AULA 1 _ Coleta, armazenamento, transporte e processamento de amostras biológicas

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<p>Coleta, armazenamento,</p><p>transporte e processamento</p><p>de amostras biológicas</p><p>Profa. Me. Viviane C. Longuini de Menezes</p><p>Fases do Ciclo Diagnóstico</p><p>Exames</p><p>laboratoriais</p><p>Os principais objetivos dos exames laboratoriais são:</p><p>• Confirmar, estabelecer ou complementar o diagnóstico</p><p>clínico</p><p>• Excluir diagnósticos</p><p>• Monitorar e avaliar a eficácia de determinado tratamento</p><p>• Acompanhar a evolução de uma patologia</p><p>• Auxilia no prognóstico de doenças</p><p>• Medicina preventiva</p><p>• Triagem</p><p>Exames</p><p>laboratoriais mais</p><p>comuns:</p><p>• Sangue, soro, plasma: Bioquímica,</p><p>Hematologia, Sorologia</p><p>• Urina</p><p>• Fezes</p><p>• Escarro</p><p>• No ambiente hospitalar é possível</p><p>realizar a coleta de outros materiais</p><p>para análise, como pus, saliva, líquido</p><p>sinovial, pleural, amniótico, pericárdico,</p><p>líquor e outros.</p><p>Introdução</p><p>• A coleta propriamente dita, o</p><p>processamento e o estoque de</p><p>tipos comuns de amostras</p><p>associados a requisições para</p><p>testes diagnósticos são</p><p>imprescindíveis para a provisão</p><p>de resultados de exames de</p><p>qualidade, sendo que muitos</p><p>erros podem ocorrer durante esses</p><p>passos.</p><p>Coleta</p><p>• Realizada do local real da infecção;</p><p>• Obtenção de uma quantidade suficiente de</p><p>amostra</p><p>• Utilização de dispositivos apropriados para a</p><p>coleta do material</p><p>• Obtenção de cultura antes da administração de</p><p>antibióticos</p><p>• Identificação do material</p><p>Fatores que interferem nos resultados:</p><p>VARIÁVEIS PRÉ-ANALÍTICAS</p><p>Alguns desses fatores são de</p><p>responsabilidade do laboratório</p><p>-Técnica na coleta</p><p>do material</p><p>-Processamento do</p><p>material</p><p>-Armazenamento</p><p>do material</p><p>-Fisiologia do</p><p>paciente em</p><p>particular</p><p>-Dieta</p><p>-Utilização de</p><p>medicamentos</p><p>-Estilo de vida</p><p>(exercícios,</p><p>tabagismo,</p><p>alcoolismo)</p><p>Instruções da coleta:</p><p>• Para alguns exames é necessário que o próprio paciente realize a</p><p>coleta (urina, fezes, escarro);</p><p>• Nesses casos, as instruções sobre o preparo e coleta são</p><p>transmitidos ao paciente pela recepção do laboratório quando o</p><p>paciente leva a requisição dos exames solicitados pelo médico;</p><p>• Etapa crítica: a maior parte dos erros ocorre ou porque o paciente</p><p>não fez o preparo/coleta correto ou porque omitiu informações</p><p>relevantes para a interpretação dos resultados.</p><p>Coleta de</p><p>sangue:</p><p>• O sangue para análise, é obtido</p><p>através de veias, artérias e</p><p>capilares.</p><p>• O sangue venoso é geralmente a</p><p>amostra de escolha</p><p>VENOPUNÇÃO</p><p>• Punção arterial é utilizada para</p><p>análise de gases sanguíneos.</p><p>• O sangue pode ser examinado</p><p>como sangue total, plasma ou soro.</p><p>Coleta de sangue venoso</p><p>Accuvein</p><p>VeinViewer</p><p>Coleta de sangue venoso</p><p>Coleta de sangue</p><p>venoso – Passo a</p><p>passo:</p><p>• Verificar se o local da coleta está arrumado</p><p>• Identificar o paciente e pedido médico</p><p>• Acomodar o paciente</p><p>Coleta de sangue</p><p>venoso–Passo a</p><p>passo:</p><p>• Preparar o material a ser utilizado no paciente (verificar</p><p>o pedido de exames)</p><p>• Identificar os tubos</p><p>• Informar o procedimento ao paciente</p><p>Coleta de sangue</p><p>venoso–Passo a</p><p>passo:</p><p>• Higienizar as mãos</p><p>• Calçar as luvas</p><p>• Garrotear o braço do</p><p>paciente e localizar a veia</p><p>Coleta de