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•1 HEMATOLOGIA Prof. Eli Meneses CITOLOGIA HEMATOLÓGICA Série Branca LEUCOGRAMA •CONTAGEM GLOBAL DOS LEUCÓCITOS (LEUCOMETRIA GLOBAL= mm3 ) •CONTAGEM DIFERENCIAL DOS LEUCÓCITOS (RELATIVA %) e (ABSOLUTA mm3) •AVALIAÇÃO DA FORMA E INCLUSÕES DOS LEUCÓCITOS Composição e unidades adotadas Escala Maturativa dos Neutrófilos Mieloblasto Bastonete Metamielócito Mielócito Segmentado Promielócito •May-Grünwald - Giemsa •Leishmann •Wright •Panótico rápido COLORAÇÃO Avaliação de uma coloração satisfatória •Eritrócito : Salmão ou levemente rosado •Plaquetas : Azuladas e os grânulos púrpura •Eosinófilos : Grânulos (laranja vivo) •Monócitos : Citoplasma cinza-azulado e grânulos citoplasmático finos na cor vermelho púrpura suave Eritrócitos : Salmão ou levemente rosado •2 Plaquetas: azuladas e os grânulos púrpura Eosinófilos : Grânulos (laranja-avermelhado) Monócitos : Citoplasma cinza-azulado e grânulos citoplasmáticos finos na cor vermelho púrpura suave DISTENSÃO SATISFATÓRIA Comentário: Deve apresentar cabeça, corpo e bordas bem definidas Métodos de Contagem Comentário : células de maior densidade localizam-se nas bordas Métodos de Contagem Comentário : compensa o método anterior mas não uma distribuição das células mais de um lado do que do outro •3 Métodos de Contagem Comentário : obrigatoriamente deve-se chegar até a outra borda; caso a contagem termine antes de se chegar ao outro lado deve-se contar mais 100 ou 200 células até que se chegue a outra borda. Quanto mais células forem contadas menor o erro e mais próximo da realidade do paciente Contagem Diferencial Cabeça da distensão x ÁREA ÚTIL DA DISTENSÃO Não há sobreposição eritrocitária e nem condensação dos leucócitos cabeça cauda área ideal ÁREA ÚTIL DA DIFERENCIAL x x Exposição excessiva ao EDTA Comentário: Eritrócitos com crenação (equinocitose) e degeneração neutrofílica Comentário: A agregação plaquetária pode ser motivo de falsa plaquetopenia •4 Comentário: As plaquetas devem estar distribuídas unformemente ( c/ EDTA) ou pouco agregadas (s/ EDTA) Satelitismo plaquetário: fenômeno raro “in vitro, “ ocorre em alguns pacientes em exposição do sangue ao EDTA. Motivo de falsa plaquetopenia. Comentário: deve-se colher o sangue com o anticoagulante citrato para uma contagem de plaquetas mais acurada Comentário: inicialmente deve-se analisar a distribuição celular, se o número celular está aumentado ou diminuído, qual o tipo celular predominante, formas normais e imaturas, alterações morfológicas e inclusões, e então realizar a contagem diferencial Visão Citológica Analítica Neutrófilos Teste o saber Linfócitos Eosinófilos Basófilos Monócitos Sumário Neutrófilos Gênese Desvio à esquerda Hipersegmentação Alterações tóxico degenerativa Anomalias congênitas Outros achados •5 Gênese do Neutrófilo MIELOBLASTO PROMIELÓCITO MIELÓCITO METAMIELÓCITO BASTONETE SEGMENTADO Medula Óssea Sangue periférico Compartimento proliferativo Compartimento de reserva MIELOBLASTO •Forma e núcleo redondo ou ovalado •Relação núcleo-citoplasma elevada •Citoplasma escasso e basófilo (discreto a moderado) •Cromatina delicada com um ou mais nucléolos Escala Maturativa dos Granulócitos Mieloblasto Promielócito Mielócito Metamielócito Bastonete Segmentado •Célula redonda ou ovalada •Relação núcleo-citoplasma menor •Citoplasma basófilo •Núcleo oval com indentação em uma das faces •Nucléolos são evidentes •Grânulos primários circundam a zona de Golgi Promielócito •Mieloblasto •Promielócito •Mielócito •Metamielócito •Bastonete •Segmentado Escala maturativa dos granulócitos Comentário: Promielócitos hipogranulares na LMA •6 •Célula redonda com núcleo redondo ou oval •Núcleo com cromatina condensada •Nucléolos não são visíveis •Citoplasma acidófilo com pouca basofilia