trabalho microbiologia

Prévia do material em texto

UNIVERSIDADE FEDERAL DA AMAZONAS 
GRADUAÇÃO EM ENGENHARIA DE ALIMENTOS 
FCA02 
 
 
 
Microbiologia Geral 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Manaus – AM 
IV Relatório 
 
Observação de fungos filamentosos, leveduras e bolores 
Juliani Woitovicz Balbino Manthay 21350254 
 ENGENHARIA DE ALIMENTOS 
UNIVERSIDADE FEDERAL DA AMAZONAS 
GRADUAÇÃO EM ENGENHARIA DE ALIMENTOS 
FCA02 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Aluna: Juliani Woitovicz Balbino Manthay 21350254 
 
Manaus – AM 
 
Trabalho apresentado à Profa. 
ANTONIA QUEIROZ LIMA DE SOUZA 
para a obtenção de nota na disciplina 
de MICROBIOLOGIA GERAL do Curso de 
Engenharia de Alimentos. 
Sumário 
 
1. INTRODUÇÃO ....................................................................................................................... 3 
2. OBJETIVOS............................................................................................................................ 4 
3. MATERIAIS E MÉTODOS ..................................................................................................... 4 
4 – RESULTADOS ....................................................................................................................... 6 
5. CONCLUSÃO .......................................................................................................................... 9 
6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ........................................................................................... 9 
 
 
 
1. INTRODUÇÃO 
 
Os fungos são popularmente conhecidos por bolores, mofos, fermentos, levedos, 
orelhas-de-pau, trufas e cogumelos-de-chapéu. 
Os bolores ou mofos apresentam estruturas morfológicas típicas que permitem 
diferenciá-los dos outros seres vivos. Eles crescem sobre substratos simples e em meios 
usualmente acidificados, com pH ajustado para 3,5. 
É comum observá-los crescendo sobre substratos sólidos como em certos alimentos 
como pães, frutas cítricas, apresentando o aspecto aveludado, cotonoso (similar a 
algodão) e coloridos como o Aspergillus niger (negro), Penicilium notatum (branco), 
Cladosporium (azuis), etc. 
A identificação dos fungos é, em grande parte, baseada em sua morfologia. Para estudar 
os fungos verifica-se aspectos da morfologia macroscópica, como colônias filamentosas, 
cremosas, cotonosas, pulverulentas, etc.; características do verso e reverso das mesmas, 
formação de pigmentos, como também da morfologia microscópica. 
Portanto, a unidade estrutural dos fungos é representada pela hifa e o conjunto desses 
elementos é denominado micélio. O micélio vegetativo exerce as funções de 
assimilação dos nutrientes e fixação dos fungos em substratos, podendo se diferenciar 
em estruturas de frutificação, que realizam a função reprodutiva dos fungos. Esse 
último é também conhecido como micélio reprodutivo ou corpo de frutificação. 
O micélio de frutificação ou Encarpio realiza as funções de preservação e disseminação 
da espécie através da formação de células especiais chamadas de esporos. Esses esporos 
podem ser hialinos, pigmentados, simples, septados, apresentando várias formas que, 
muitas vezes, caracterizam gêneros e espécies de fungos. 
 Os esporos, de acordo com a origem, podem ser assexuados ou sexuados e tanto um 
como outro podem estar contidos ou não no interior de determinadas estruturas. 
Há os fungos que se apresentam ora como filamentosos ora como leveduriforme. Esses 
fungos são chamados de Dimórficos. Esta característica está relacionada com o 
ambiente em que se desenvolve o fungo. 
As leved
alongada ou esférica. As leveduras não possuem flagelos, sendo portanto, imóveis. Em 
agar Sabourand formam colônias lisas, brilhantes e, usualmente cremosas e 
pigmentadas. Os pigmentos formados não se difundem para o meio de cultura. 
Os bolores são organismos multicelulares, que apresentam-se filamentosos sob o exame 
a fresco com baixa ampliação. Ao exame macroscópico apresentam crescimento 
característico com aspecto aveludado ou cotonoso (algodão) ou como borra de café 
(Aspergillus nigers). 
2. OBJETIVOS 
 
- Observar fungos filamentosos, leveduras e bolores através de exames a fresco com 
suspensão do material biológico entre laminas e lamínulas e entre laminas e durex: 
- Observar as características dos fungos por micro cultivo; 
 
