Relatório de Bioquímica Hemoglobina Glicada

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Relatório de Bioquímica
Nomes: Jenifer Fallavena, Mayara Borba, Micheli Leite
PRINCÍPIO :
Hemoglobina glicada (HbA1) é a porção de hemoglobina que flui primeiramente em cromatografia de coluna. A porção restante, representando a maior parte da hemoglobina, é chamada HbAo. Mistura-se sangue total à solução hemolisante contendo íons borato e assim, paralelamente à hemólise total, elimina-se a fração lábil pré- A1c. Em seguida, transfere-se uma parte do hemolisado para o tubo com resina catiônica e, através de movimentos basculantes lentos, a HbAo liga-se à resina. Em solução, resta HbA1 ou hemoglobina glicada (cromatografia batch contact). A percentagem de HbA1 em relação à hemoglobina total é calculada, posteriormente, por espectrofotometria. 
Materiais utilizados:
	
	-Agitador tipo Vortex
	-Água Destilada
	-Banho Maria Hemostático
	-Becker de 50 mL
	-Espectrofotômetro UV
	-Estante para tubo de Ensaio
	-Frasco Lavador com Água Destilada
	-Micropipetas de 10 até 100 microlitros
-Ponteiras para miropipetas de 10 até 100 microlitros
 
Procedimento:
-500 µL de hemolizante (nos 3 tubos)
-100 µL de hemoglobina glicada (Tubo padrão)
-100 µL de sangue na amostra I (Tudo 2)
-100 µL de outro sangue na amostra II (Tubo 3)
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Hemoglobina glicada 
Deixar descansar por 3 minutos, após adicionar 20 µL na resina (Outros 3 tubos). Inserir o agitador e homogeneizar por 6 minutos. 
Baixar o agitador, teremos a amostra precisa. 
Calculo HbT (Hemoglobina Total)
Pipetar 5 mL de agua destilada, 20 µL de hemolizante. 
Valor Espectrofotômetro 
(Glicosada)
Padrão: 0,402
Amostra 5,0: 0,283
Amostra 5,9: 0,456
(Total)
Padrão: 0,138
Amostra 5,0: 0,177
Amostra 5,9: 0,215
Resultados:
Cálculos:
Fator (F) = absorbância HbT (padrão) X % HbA1 (padrão)
	 Absorbância HbA1 (6,1 %)
 X 6,1 = 2,09
A percentagem de HbA1 padrão está impressa no rótulo do frasco do padrão.
Para calcular a %HbA1:
%HbA1(amostra) = absorbância HbA1 X fator
		 absorbância HbT
A= X 2,09 = 3,34 % (5,0)
A= X 2,09 = 4,43 % (5,9)
Foi possível a realização de técnicas bastante comuns em laboratórios clínicos, e visualizar a simplicidade dessas, podendo-se compreender cada procedimento realizado, e discutir sobre potenciais fatores de erro. 
Tendo-se conhecimento disto pode-se afirmar que a prática serviu no intuito de ensinar a respeito das manipulações de amostras em laboratórios clínicos, de maneira à auxiliar em futuros ensaios.