Coloração de Gram

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Coloração de Gram 
 
Primeiramente será necessário preparar um esfregaço em uma lâmina, com uma fina camada de 
bactérias fixadas, provenientes do material a ser analisado. 
A partir de colônias bacterianas 
1. Colocar uma gota de solução salina estéril na lâmina; 
2. Tocar a colônia bacteriana com uma alça e homogeneizar o material da alça na gota salina 
colocada na lâmina; 
3. Distender a suspensão bacteriana com movimentos elípticos até que esta forme um “filme” 
tênue e homogêneo (esfregaço); 
4. Deixar o esfregaço secar a temperatura ambiente; 
 
A partir de culturas em meio líquido 
1. Colocar uma “alçada” da cultura na lâmina; 
2. Distender a suspensão bacteriana com movimentos elípticos até que esta forme um “filme” 
tênue e homogêneo; 
3. Deixar o esfregaço secar a temperatura ambiente; 
 
Coloração 
1. Cobrir o esfregaço com cristal violeta por 1 minuto. 
2. Enxaguar em água corrente; 
3. Cobrir com lugol por 1 minuto; 
4. Enxaguar em água corrente; 
5. Descorar com solução de álcool-acetona por 30 segundos; 
6. Enxaguar em água corrente; 
7. Cobrir o esfregaço com fucsina por 30 segundos; 
8. Enxaguar em água corrente; 
9. Deixar secar à temperatura ambiente. 
 
 
Resultado e Interpretação 
 Bactérias Gram-positivas serão coradas pelo cristal violeta, ficando com a coloração 
azulada/roxa; 
 Bactérias Gram-negativas serão coradas pela fucsina, ficando com a coloração rosa. 
 
 
Bacilos Gram-negativos 
 
Cocos Gram-positivos