3. MATERIAIS E MÉTODOS 
3.1- Materiais 
 
 Alça de platina; 
 Fita durex; 
 Isqueiro 
 Lâminas estéreis (duas); 
 Lâminulas estéreis (quatro); 
 Lamparina de álcool; 
 Papel toalha; 
 Papel filme; 
 Papel Kraft; 
 Placa de Petri estéreis (uma) 
 Pincel marcador; 
 Tesoura; 
 
3.2- Reagentes 
 
 Alcool 95%; 
 Corante lactofenol (blue cotton); 
 Etenol 75%; 
 Meio de cultura Sabouroud; 
 Pisset com água destilada; 
 
3.3- Equipamentos 
 Autoclave; 
 Microscópio Óptico; 
 
 
 
3.4- Procedimento experimental 
O procedimento foi dividido em 3 etapas: 
 Preparação do meio de cultura; 
 Preparação das laminas e do micro cultivo; 
 Visualização das colônias nas placas e no microscópio; 
 
1º etapa: Preparação do meio de cultura 
 
- Foram separadas as placas de Petri que seriam utilizadas durante o procedimento, lavadas 
e enxaguadas com água destilada, foram distribuídas sobre folhas de papel toalha até sua 
completa secagem. 
- Cada equipe embrulhou 4 placas de Petri em papel kraft; 
- Foram separadas e limpas laminas e lamínulas que foram colocadas em álcool para 
esterilização. 
- Foi preparado 100ml de meio Sabourald, em água morna até completa dissolução e 
transferida para garrafa limpa e com tampa; 
- Os materiais foram colocados na auto clave a 1 atm durante 15 minutos para meio de 
cultura e a 121ºc, por 1 hora para os demais materiais; 
- No dia seguinte o meio foi aquecido para que ficasse mais fluídico e invertido nas placas 
de Petri, e guardadas. 
 
2º etapa: Preparação das laminas e do micro cultivo 
 
- Na aula seguinte foram levados alimentos com fungos: 
- Manteiga, pães e uma berinjela. 
- Nesse procedimento foi feita a separação dos materiais a ser utilizados, limpeza da bancada 
com álcool 70% e assepsia das mãos. 
- Foram separadas duas lâminas próximo a lamparina com álcool: 
- Flambou se a alça de platina, resfriou-se e foi colocado em um béquer com álcool comercial, e 
procedimento foi realizado próximo a chama da lamparina. 
- Na primeira lamina, colocou-se uma gota de corante de lactofenol a 1/3 da lamina e com um 
pedaço de fita durex e foi encostado por cima de uma colônia de fungos na manteiga e aderiu 
se sobre o corante na lâmina. 
- Na segunda lamina, colocou-se uma gota de lactofenol a 1/3 da lamina e com a alça de platina 
fez se um esfregaço sobre o pão fungado e colocado na lâmina com movimentos circulares e 
sobre a lâmina aderiu-se uma lamínula em um ângulo de 45º. 
- Foi aberta a placa de petri próxima a chama e retirou-se o inoculo, foram colocados 
com o auxílio do da alça de platina foram realizados 3 esfregaços em formato de 
triangulo a 1 cm de distância; 
- As placas de Petri foram fechadas e flambadas na lamparina e fecharam as laterais com 
papel filme para guardar e esperar o crescimento por uma semana. 
3º etapa: Visualização das colônias nas placas e no microscópio 
- Após uma semana de esporulação, foi retirado o envolto o de papel filme e com auxílio 
de uma pinça foi retirado a lamínula cuidadosamente com as hifas e esporos de fungos 
que nelas estavamaderidas. 
- Em uma nova lamina esterilizada foi pingado uma gota do corante lactofenol e por 
cima foi colocado a lamínula. 
- Foi visualizado como auxilio do microscópio opitico com objetiva de 40x , a cor ,o tipo 
e disposição e formações de esporos. 
4 – RESULTADOS 
 
 Após o crescimento por uma semana, foi possível visualizar o crescimento de fungos 
com suas ninfas, afim de visualizar o micélio vegetativo e reprodutor de um fungo 
filamentoso, como também as características da célula vegetativa e reprodução por 
brotamento de leveduras. 
Os fungos imperfeitos ou deuteromicetos assumem importância diferenciada, pois 
apresentam micélio septado e reprodução exclusivamente assexuada com esporos 
exógenos formados em conidióforos. A identificação de gêneros e espécies está 
vinculada a coloração do micélio, além da forma, cor e disposição dos conídios (BORZANI 
et al., 2001) 
Na coloração com lactofenol azul cotton é possível observar que existem dois tipos 
morfológicos de fungos: as leveduras e os filamentos(bolores ou micélios)as leveduras 
são unicelulares e podem ter diferentes formatos (oval,circular,naveta, etc.) e se 
reproduzem por brotamento (únicos ou múltiplos) ou por fissão (mais raro). 
 
Visualização da lamina 
 
Visualizando a lamina, foram visualizadas as estruturas do fungo filamentosos e 
leveduras, da lamina de com laminula. 
Da lamina com fita durex não foi possível visualizar nada pelo microscópio, a amostra 
não foi o suficiente, não há imagens, mas posso descrever que foi possível da lamina 
com laminula ver as hifas septadas e o cornídeo do Penicilium, o fungo comum no pão. 
 
Nas placas foi possível visualizar fusarium- conídios , do grupo das dermateaceas. 
 
 
Visualização da amostra 
Os conidíos fusiformes são produzidos em esporodóquios, (tuberculariceae). 
 As caracteristicas culturais, pigmentação em diversos meios de cultura, produção de 
tóxinas e virulência do patógeno são impotantes critérios de indentificação deste 
gênero. Mutações no gênero Fusarium são muito frequentes em condições naturais e 
artificiais, por esta razão as caracteristicas do tipo esporodóquio(fig.E) são perdidas em 
tais condições (mutações).Correspondem as formas perfeitas dos gêneros de 
ascomycetes : Nectria; Calomectria; Gibberella,etc. (Urben, et al., 2009) 
 
 
Apresenta micélio aeréo filamentoso, denso e cotonoso, formado de hifas ramificadas, 
septadas; dois tipos de conídios; macro e microconideos e estruturas assexuadasde resistências; 
clamidósporos.Quando presentes os clamidósporos podem ser terminais, intercalados, isolados 
ou em cadeias . 
 
5. CONCLUSÃO 
 
Assim os objetivos dos experimentos, foram concluídos, e foi possível visualizar o Penicillium, 
encontrado na lamina com laminula feita apartir da amostra de fungos retirados do pão, foi 
observado sua estrutura : hifas septadas,conideos, hifas vegetaivas e micélio. 
E também foi visualizada na placa de petri com amostra de berinjela o fungo Fusarium Conidios 
o resultado desta germinação é a formação de um ou mais filamentos finos, conhecidos como 
tubos germinativos. Estes tubos se ramificam em todos os sentidos formando uma massa 
filamentosa, chamada micélios, que constitui o sistema vegetativo, responsável pelo 
desenvolvimento fungico e pela absorção dos alimentos. Os filamentos simples ou ramificados 
que formam os micélios denominadas hifas. Na maioria dos casos, o sistema vegetativo 
encontra-se no interior dos tecidos parasitados, no solo ou na matéria orgânica em 
decomposição. 
Muitas espécies produzem metabolitos que são fontes importantes de drogas 
farmacologicamente activas. Particularmente importantes são os antibióticos, incluindo as 
penicilinas, um grupo estruturalmente relacionado de antibióticos betalactâmicos sintetizados 
a partir de pequenos péptidos. 
A levedura de padeiro ou Saccharomyces cerevisiae, um fungo unicelular, é usado para fazer pão 
e outros produtos à base de trigo.168 Espécies de leveduras do género Saccharomyces são 
também usadas na produção de bebidas alcoólicas por fermentação.O bolor shoyu koji 
(Aspergillus oryzae) é um ingrediente essencial na preparação de shoyu (molho de soja), saqué, 
e miso,enquanto espécies de Rhizopus são usadas para fazer tempeiros. Vários destes fungos 
são espécies domesticadas que foram selecionadas segundo a sua capacidade de fermentar 
alimentos sem produzirem micotoxinas prejudiciais, as quais são produzidas pelos muito 
aparentados Aspergillus. 
Assim concluo que os fungos são de grande importância econômica. 
 
6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 
 
 
TORTORA,G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, C.L. Microbiologia. 8° edição, 2005, Editora 
Artmed, Porto Alegre, RS 
BORZANI, W. et al. (Coords.). Biotecnologia industrial: fundamentos. São Paulo: E. 
Blücher, 2001. v.1.