sangue</p><p>venoso–Passo a passo:</p><p>• Fazer a antissepsia</p><p>• Realizar a punção e inserir o primeiro tubo</p><p>• Realizar a troca dos tubos de acordo com a</p><p>sequência recomendada</p><p>• Homogeneizar os tubos</p><p>Coleta de sangue</p><p>venoso–Passo a passo:</p><p>• Soltar o garrote</p><p>• Retirar a agulha</p><p>• Realizar a compressão no local da punção com</p><p>gaze ou algodão seco (1 a 2 minutos)</p><p>• Não dobrar o braço</p><p>Coleta de</p><p>sangue</p><p>venoso–Passo</p><p>a passo:</p><p>Coleta de sangue</p><p>venoso–Passo a</p><p>passo:</p><p>• Descartar a agulha no local recomendado</p><p>• Orientação quanto a compressão</p><p>Coleta de sangue venoso– Agulha</p><p>➢ Escolha do calibre da agulha</p><p>➢ Angulação da agulha</p><p>Bisel para cima</p><p>Coleta de sangue venoso</p><p>-Sistema a vácuo</p><p>-Seringa</p><p>Processamento</p><p>das amostras</p><p>Tubos de coleta</p><p>a vácuo</p><p>• Volumes variados</p><p>• Diferentes aditivos: identificados pela cor da</p><p>tampa</p><p>Tubos de coleta a vácuo</p><p>Ordem de coleta</p><p>1º Frascos para hemocultura;</p><p>• 2º Tubos com citrato (tampa azul claro);</p><p>• 3º Tubos para soro com Ativador de Coágulo,</p><p>com ou sem Gel Separador (tampa</p><p>• vermelha ou amarela);</p><p>• 4º Tubos com Heparina com ou sem Gel</p><p>Separador de plasma (tampa verde);</p><p>• 5º Tubos com EDTA (tampa roxa);</p><p>• 6º Tubos com fluoreto (tampa cinza).</p><p>Coleta de sangue venoso - Inversões</p><p>Coleta sangue</p><p>arterial</p><p>• Requer bastante</p><p>habilidade</p><p>• Utilizadas para análises</p><p>de gases sanguíneos</p><p>• Artéria radial do pulso</p><p>• Artéria braquial do</p><p>cotovelo</p><p>• Artéria femoral na</p><p>virilha</p><p>Protocolos de coleta de sangue</p><p>para exames:</p><p>• Coleta jejum -normal</p><p>• TTOG (teste de tolerância a glicose)</p><p>-Curva glicêmica</p><p>• Glicemia pós prandial</p><p>Protocolos de coleta de sangue para exames:</p><p>Lipemia:</p><p>• Fatores que influenciam</p><p>durante a coleta:</p><p>• Jejum inadequado</p><p>• Dieta rica em gorduras</p><p>• Coleta traumática</p><p>• Medicamentos</p><p>Hemólise:</p><p>• Fatores que influenciam durante</p><p>a coleta:</p><p>• Tapinhas</p><p>• Agitação</p><p>• Calor ou frio</p><p>• Garroteamento prolongado</p><p>• Agulhas finas</p><p>• Inserir agulha da seringa na</p><p>tampa dos tubos</p><p>Protocolos de coleta</p><p>de</p><p>sangue</p><p>para</p><p>exames:</p><p>• Outros fatores:</p><p>• Idade e sexo</p><p>• Atividade física</p><p>• Estado emocional</p><p>• Postura</p><p>• Uso de medicamentos</p><p>• Dieta prévia</p><p>• Estilo de vida (alcoolismo, tabagismo)</p><p>Coleta de urina</p><p>• O tipo de amostra a ser coletada é ditado pela</p><p>avaliação de diversos aspectos como:</p><p>• -Colhida pela manhã cedo, em jejum –mais concentrada:</p><p>preferida para microscopia e detecção de quantidades</p><p>anormais de constituintes da urina</p><p>• -10 mL iniciais são importantes para determinação de</p><p>uretrites, enquanto que o jato médio é mais importante para</p><p>investigação de problemas na bexiga</p><p>• -Coleta de toda a urina de 24h (nictêmero) – hormônios e</p><p>proteínas</p><p>Exames mais comuns:</p><p>Urina colhida pela manhã (EAS)</p><p>Urina 24h Urocultura</p><p>-Microscopia –cilindros, hemácias, piócitos</p><p>-Bioquímica –proteínas, bilirrubina, glicose</p><p>-Exame físico –pH, densidade, aspecto, odor, cor</p><p>-Bacteriológico –urocultura</p><p>Medicamentos, álcool e drogas também influenciam</p><p>Coleta de urina</p><p>1. Ao levantar pela manhã, o paciente deverá desprezar toda a urina contida na bexiga e</p><p>anotar o horário.