residual •Granulações específica de cada linhagem MIELÓCITO Mieloblasto Promielócito Mielócito Metamielócito Bastonete Segmentado Escala Maturativa Mielócito Eosinófilo Mielócito Basófilo •Célula redonda com núcleo reniforme. •Cromatina grosseira e os nucléolos não são visíveis. •Citoplasma acidófilo com granulações específicas. METAMIELÓCITO Mieloblasto Promielócito Mielocito Metamielócito Bastonete Segmentado Escala Maturativa dos Neutrófilos •7 •Núcleo em ferradura ou bastão. •Cromatina grosseira. •Citoplasma acidófilo com granulações específicas. BASTONETE Mieloblasto Promielócito Mielócito Metamielócito Bastonete Segmentado Escala Maturativa dos Neutrófilos Bastonete Neutrófilo Bastonete Neutrófilo •8 •Também denominado de polimorfonuclear. •Núcleo segmentado em lóbulos 2 a 5 (normalmente 3). •Citoplasma semelhante ao do bastonete. •Nucléolos não são visíveis. SEGMENTADO Mieloblasto Promielócito Mielócito Metamielócito Bastonete Segmentado Escala Maturativa dos Neutrófilos Desvio Nuclear à Esquerda É o aumento escalonado (principalmente) do número de formas jovens dos granulócitos na circulação Indica aumento na mobilização das reservas medulares ...METAMIELÓCITOS BASTONETES SEGMENTADOS Prováveis causas: Infecções agudas, gravidez, hipóxia, choque, hemorragias, toxemias Segmentado e Bastonete Comentário I : inicialmente num processo infeccioso após o consumo dos neutrófilos do sangue periférico são liberados os bastonetes do pool de reserva medular •9 Comentário II : a presença de bastonetes pode permanecer, pode evoluir para um quadro de reação leucemóide, para uma neutropenia ou ser revertido para o quadro inicial HIPERSEGMENTAÇÃO É o aumento do número de formas polissegmentadas dos neutrófilos na circulação. Na prática é considerado quando a incidência de elementos penta lobulados ou mais ultrapassa a 5%. Principais causas: Anemia por deficiência de vitamina B12 e/ou ácido fólico, doenças crônicas (fígado e rins), alcoólicos, gestantes e quimioterapia. •10 •São corpúsculos de inclusão de coloração azul pálido, semelhante a cistos, geralmente localizados no citoplasma, muitas vezes fazendo saliência no contorno celular. •Trata-se de acúmulo anormal de ribossomo. •Foi descrito originariamente na escarlatina. •É melhor evidenciado em lâminas sem anticoagulante. Prováveis causas: Infecções (pneumonias), traumas, queimaduras, câncer e gravidez. Corpúsculo de Döhle •Refletem principalmente resíduos de digestão bacteriana. •É um indicativo de que a bactéria esta circulando pelo sangue como na bacteremia ou septicemia. •Só tem valor em lâminas sem anticoagulante ou recentemente preparadas de amostras com EDTA. Prováveis causas: Infecções graves, septicemias, intoxicações. VACUOLIZAÇÃO CITOPLASMÁTICA •11 Comentário: a anomalia afeta também os outros granulócitos Eosinófilos Gênese Citologia GÊNESE DOS EOSINÓFILOS Stem-cells UFC-GEMM UFC-G Mieloblasto Promielócito Mielócito Eosinófilo Metamielócito Eosinófilo Bastonete Eosinófilo Eosinófilo •Diferenciação e maturação é similar à dos neutrófilos. •A constituição dos grânulos além de próxima com os neutrófilos ainda possuem proteínas básicas que são as responsáveis pela afinidade pela eosina. •É ligeiramente maior que o neutrófilo. •Núcleoé usualmente bilobulado, mas pode ser trilobulado. •Grânulos citoplasmáticos são esféricos e coram-se de laranja-avermelhado. EOSINÓFILO •12 Comentário: os eosinófilos residem preferencialmente na pele, pulmões e trato gastrointestinal o que os torna uma marcador de processos alérgicos e de parasitose intestinal principalmente de helmintos Comentário: como é a partir de mielócito que são produzidas as granulações específicas, então é a partir desta fase que a célula é reconhecida como da linhagem eosinofílica. O eosinófilo morfológicamente é maior