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06/01/2013 1 pH e tampões UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA - UFBA INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE - ICS DEPARTAMENTO DE BIOFUNÇÃO Disciplina: Bioquímica para Biotecnologia A013 _____________________________________________________________________________________________ Dra. Daniele Takahashi Salvador, novembro de 2012 IONIZAÇÃO DA ÁGUA As moléculas de H2O sofrem ionizações reversíveis. Equilibrando reações através da liberação de íons H+ e OH-. Na água não existem íons livres. Assim, os íons hidrogênio liberados são imediatamente hidratados em íons hidroxônios ou hidrônios. Devido a formação de pontes de hidrogênio A ionização da água pode ser medida pela condutividade elétrica. H+ migram para o cátodo (polo que atrai cátions – com carga negativa) OH- migram para o ânodo (polo que atrai ânions- com carga negativa) Constante de equilíbrio DISSOCIAÇÃO DA ÁGUA Formação do íon hidroxônio Determina o seu “caráter anfótero”: Pode reagir tanto como ácido e como base. Como base: Recebe prótons e aumenta o pH Como ácido: Doa prótons e diminui o pH CONSTANTE DE DISSOCIAÇÃO DA ÁGUA (κ) Equivale as concentrações dos produtos da reação de dissociação, divididos pela concentração de água não ionizada. Κ= [H+] [OH-] [H2O] 06/01/2013 2 Sorensen (1909) pH ⇒ potencial hidrogeniônico, expressa a acidez em termos da concentração [H+] pOH ⇒ potencial hidroxiliônico, expressa a basicidade em termos da concentração [OH-] Introduziu a forma da escala de pH. Evita o uso de números muito pequenos ou de notação exponencial. pH O pH de uma solução logaritmo decimal negativo da concentração do íon hidrogênio pH = - log [H+] Onde: p = - log e H = concentração H+. O QUE É pH? CÁLCULO DO pH pH = 7 = pOH pKw = pH + pOH = 14 ESCALA DE pH ESCALA DE pHA escala é logarítmica Ou seja A diferença de 1 unidade de pH significa a diferença de 10X a concentração de H+ VALORES DE pH DE FLUIDOS AQUOSOS Solução de bicarbonato de sódio Alvejante doméstico Água do mar, clara de ovo Sangue humano, lágrimas 06/01/2013 3 Os processos bioquímicos são extremamente sensíveis a variações do pH. Faixa de pH compatível com a vida 6,8 - 7,8. O pH do sangue nos seres humanos é mantido entre 7,35 - 7,45. ↓pH = acidose e ↑pH = alcalose. Como medir o pH? pHmetro ou indicadores de cor. A importância biológica do pH A medida de pH é um dos procedimentos mais importantes e mais frequentemente utilizados em Bioquímica. O pH afeta a estrutura e atividade de biomoléculas como, por exemplo, a atividade catalítica de enzimas que é dependente do pH. A medida de pH do sangue e da urina são parâmetros importantes no diagnóstico médico. A importância biológica do pH EQUILÍBRIO ÁCIDO-BÁSICO Equação Henderson-Hasselbalch - É um rearranjo da expressão da constante de equilíbrio Ka para a dissociação de um ácido. Ka = constante de dissociação ou de ionização O pH ÓTIMO DE ALGUMAS ENZIMAS 06/01/2013 4 A manutenção do pH ideal é conseguida pela utilização de sistemas-tampão! Se..... O pH é tão importante para que ocorram as reações................ Como manter ou controlar o pH de uma solução ? Tampões, do inglês "buffer" = amortecedor TAMPÕES São misturas de ácidos fortes e suas bases conjugadas ou vice-versa. Os sistemas tampões são sistemas aquosos que tendem a resistir a alterações no pH, quando pequenas quantidades de uma base (OH-) ou um ácido (H+) são adicionados ao meio. Sistema tampão Ácido fraco – Doador de prótons Base conjugada – Receptor de prótons TAMPÃO São as substâncias que limitam as variações do pH tanto do sangue quanto dos demais líquidos orgânicos, pois se combinam com os ácidos ou as bases os quais entram em contato. TAMPÕES DE IMPORTÂNCIA BIOLÓGICA 06/01/2013 5 TAMPÃO BICARBONATO-ÁCIDO CARBÔNICO Corresponde a cerca de 64% do total de tampões do organismo humano. Sistema essencial à regulação do equilíbrio ácido-base. Porque o metabolismo celular gera muito ácido como produto final, sob a forma de ácido carbônico. O ácido fraco do sistema é o ácido carbônico e a base forte é o bicarbonato. A relação constante desse sistema tampão é de 20:1. O plasma sanguíneo é tamponado pelo sistema tampão bicarbonato. A manutenção do pH do fluído extracelular é de 7,35 e 7,45. As células do corpo humano mantêm pH interno de 6,9 a 7,3 A concentração de H2CO3 depende da concentração do CO2 (d). Distúrbios no equilíbrio ácido-base são diagnosticados pela medida do pH do sangue arterial e do conteúdo de CO2 no sangue venoso. Equilíbrio Ácido carbônico (doador de prótons) Bicarbonato (receptor de prótons) TAMPÃO BICARBONATO-ÁCIDO CARBÔNICO TAMPÃO BICARBONATO-ÁCIDO CARBÔNICO Ácido carbônico:(H2CO3) É um ácido fraco Formado quando se dilui CO2 em água. Se dissocia em íons hidrogênio e íons bicarbonato Bicarbonato: (HCO3) É uma base forte Quando um ácido é adicionado ao sangue: O bicarbonato do tampão prontamente reage com ele; a reação produz um sal, formado com o sódio do bicarbonato e ácido carbônico (NaHCO3). Essa reação diminui a quantidade de bases e altera a relação entre o bicarbonato e o ácido carbônico. TAMPÃO BICARBONATO-ÁCIDO CARBÔNICO CO2 é eliminado nos pulmões, recompondo a relação de 20:1 do sistema protetor O ácido carbônico produzido pela reação do bicarbonato do tampão, se dissocia em CO2 e água. 06/01/2013 6 REAÇÃO DE FORMAÇÃO DO ÁCIDO CARBÔNICO A reação é acelerada in vivo pela Anidrase carbônica. Enzima presente em todos os tecidos (pp nas hemácias) Quando uma base invade o organismo: O ácido carbônico prontamente reage com ela, produzindo bicarbonato e água. A concentração de ácido carbônico diminui. TAMPÃO BICARBONATO-ÁCIDO CARBÔNICO Resposta do Organismo: Os rins aumentam a eliminação de bicarbonato ao invés do íon hidrogênio, reduzindo a quantidade de bicarbonato no organismo, para preservar a relação do sistema tampão. TAMPÃO BICARBONATO-ÁCIDO CARBÔNICO CONDIÇÕES NORMAIS H+ + HCO3 H2CO3 H2O+ CO2 EXCESSO DE ÁCIDO H+ + HCO3 H2CO3 H2O+ CO2 H+ + HCO3 H2CO3 H2O+ CO2 H+ + HCO3 H2CO3 H2O+ CO2 INSUFICIÊNCIA DE ÁCIDO H+ + HCO3 H2CO3 H2O+ CO2 H+ + HCO3 H2CO3 H2O+ CO2 H+ + HCO3 H2CO3 H2O+ CO2 O ORGANISMO SE AJUSTA LIBERANDO OU RETENDOMAIS CO2 PARA MANTER A CONSTANTE 20:1 Liberação de mais CO2 pelos pulmões Liberação de mais H+ pelos rins INSUFICIÊNCIA DE ÁCIDO H+ + HCO3 H2CO3 H2O+ CO2 H+ + HCO3 H2CO3 H2O+ CO2 Todos os sistemas tampão do organismo atuam da mesma forma que o sistema bicarbonato/ácido carbônico. O sistema neutraliza o excesso de ácidos ou de bases e em seguida o organismo tenta recompor a relação