</p><p>2. A partir desse momento, toda vez que urinar, durante o resto do dia e também à noite,</p><p>deve-se recolher integralmente a urina de cada micção, colocando-a no mesmo frasco de</p><p>coleta. Este deve ser bem fechado e guardado em refrigerador, entre as micções.</p><p>3. Armazene toda a urina colhida em recipiente descartável ou garrafas vazias de água</p><p>mineral. Não usar outra embalagem.</p><p>4. Se a quantidade de urina for maior do que o frasco comporta, use frascos adicionais</p><p>(quantos forem necessários), para conter todo o volume de 24 horas.</p><p>5. Na manhã seguinte, deve-se coletar toda a urina contida na bexiga e encerrar a coleta no</p><p>horário correspondente ao horário que desprezou a 1°micção da véspera.</p><p>6. Durante as 24 horas de coleta, a ingestão de líquidos deve ser a habitual.</p><p>7. Todo o volume urinário coletado nas 24 horas deverá ser encaminhado ao laboratório</p><p>logo após ser retirado do refrigerador.</p><p>OBS: Para alguns exames o frasco fornecido pelo Laboratório, deverá conter um líquido, cuja</p><p>função é de conservar a urina, não devendo, portanto ser desprezado.</p><p>Armazenamento e transporte de amostras</p><p>Qual é o tempo entre coleta e a realização do exame?</p><p>Qual é a temperatura ideal?</p><p>Ambiente: 18 a 22ºC Refrigerada: 2 a 8º</p><p>Congelada: abaixo de 20ºC negativos-Hemólise</p><p>Armazenamento e</p><p>transporte de</p><p>amostras</p><p>• Manter tubos na posição vertical, evitando</p><p>chacoalhar, ao abrigo da luz e altas</p><p>temperaturas (acima de 35 oC);</p><p>• Evitar agitação excessiva da amostra, alocando-</p><p>a num firme container no veículo que for</p><p>transportá-la</p><p>Armazenamento e transporte de amostras</p><p>Entre 2-4h da coleta de sangue pode haver</p><p>variações nos seguintes componentes:</p><p>• Hematócritos, eritrócitos (média do volume celular)</p><p>• Bilirrubina plasmática</p><p>• Glicose, potássio, ferro</p><p>• Lítio, fosfato</p><p>• Em amostra de urina, pode não ser apropriado determinação de sedimento após 2h a</p><p>• temperatura ambiente</p><p>• Acima de 4h:</p><p>• LDH, fostase ácida,</p><p>potássio, frações do complemento C3 e C4, ácido fólico, gastrina,</p><p>• vitamina B12, zinco</p><p>• Estudos para análise celular em EDTA</p><p>• Estudos de coagulação que requerem refrigeração, congelamento ou separação do</p><p>• plasma</p><p>-Identificação errada do paciente</p><p>-Troca de amostras</p><p>-Paciente não preparado corretamente</p><p>–falta de jejum, horário da coleta</p><p>incorreto, tempo da coleta de urina</p><p>incorreto</p><p>-Uso de anticoagulante errado</p><p>-Volume da amostra inadequado para o</p><p>exame</p><p>-Hemólise e lipemia intensas</p><p>-Transporte e armazenamento da</p><p>amostra incorretos</p><p>-Contaminação de tubos, frascos,</p><p>tampas</p><p>Necessidade de nova coleta !!</p><p>Erros potenciais</p><p>na realização de</p><p>exames</p><p>Biossegurança Descarte de amostras e material</p><p>perfuro-cortante</p><p>Biossegurança -</p><p>Descarte de</p><p>amostras e</p><p>material perfuro-</p><p>cortante</p><p>RDC ANVISA no 306</p><p>Transporte</p><p>• Seringa:</p><p>• Exsudatos frescos ou amostras líquidas: procedimento válido para amostras enviadas</p><p>para análise logo após a coleta.</p><p>• Frascos :</p><p>• Frascos de boca larga com sistema de fechamento eficiente contra vazamento e</p><p>contaminação de material</p><p>Transporte</p><p>• Swab</p><p>• Algodão estéril</p><p>• Rayon ou Dracon</p><p>• Alginato de cálcio</p><p>• Solução salina, meio de</p><p>cultura Amie (com ou sem</p><p>carvão),Stuart e Clairy Blair.</p><p>Swab</p><p>Amostras</p><p>Rejeitadas</p><p>• Amostra recebida em formalina;</p><p>• Coleta de escarro de 24 horas;</p><p>• Único swab para vários fins;</p><p>• Recipiente impróprio, contaminado ou com</p><p>vazamento</p><p>• Placas de cultura com crescimento excessivo ou</p><p>secas.