Biossíntese de proteínas II

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18/06/15 
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Biossíntese Proteica 
Elongação e terminação 
Resumo do processo de iniciação 
da tradução em procariotos 
Ø  subunidade ribossomal menor 
Ø  3 fatores de iniciação da tradução: IF1, IF2 e IF3 
Ø  IF3: bloqueia a reassociação da 30S com a 50S 
 
Ø  IF1: bloqueia a ligação de tRNAs carregados à porção 
da subunidade 30S que formará o sítio A 
 
Ø  IF2: apresenta atividade GTPase e interage com 30S, 
IF1 e fMet-tRNAi 
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Fatores Envolvidos na Elongação 
EF-Tu*: forma o complexo aa-tRNA•EF-Tu•GTP 	
* EF-Tu é uma das proteínas mais abundantes de E. coli: 
70-100 mil cópias (≈ 5% da proteína total) 
A grande parte do pool de aa-tRNA encontra-se na forma do 
complexo ternário (aa-tRNA•EF-Tu•GTP ) 
EF-Ts: Promove a troca de GDP por GTP do EF-Tu	
EF-G: Liga GTP e promove a translocação do ribossomo 	
Após a formação do complexo de iniciação 70S 
contendo o tRNAi no sítio P, começa a fase de 
elongação 
Eventos marcantes: 
•  tRNAs amino acilados entram pelo síto A e saem deacilados pelo sítio E 
•  A peptidil transferase, transfere o peptídeo nascente para o tRNA que entra 
Visão animada da etapa de elongação e formação da ligação 
peptídica_MCB0403 elongation and peptide bond 
Lodish et al. (2003) Molecular Cell Biology, 5th edition, Freeman and Company 
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Fundamentos da 
elongação 
A elongação 
EF-Tu 
GDP 
tRNA-EF-tu 
GTP 
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O Sítio catalítico dentro da 
subunidade ribossomal maior 
Os sítios A e P estão 
justapostos no sítio 
catalítico da peptidil 
transferase 
O EF-Tu●GTP é regenerado 
•  O complexo EF-Tu●GTP é reciclado pela EF-Ts, ambas 
membros da grande família das proteínas G 
•  A hidrólise do EF-Tu●GTP depende da associação perfeita 
do tRNA ao sítio A 
•  Controla fidelidade de síntese 
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A reação de Transpeptidação 
Atividade Peptidil Transferase 
Síntese da Ligação Peptídica 
A posição 2’OH do 
último nucleotídeo do 
tRNA participa da 
reação facilitando a 
troca de prótons 
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EF-G induz translocação 
•  EF-G●GTP entra no mesmo sítio do EF-Tu●GTP 
associando-se à subunidade 50S 
•  A hidrólise do GTP provoca a translocação 
Terminação da síntese 
•  A síntese termina 
com a entrada de um 
RF no sítio A 
provocando a 
liberação da cadeia 
peptídica 
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O Processo de terminação 
Detalhe da 
ação dos 
fatores de 
terminação 
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Cavalo de Tróia 
•  A finalização do processo ocorre com a 
transferência da cadeia nascente a uma molécula 
de água apresentada pelo complexo RF presente 
no sítio A 
mais mimetismo molecular 
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E finalmente o 
ribossomo é 
reciclado 
Fator procariótico Função Fator eucariótico 
Elongação 
EF-Tu Admissão de aa-
tRNA 
eEF-1α 
EF-Ts Regeneração do 
EF-Tu 
eEF-1βγ 
EF-G Translocação do 
peptidil-tRNA 
eEF-2 
Terminação 
RF-1 Reconhece os 
codons UAA e UAG 
 
RF-2 Reconhece os 
codons UGA e UAA 
 
RF-3 GTPase 
relacionada à EF-G 
 
O Mecanismo de elongação e terminação 
em eucariotos é muito similar aquele 
encontrado em procariotos 
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Tamanhos moleculares 
Antibióticos interferem na tradução 
Droga Ação Sítio de ação 
Estreptomicina Inibe iniciação e provoca erro de leitura r-Proteína S12 
Tetraciclina Inibe ligação do aa-tRNA 30 S 
Cloranfenicol Inibe atividade de peptidil transferase 50 S 
Eritromicina Inibe translocação 50 S 
Puromicina Análogo de tRNA. Aborta síntese Sítio A 
Ácido fusídico Estabiliza EF-G pós translocação 50 S (60 S) 
Cicloheximida Inibe atividade de peptidil transferase 60 S 
Chave: age sobre procariontes, eucariontes ou ambos 
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A Puromicina mimetiza um 
tRNA 
Temos ainda algumas proteínas derivadas de 
organismos que inibem a processo de 
síntese proteica: 
    
   Toxina diftérica - ribosila eEF-2 (equivalente ao EF-G) 
 
 Ricina - rRNA glicosidase que remove a Adenina 4324 do 
rRNA 28S 
 
 Abrina– inibe a elongação 
  
 
https://en.wikipedia.org/?title=Ricin https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Abrus_precatorius_seeds.jpg