normal do tampão. O princípio fundamental da regulação do equilíbrio ácido-base é a manutenção da relação constante entre o numerador e o denominador do sistema tampão. Nas alcaloses - o organismo tolera a redução dos íons hidrogênio em cerca da metade do seu valor normal, até alcançar o pH incompatível com a vida celular. Nas acidoses - o organismo tolera a elevação dos íons hidrogênio 3 vezes acima do normal, até alcançar o pH incompatível com a vida TAMPÕES DE IMPORTÂNCIA BIOLÓGICA 06/01/2013 7 DOENÇAS ASSOCIADAS AOS TAMPÕES DE IMPORTÂNCIA BIOLÓGICA ACIDOSE METABÓLICA Pode ocorrer pela superprodução ou retenção de H+ Baixando o pH do sangue para valores inferiores a 7,35 SINTOMAS: Respiração rápida e profunda (o aumento da respiração ajuda a compensar a acidose, pois elimina-se CO2 pela respiração); OBS: Esse mecanismo interfere na captação de O2 Em acidoses crônicas o componente mineral dos ossos, acaba servindo como tampão, levando a perda de Ca, Mg e fosfato osteoporose e fraturas COMO TRATAR: Pela administração de bicarbonato (HCO3) ALCALOSE METABÓLICA Geralmente é resultado de uma concentração diminuída de H+, levando a concentrações aumentadas de bicarbonato. Aumento o pH do sangue para valores superiores a 7,45 SINTOMAS: HipoventilaçãoA compensação respiratória ocorre principalmente nos pulmões, pela retenção de CO2 através de respiração lenta ou hipoventilação. A compensação renal (menos efetiva que a compensação respiratória), consiste na excreção aumentada de HCO3- (bicarbonato). DOENÇAS ASSOCIADAS AOS TAMPÕES DE IMPORTÂNCIA BIOLÓGICA ALCALOSE METABÓLICA 4 Causas principais: 1) Perda de ions hidrogênio - Ocorre via vômito ou via renal Via vômito O ato de vomitar resulta na perda de ácido clorídrico do conteúdo estomacal, o que consome íons hidrogênio, elevando o pH do sangue. Via renal As perdas renais de H+ ocorrem quando a aldosterona em excesso induz a retenção de sódio e consequentemente a excreção de hidrogênio. 2) Perda por alcalose de contração Resulta da perda de água no espaço extracelular (que é pobre em bicarbonato), através do uso de diuréticos. Já que a água é perdida enquanto o bicarbonato é retido, a concentração de bicarbonato aumenta o pH sanguíneo. DOENÇAS ASSOCIADAS AOS TAMPÕES DE IMPORTÂNCIA BIOLÓGICA ALCALOSE METABÓLICA 3) Retenção de bicarbonato Ocorre devido a passagem dos ions hidrogênio para o espaço intracelular, devido à concentração baixa de potássio extracelular, o potássio sai das células. Para manter a neutralidade elétrica, o hidrogênio entra nas células, aumentando o pH sanguíneo. 4) Agentes alcalóticos - Agentes alcalóticos, como o bicarbonato (administrado em casos de úlcera péptica ou hiperacidez) ou antiácidos, administrados em excesso podem levar a uma alcalose. Pois podem aumentar os níveis de bicarbonato no sangue DOENÇAS ASSOCIADAS AOS TAMPÕES DE IMPORTÂNCIA BIOLÓGICA 06/01/2013 8 SOLUÇÕES TAMPÃO Podem ser formadas por: Um ácido fraco + um sal Formado pela reação desse ácido com uma base forte, ou Uma base fraca + um sal Formado pela reação dessa base com um ácido forte. As soluções tampão são usadas sempre que se necessita de um meio com pH aproximadamente constante. São preparadas dissolvendo-se os solutos em água.
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