</p><p>• MCPHERSON, Richard A.; PINCUS, Mattew R. (Ed.).</p><p>Diagnósticos clínicos e tratamento por métodos</p><p>laboratoriais de Henry. 21.ed. Barueri: Manole, 2012. xxiii,</p><p>1638 ISBN 978-85-204-3095-8.</p><p>• • MUNDT, Lillian A.; SHANAHAN, Kristy. Exame de urina e de</p><p>fluidos corporais de Graff. 2. ed. Porto Alegre: ArtMed,</p><p>2015. ISBN 9788536326900. Disponível em: Minha</p><p>Biblioteca. Acesso em: 25 mar. 2020.</p><p>• • MURPHY, Michael J.; SRIVASTAVA, Rajeev; DEANS, Kevin.</p><p>Bioquimica clínica. Rio de Janeiro: GEN Guanabara Koogan,</p><p>2019. ISBN 9788595150751.Disponível em: Minha</p><p>Biblioteca. Acesso em: 25 mar. 2020.</p><p>BIBLIOGRAFIA BÁSICA</p><p>• FERREIRA, Antonio Walter; MORAES, Sandra do Lago. Diagnóstico</p><p>laboratorial das principais doenças infecciosas e autoimunes: correlações</p><p>clínico-laboratoriais. 3.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, c2013. vii,</p><p>477 p. ISBN 978-85-277-2302-2.</p><p>• • GUYTON, Arthur C. Fisiologia humana. 6.ed. Rio de Janeiro: Guanabara</p><p>Koogan, 2011. 564 p. ISBN 978-85-277-1412-9.</p><p>• • RODAS DURÁN, José Henrique. Biofísica: conceitos e aplicações. 2. ed.</p><p>São Paulo: Pearson Prentice Hall, 2011. 390 p. ISBN 978-85-7605-928-8.</p><p>• • BAYNES, John W.; DOMINICZAK, Marek H. Bioquímica médica. Rio de</p><p>Janeiro: GEN Guanabara Koogan, 2015. ISBN 9788595151543. Disponível</p><p>em Minha Biblioteca. Acessado em: 25 mar. 2020.</p><p>• • KUMAR, Vinay; ABBAS, Abul K.; ASTER, Jon C. Robbins: patologia</p><p>básica. 9.ed. Rio de Janeiro: Elsevier, c2013. xvi, 910 p. ISBN 978-85-352-</p><p>6294-0.</p><p>BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR</p><p>Slide 1: Coleta, armazenamento, transporte e processamento de amostras biológicas</p><p>Slide 2</p><p>Slide 3: Exames laboratoriais</p><p>Slide 4: Exames laboratoriais mais comuns:</p><p>Slide 5: Introdução</p><p>Slide 6</p><p>Slide 7: Fatores que interferem nos resultados:</p><p>Slide 8: Instruções da coleta:</p><p>Slide 9: Coleta de sangue:</p><p>Slide 10: Coleta de sangue venoso</p><p>Slide 11</p><p>Slide 12: Coleta de sangue venoso – Passo a passo:</p><p>Slide 13: Coleta de sangue venoso–Passo a passo:</p><p>Slide 14: Coleta de sangue venoso–Passo a passo:</p><p>Slide 15: Coleta de sangue venoso–Passo a passo:</p><p>Slide 16: Coleta de sangue venoso–Passo a passo:</p><p>Slide 17: Coleta de sangue venoso–Passo a passo:</p><p>Slide 18: Coleta de sangue venoso–Passo a passo:</p><p>Slide 19: Coleta de sangue venoso– Agulha</p><p>Slide 20: Coleta de sangue venoso</p><p>Slide 21: Processamento das amostras</p><p>Slide 22: Tubos de coleta a vácuo</p><p>Slide 23: Tubos de coleta a vácuo</p><p>Slide 24: Ordem de coleta 1º Frascos para hemocultura;</p><p>Slide 25: Coleta de sangue venoso - Inversões</p><p>Slide 26: Coleta sangue arterial</p><p>Slide 27: Protocolos de coleta de sangue para exames:</p><p>Slide 28: Protocolos de coleta de sangue para exames:</p><p>Slide 29: Lipemia:</p><p>Slide 30: Hemólise:</p><p>Slide 31: Protocolos de coleta de sangue para exames:</p><p>Slide 32: Coleta de urina</p><p>Slide 33: Coleta de urina</p><p>Slide 34: Armazenamento e transporte de amostras</p><p>Slide 35: Armazenamento e transporte de amostras</p><p>Slide 36: Armazenamento e transporte de amostras Entre 2-4h da coleta de sangue pode haver variações nos seguintes componentes:</p><p>Slide 37: Erros potenciais na realização de exames</p><p>Slide 38: Biossegurança Descarte de amostras e material perfuro-cortante</p><p>Slide 39: Biossegurança - Descarte de amostras e material perfuro-cortante</p><p>Slide 40</p><p>Slide 41</p><p>Slide 42</p><p>Slide 43</p><p>Slide 44</p><p>Slide 45</p>