Análise bacterológica

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ANÁLISE BACTERIOLÓGICA 
ÁGUA 
Análise microbiológica da água 
 
 Investigar a presença de micro-organismos 
potencialmente patogênicos em concentrações 
que comprometam o uso da água para os fins a 
que se destina: 
 
Resolução CONAMA 20/86 – Tabelas para 
classificação de águas 
 
 
Consumo humano e animal 
 Recreação 
 Navegação 
 Irrigação 
 Paisagismo 
Micro-organismos patogênicos presentes 
na água 
 
Bactérias 
 
Salmonella spp. 
Vibrio cholerae 
Shigella spp. 
Yersinia enterocolitica: gastroenterite aguda 
Escherichia coli: linhagens patogênicas: enterites 
Clostridium perfringens: enterite, gangrena gasosa 
Vibrio parahaemolyticus: gastroenterites 
Pseudomonas aeruginosa: infecções nos olhos, ouvidos 
Staphylococcus aureus: infecções cutâneas, garganta e 
intoxicações alimentares 
O monitoramento de todos os microrganismos patogênicos 
é difícil e antieconômico: 
 
 - meios de cultura e metodologias diferentes 
 - dificuldade de analisar os resultados 
Microrganismos indicadores de qualidade 
da água 
Características de microrganismos 
indicadores 
Ocorrência e desaparecimento concomitante 
com patogênicos 
Densidade populacional diretamente 
relacionada com o grau de contaminação 
Maior sobrevida que a dos patogênicos 
Ausência em água potável 
Fácil detecção e recuperação laboratorial 
Não prejudicial à pessoas e animais 
Manipulação segura 
BACTÉRIAS DO GRUPO COLIFORME 
Coliformes totais e termotolerantes (E. 
coli) 
 
•Bacilos curtos 
•Gram – 
•Não esporulados, mesófilos, anaeróbios 
facultativons 
•Habitam o intestino do homem e outros animais de 
sangue quente 
•Fermentam a lactose (lac+) com produção de ácido 
e gás, dentro de 48 h a 37 ºC. 
 
Contaminação fecal 
 
Podem estar presentes nas fezes: 
 Bactérias patogênicas 
 
Enterococcus 
Salmonella 
Shigella 
Vibrio 
Contaminação fecal 
 
Coliformes totais 
 Escherichia coli 
 Enterobacter 
 Klebsiella 
 Citrobacter 
 
 
Coliformes termotolerantes 
 E. coli 
Presentes nas fezes 
e em outros habitas 
Presentes nas 
fezes 
COLIMETRIA - NMP - TESTE DOS 
TUBOS MÚLTIPLOS 
 
Fundamento: fermentação da lactose 
 
Presença de coliformes totais não indica 
necessariamente contaminação fecal ou 
ocorrência de enteropatógenos. 
 
COLETA DA ÁGUA 
 
 Frascos de vidro estéreis com inibidor de cloro 
 
 Flambar a torneira 
 
 Coletar em torno de 125mL de água. 
 
 Não encher o frasco até o gargalo, deixar cerca de 2 
centímetros para homogeneização da amostra. 
 
 Fechar o frasco imediatamente após a coleta: não tocar na 
parte interna da tampa e do frasco; não colocar a tampa no 
chão ou sobre outra superfície; não falar, tossir ou espirrar 
próximo ao frasco. 
 
 o prazo entre a coleta e o recebimento no laboratório deve 
ser de no máximo 24 horas, sob refrigeração. 
• Análise bacteriológica da água 
 
• teste presuntivo 
• teste confirmativo 
• teste completo 
 
10 ml por tubo 
0,1 ml por tubo 
1 ml por tubo 
incubação a 37 ºC/24-48 h: 
formação de gás: NMP 
Amostra de 
água 
 Técnica dos tubos múltiplos para determinação do Número Mais 
 Provável de coliformes 
Teste Presuntivo: 
caldo lauril triptose (caldo lactosado) 
Tubos com 
gás do teste 
anterior 
Tubos com 
caldo lactosado 
+ bile verde brilhante 
Incubação a 37 ºC/24-48 h 
Teste confirmativo: 
Tubos com gás Caldo EC 
do teste confirmativo incubação a 44,5 ºC 
Teste coliformes termotolerantes: 
Coliformes TERMOTOLERANTES fermentam a lactose a 44,5 ºC até 48 h 
 
Coliformes não fecais fermentam a lactose somente até 37 ºC 
Leitura e Interpretação 
 
Tabela de Hoskins 
TESTE COMPLETO 
 
TSA- coloração de Gram 
 
Fermentação lactose 
Identificação 
 
Meio seletivo e diferencial (EMB) 
 
Provas bioquímicas 
Teste da membrana filtrante: