Sintese de proteínas

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Várias moléculas de tRNAs foram isolados de 
procariotos e eucariotos todos apresentando 
uma estrutura de folha de trevo, que é mantida
por meio de pareamento entre seqüências comple-
mentares na molécula de tRNA.
 
Os tRNAs são denominados em função do 
aminoácido que prepresenta. 
 
Ex: o tRNA com o anticódon da metionina é 
chamado de tRNAMet
Síntese de Proteínas
O tRNA que está ligado ao seu aminoácido, é denominado de aminoacil-tRNA ( por exemplo Met-tRNA)
 
Existem duas propriedades, extremamente importante, presente em todos os tRNAs 
 
são capazes de representar somente um aminoácido, ligando-se covalentemente a ele;
contêm uma seqüência de 3 nucleotídeos, o anticódon, que é complementar ao códon do mRNA e que representa o aminoácido.
 
Aminoacil_tRNA sintetase
 
O processo de ligação do aminoácido com o tRNA é realizado por um grupo de enzimas denominadas de aminoacil-tRNA sintetases. Essa enzima possui uma função de correção de erro para evitar a incorporação de um aminoácido incorreto ao tRNA.
 
Reação de ativação dos aminoácidos - 1º passo
 
ATP + aa  aminoacil – AMP + PPi
 
2º passo
 
aminoacil – AMP + tRNA  aminoacil – tRNA + AMP
  
obs: aminoacil-tRNA = aa-tRNA
 
EX:
ATP + ile  isoleucil– AMP + PPi
 
isoleucil – AMP + tRNAile  isoleucil – tRNA + AMP -  
Enzima - isoleucil-tRNA sintetases
Estrutura do Ribossomos
 
Os ribossomos são estruturas compactas de ribonucleoproteínas, consistindo em duas subunidades. Cada subunidade é formada por proteínas associadas a moléculas de RNA ribossomico (rRNA).
O ribossomo completo de E.coli tem uem um coeficiente de sedimentação de 70S e apresenta uma estrutura assimétrica , sendo composto por uma região basal e de outra contendo a cabeça ou protuberância. 
Na subunidade 30S - As proteínas que compõem essa subunidade recebem a denominação de S1 a S21 
Na subunidade 50S - As proteínas que compõem essa subunidade recebem a denominação de L1 a L34
Cada subunidade do ribossomo possui vários sítios ativos, sendo o A e P os que estão inicialmente relacionados com a síntese de proteínas.
 
Sítio A – liga preferencialmente ao aminoacil-tRNA e localiza-se a subunidade 50S.
 
Sítio P – liga tanto ao fMet-tRNA como ao peptidil-tRNA e localiza-se na subunidade 30S.
 
Sítio E – é o sítio de saída das novas proteínas sintetizadas no ribossomo. Localiza-se distante do sítio A e P.
Iniciação:
-ligação da subunidade 30S no sítio RBS (sítio de ligação dos ribossomos)
-O códon de iniciação AUG se posiciona no sítio P do ribossomo
-A ligação da subunidade 30S com o mRNA e o tRNA iniciador necessita de proteínas auxiliares denominadas de IF (fatores de iniciação)
-O tRNA fMET (tRNA iniciador) ao complexo de iniciação. – formação da ligação códon-anticódon do tRNAi no sítio P.
-Formação do ribossomo completo pela adição da subunidade 50S
-No sítio A está o codón do para o aminoácido seguinte da cadeia polipeptídica.
Etapas da Síntese de Proteínas
Durante a síntese de proteína, os ribossomos deslocam-se ao longo do mRNA no sentido 5’ 3’, sintetizando a proteína no sentido amino-terminal para carboxi-terminal.
Alongamento e translocação
-Para o alongamento da cadeia polipeptídica é necessário a participação de proteínas chamadas de fatores de alongamento (EF-TU)
2- Os alongamentos da cadeia inclui todos os processos desde a inclusão dos primeiros nucleotídios até a ligação do último aminoácido do peptídio. Os aminoácidos são adicionados isoladamente 
-Os aminoacil-tRNAs são adicionados no sítio A e o peptídeo está localizado no sítio P. No crescimento da cadeia qualquer aminoacil-tRNA pode ser adicionado com exceção do fMET.
-Durante o processo de síntese da cadeia polipeptídica, o ribossomo permanece parado, permitindo que o peptídio já formado, ligado ao tRNA e localizado no sítio P, seja transferido para o aminoacil-tRNA no sítio ª A enzima responsável pela ligação peptídica é a peptidil-transferase.
-Após a formação da ligação peptídica ocorre o processo de translocação, avançando 3 nucleotídio no mRNA.
-o tRNA sem o aminoácido é liberado do sítio A
-o peptidil tRNA move-se do sítio P para o sítio A
-uma nova trinca é exposta no sítio A