérias)</p><p>Descobriu o primeiro antibiótico por acidente. Observou uma área</p><p>clara onde não havia crescimento bacteriano, numa cultura</p><p>contaminada por fungo, pois o fungo inibia o crescimento da</p><p>bactéria.</p><p>O fungo: penicillium chrysogenum. O inibidor ativo: penicilina.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Benefícios e malefícios que os mcos podem causar</p><p>Quimioterapia Moderna</p><p>Tecnologia do DNA recombinante</p><p>Insere DNA recombinante em uma</p><p>bactéria (ou outros micróbios) para a</p><p>produção de grandes quantidades de</p><p>uma proteína desejada.</p><p>No final da década de 1960, Paul Berg</p><p>mostrou que fragmentos do DNA</p><p>(genes) humano ou animal que</p><p>codificam proteínas importantes podem</p><p>ser ligados ao DNA bacteriano. O híbrido</p><p>resultante foi o primeiro exemplo de DNA</p><p>recombinante.</p><p>Fonte: Jornal da</p><p>USP</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Benefícios e malefícios que os mcos podem causar</p><p>BIOFILMES</p><p>MICROBIOTA Microbiota normal: protege</p><p>contra doenças, produzem</p><p>vitamina K e vitaminas do</p><p>complexo B.</p><p>Microbiota sai do nicho pode ser</p><p>contaminante.</p><p>Microrganismos ligados</p><p>uns aos outros e/ou a</p><p>uma superfície sólida.</p><p>Em lagos ou sobre uma rocha,</p><p>protegem e servem de alimento.</p><p>Podem entupir cateteres,</p><p>crescer sobre próteses; entupir</p><p>canos de água.</p><p>1 2 3 4 5</p><p>Ecologia</p><p>microbiana</p><p>Ciclos</p><p>biogeoquímicos</p><p>Fertilização do</p><p>solo</p><p>Reciclagem de</p><p>nutrientes</p><p>Auxilia no estudo e</p><p>interpretação das funções</p><p>fisiológicas de outros seres</p><p>vivos</p><p>Microbiota endógena</p><p>Indústrias</p><p>alimentícias e</p><p>farmacêuticas</p><p>Estudo das doenças</p><p>infecciosas</p><p>Qual a importância da microbiologia</p><p>na vida dos seres humanos?!</p><p>HISTÓRICO, CONCEITO E</p><p>IMPORTÂNCIA DA</p><p>MICROBIOLOGIA</p><p>Microbiologia e</p><p>Imunologia</p><p>Diapositivo 1: Microbiologia e Imunologia</p><p>Diapositivo 2: Objetivo</p><p>Diapositivo 3: Dinâmica</p><p>Diapositivo 4: AVALIAÇÃO</p><p>Diapositivo 5: EMENTA</p><p>Diapositivo 6: BIBLIOGRAFIA BÁSICA</p><p>Diapositivo 7: BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR</p><p>Diapositivo 8: Aula 01. Histórico, Conceito e Importância da Microbiologia</p><p>Diapositivo 9: Conceitos Básicos na Microbiologia</p><p>Diapositivo 10: Conceitos Básicos na Microbiologia</p><p>Diapositivo 11: Conceitos Básicos na Microbiologia</p><p>Diapositivo 12: Eventos Históricos</p><p>Diapositivo 13: Eventos Históricos</p><p>Diapositivo 14:</p><p>Eventos Históricos</p><p>Diapositivo 15: Eventos Históricos</p><p>Diapositivo 16: Eventos Históricos</p><p>Diapositivo 17: Teorias de Origem da Vida e Primeiros Cientistas</p><p>Diapositivo 18</p><p>Diapositivo 19</p><p>Diapositivo 20: QUESTÕES DE FIXAÇÃO</p><p>Diapositivo 21: QUESTÕES DE FIXAÇÃO</p><p>Diapositivo 22: QUESTÕES DE FIXAÇÃO</p><p>Diapositivo 23: QUESTÕES DE FIXAÇÃO</p><p>Diapositivo 24</p><p>Diapositivo 25</p><p>Diapositivo 26</p><p>Diapositivo 27</p><p>Diapositivo 28</p><p>Diapositivo 29</p><p>Diapositivo 30</p><p>Diapositivo 31</p><p>Diapositivo 32</p><p>Diapositivo 33</p><p>Diapositivo 34</p><p>Diapositivo 35</p><p>Diapositivo 36</p><p>Diapositivo 37</p><p>Diapositivo 38</p><p>Diapositivo 39</p>