Apres Reoviridae aula

Prévia do material em texto

*
*
*
Família Reoviridae 
→ Introdução
Invertebrados, plantas e vertebrados
trato GI e respirátorio
60 a 85 nm
R (respiratory) E ( enteric ) O (orphan)
*
*
*
Família Reoviridae 
→ In
*
*
*
Família Reoviridae 
*
*
*
Família Reoviridae 
→ Caracteristicas
Vírions simetria icosaédrica, capsídeo duplo
Ausência de envelope
RNA fita dupla (ds RNA) segmentado
RNA genômico infeccioso quando associado com proteína virais
Transcriptase 
Replica no citoplasma
*
*
*
→ em comum tipo e caracteristica do genoma
10-12 mol dsRNA, genoma segmentado
Genoma segmentado: Reovirida e Birnaviridae infectam vertebrados, mas só Reo mamíferos
11 gêneros, 5 causam doenças em vertebrados, sendo 3 mais relevantes em medicina veterinária
Família Reoviridae
*
*
*
Família Reoviridae
→ Classificação
		- Gênero Aquareovírus: peixes, ostras e outros moluscos
			A até F, com grande especificidade de hospedeiro
		
		- Gênero Coltivirus: febre do carrapato do Colorado
			Carrapatos (Dermatocentor andersoni), roedores e seres humanos – forma branda e mais grave (meningoencefalite e febre hemorrágica)
			
			
*
*
*
→ reovírus (primeiros isolados dsRNA) 
2 espécies: ortoreovírus de aves (1-11) e de mamíferos (1-3) clássicos
Reovírus mamíferos são hemoglutinantes
Sinais digestivos e respiratórios
Camundongos sinais variados
Família Reoviridae 	Gênero Orthoreovírus
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orthoreovírus
→ características
23.500 bp em 10 segmentos (L, M e S)
12 proteínas, sendo 8 apenas 1, e 2 segmentos 2 proteínas cada
8 estruturais [ capsídeo interno e externo
4 não-estruturais (células infectadas, funções enzimáticas e regulatórias durante a replicação viral)
Proteínas L - , M  S -  
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orthoreovírus
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orthoreovírus
Muito estáveis
Hipoclorito de sódio e etanol a 95%
Secreções e excreções
Amplificados em cultivo celular- maioria efeitos citopáticos
Tripsina aumenta infectividade
Atividade hemaglutinante - mamíferos 
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orthoreovírus
→ em mamiferos: maioria inaparente ou subclínica
Adultos ou idosos
Equínos - sinais respiratórios
Condição secundária 
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orthoreovírus
→ Em aves
11 sorotipos
Reatividade cruzada
Fácil isolamento viral
Ovos embrionados
Células embrionárias (rim, fígado)
Efeito citopático (sincícios, inclusões, intracitoplasmáticas)
Células rim mamíferos – linhagem contínua 
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orthoreovírus
→ Galinhas e Perus
Síndromes
Aves sadias
Artrite viral
Aves jovens
Infecções mistas e falhas de manejo
Ganho de peso e conversão
Condenações
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
Rota = roda
Um dos principais vírus entéricos
Disseminação ampla (bovinos, suínos e frangos)
Jovens (adultos disseminam)
Infecção heterólogos [ zoonose [ bovinos e suínos
Complexo “diarréia neonatal bovina e suína” 
 
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
bastante resistentes
estáveis no meio ambiente
resistentes a pH entre 3 e 9
sensível a formalina, cloro e etanol 95%
 
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
Propriedades
Capsídeo em 3 camadas proteícas – interno, intermediário e externo
Genoma com 11 segmentos codificando 6 proteínas estruturais e 6 não-estruturais (600 a 3000pb) – importantes no diagnóstico
VP1 a 3 → núcleo ] VP2 mais abundante
Enzimas
			 	- VP6 → capsídeo intermediário
				- VP4 e VP7 → capsídeo externo
recombinações
			
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
*
*
*
→ Classificação – sorogrupos, sorotipos ou eletroferogrupos
SOROGRUPOS
Diferenças antigênicas VP6 (viral protein)
Sorogrupos A a G
D a G - animais somente
A, B e C - infecções clínicas (+A)
ELETROFEROGRUPOS
 perfil de migração em eletroforese
7 eletroferogrupos (A a G)
eletroferotipos
 