que o neutrófilo Basófilos Gênese Citologia GÊNESE DOS BASÓFILOS Stem-cells UFC-GEMM UFC-G Mieloblasto Promielócito Mielócito Basófilo Metamielócito Basófilo Bastonete Basófilo Basófilo •Diferenciação e maturação é similar à dos neutrófilos e eosinófilos. •Os grânulos tem afinidade por corantes básicos, são quase negros (metacromáticos) dispersos por sobre a célula e são hidrossolúveis. •Tamanho semelhante ao do neutrófilo. •Núcleo usualmente obscurecido pelo grânulos preto-purpúreos. •Grânulos podem estar reduzido nas síndromes mielodisplásicas, mieloproliferativas, nas reações alérgicas e artefatual. BASÓFILO •13 Comentário: como é a partir de mielócito que são produzidas as granulações específicas, então é a partir desta fase que a célula é reconhecida como da linhagem basofílica. Comentário : Histamina e outras substâncias são liberadas dos grânulos num processo chamado de degranulação. A degranulação provoca aumento da permeabilidade vascular e liberação de fatores quimiotáticos para neutrófilos e eosinófilos Monócitos Generalidades Gênese Citologia MONÓCITOS •Monócitos e os neutrófilos tem a mesma formação baseada na atuação fagocitária. •É o precursor do macrófago. •Participa da regulação da resposta imune. GENERALIDADES GÊNESE DOS MONÓCITOS Stem-cells UFC-GEMM UFC-M Monoblasto Promonócito Monócito Macrófago (Tecidos) •São necessários +/- 5 dias para evolução de monoblasto a monócito circulante. •Não existem reservas medulares de monócitos. •Circulam na corrente sangüínea +/- 12 horas. •Nos tecidos onde diferenciam em macrófagos vivem durante semanas a meses. •É a maior célula normal do sangue periférico •Núcleo com cromatina delicada e os nucléolos não são visíveis •Núcleo é irregular e freqüentemente lobulado •Citoplasma cinza-azulado opaco, com grânulos azurófilos finos •O contorno celular é irregular e o citoplasma pode ser vacuolizado MONÓCITO •14 Comentário: Fagocitam e digerem praticamente todos os agentes infecciosos. Sucedem os neutrófilos removendo resíduos celulares, piócitos e eventuais bactérias. Secretam várias substâncias biologicamente ativas e participam da regulação da resposta imune. Linfócitos Generalidades Linfócitos pequenos Linfócitos médios e grandes Linfócitos Reacionais Plasmócitos Inclusões LINFÓCITOS Morfologicamente não se consegue definir qual a classe linfocitária, mas estudos mostram existência de três populações: •LinfócitoT= Origem medular e marcação no timo, está envolvido nos processos de imunidade celular e na regulação da síntese de anticorpos •Linfócito B= Origem medular está envolvido nos processos de imunidade humoral. É o precursor do plasmócito, a principal célula formadora de anticorpos do organismo •Célula NK= Célula não T e não B, são os grandes linfócitos granulares no sangue circulante; destroem células (principalmente as tumorais) e infecctadas por vírus RESUMO DAS FUNÇÕES BÁSICAS DOS LINFÓCITOS AÇÃO CITOTÓXICA (T CD8) AÇÃO AUXILIAR (T CD4) PRODUÇÃO DE ANTICORPOS ESPECÍFICOS (B ATIVADO) AÇÃO DESTRUIDORA (NK) Linfócitos T Linfócitos B Célula NK CÉLULAS DE MEMÓRIA (T e B) •15 •Predominam em um individuo adulto sadio •Citoplasma escasso e ligeiramente basófilo. •Núcleo redondo com cromatina condensada. •Nucléolos não são visíveis. LINFÓCITOS PEQUENOS •Constituem em torno de 10 % dos linfócitos circulantes •Citoplasma mais abundante •Contorno celular é um tanto irregular •Citoplasma levemente basófilo •Podem apresentar grânulos azurófilos •Cromatina nuclear é menos condensada e no linfócito grande o nucléolo pode ser discernido LINFÓCITOS MÉDIOS E GRANDES Linfócitos Médios Linfócitos Grandes Linfócitos Granulares •16 BASÓFILOS LINFÓCITO, MONÓCITO e SEGMENTADO SEGMENTADO, LINFÓCITO e EOSINÓFILO NEUTRÓFILO HIPERSEGMENTADO
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