Família Reoviridae 	Gênero Rotavírus
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
→ grupo A
	♦ classe I → segmentos 1 a 4
	♦ classe II → segmentos 5 e 6
	♦ classe III → segmentos 7,8 e 9 → migração em trinca
	♦ classe IV → segmentos 10 e 11
						- 4-2-3-2
→ grupo B a G → migração atípica
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
 
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
- SOROTIPOS
♦ classificação em (VP4 e VP7) mais usado
Baseado nas propriedades sorológicas e moleculares
			→ sistema binário
						- VP4 → P tipos (protease sensível)
						- VP7 → G tipos (glicoproteína)
			→ 27 tipos de P e 15 de G = 405
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
Replicação
Capsídeo triplo, com VP4 íntegra ] adsorção + VP7
Vilosidade intestino delgado
Receptores pouco se conhece
AS – ácido siálico
AS independentes (receptores) e AS dependentes
Internalização por endocitose (clivagem proteolítica VP4)
Desnudamento por enzimas lisossomais
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
Endocitose por [ ] de Ca queda
integralmente no citoplasma
Viroplasmas (maioria das proteínas traduzidas)
Passam ao RER
Maturação final → aumenta [ ] Ca
Estabilizar proteínas
Bicamada lipídica temporária
Em seguida VP7 (triplo capsídeo) 
 Lise celular
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
Enfermidades
Interesse econômico
Bezerros, leitões
“curso branco”
Replicação epitélio apical mais lenta nos jovens
IgG → imunidade materna
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
Medidas higiênicas insuficientes
Resistência vírions
↑ [ ] partículas nas fezes
Infecções subclínicas e adultos assintomáticos
Hospedeiros
Enterócitos maduros → intestino delgado
Incubação média de 16 a 24horas
NSP 4 → enterotoxina em camundongos → diarréia hipersecretória
Vírus animais ↔ humanos 
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Rotavírus
Diagnóstico
M.E.
Isolamento viral
ELISA
PAGE 
RT – PCR multiplex
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
Mamíferos e aves
Artrópodes vetores (mosquitos e carrapatos)
Sorologia: 19 espécies (130 sorotipos)
Vírus da língua azul (BTV): 24 sorotipos
 Inflamação mucosas, hemorragias e edemas
 Ovinos: ↑ mortalidade e quebra da lã
Vírus da doença hemorrágica epizoótica dos cervídeos (EHDV): 10 sorotipos
Vírus da peste equína (AHSV): 9 sorotipos
Vírus da encefalose equína (EEV): 7 sorotipos
Vírus Palyam
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
60 a 85 nm
Protótipo é o BTV
Infectividade preservada a -70C
10 segmentos dsRNA
Ressortimentos (+ nos vetores artrópodes)
			 ↑ Diversidade
			Efeitos dos rearranjos pouco conhecidos
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
Partícula viral do BTV
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
Proteínas externas do capsídeo (VP5 e VP2) mais variáveis
Proteínas não-estruturais NS1 e NS2 mais conservadas
 VP3 → ↑ conservada para sorotipos e sorogrupos
Genoma com 10 segmentos
L1 a L3, M4 a M6 e S7 a S10
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
			Codifica VP1 a VP7 e NS1 a NS3
			Núcleo 5 proteínas (VP1, VP3,VP4, VP6 e VP7)
			VP3 - subnúcleo
VP7 - epítopos principais
Exposição na superfície
VP1 – RNA polimerase (transcrição e replicação)
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
Capsídeo com VP2 e VP5
VP2 – sorotipo (Ac) ] hemaglutinação e hemadsorção
VP5 – penetração
Permeabilização e desestabilização de membranas
NS1, NS2 e NS3 - ↑ conservadas (replicação)
Túbulos e corpúsculos de inclusão
NS3 – saída dos vírions
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
REPLICAÇÃO
VP2 – interação rápida
Perdem VP2 e VP5 – transcriptase viral (RNA polimerase) ativa
Se ligam ao citoesqueleto → reprime síntese proteínas da célula
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
REPLICAÇÃO
NS1 → túbulos ao redor núcleo célula hospedeira → característica infecção por orbivírus
Liberação por exocitose
Proteínas estruturais se associarem sem genoma → CLP ou VLP
Capacidade de se replicar nas células endoteliais (artrópodes)
Atravessa placenta e infecta fetos 
*
*
*
Família Reoviridae
	Gênero Orbivírus
Diagnóstico é sorológico
Principal é a imunodifusão emgel de ágar
ELISA
RT-PCR
*
*
*
Muito obrigado!
Muito obrigado!