Aula 06_ Bandeamento

Esta é uma pré-visualização de arquivo. Entre para ver o arquivo original

*
*
FACULDADE INTEGRADA DE PERNAMBUCO- FACIPE 
Professora: Fabiana Gomes
Disciplina: Genética
Curso: Graduação em Biomedicina
*
*
O genoma humano, na sua forma diplóide, consiste em aproximadamente 6 a 7 milhões de pares de bases de DNA organizados linearmente em 23 pares de cromossomos.
Genes controlam todos os aspectos da embriogênese, desenvolvimento, crescimento, reprodução e metabolismo, todos os aspectos do que faz o ser humano um organismo funcionante.
A caracterização e conhecimento dos genes e sua organização no genoma têm um impacto enorme na compreensão dos processos fisiológicos do organismo humano na saúde e na doença e, por conseguinte, na prática da medicina em geral.
*
*
Durante o ciclo celular, os cromossomos passam por estágios ordenados de condensação e descondensação.
Quando condensado ao máximo, o DNA dos cromossomos mede cerca de 1/10.000 do seu comprimento natural.
Quando as células completam a mitose ou meiose, os cromossomos se descondensam e retornam ao seu estado relaxado como cromatina no núcleo em interfase, prontos para recomeçar o ciclo.
*
*
Os cromossomos não se apresentam uniforme ao longo de todo o seu comprimento;
Uma vez que possuem uma contrição primária, o centrômero, que divide o cromossomo em dois braços (braço curto – p; braço longo – q) e podem apresentar constrições secundárias.
Além dessas diferenças, cada cromossomo apresenta um padrão característico de bandas.
*
*
*
*
*
Os métodos de coloração originalmente disponíveis não permitiam a identificação dos 24 tipos de cromossomo. 
Bandeamento
Vários métodos de bandeamento são empregados rotineiramente nos laboratórios de citogenética para identificação dos cromossomos e análise da estrutura cromossômica.
*
*
*
Uma das principais aplicações do bandeamento cromossômico é a identificação de cromossomopatias, que são definidas como quaisquer síndromes causadas por anomalias cromossômicas.
 O estudo sistemático das cromossomopatias revelou que no caso das aberrações autossômicas, todas as alterações numéricas e estruturais, não importa qual o autossomo afetado, estão fortemente associadas a retardamento neuropsicomotor, anomalias esqueléticas e cardiopatias congênitas. 
 Os sinais mais frequentes são: deficiência mental, peso corporal baixo ao nascer, retardamento no desenvolvimento físico, tônus muscular alterado e diminuição dos reflexos.
 
*
*
*
*
Regiões Eucromáticas: A diferenciação longitudinal dos cromossomos através de bandas transversais permite sua identificação
Bandeamento G
Tratados com Tripsina (desnaturar as proteínas) e em seguida corados com Giemsa; Cada par de cromossomos cora-se num padrão típico de bandas claras e escuras.
É a coloração mais empregada (rotina)
A identificação do cariótipo em casos de malformação, problemas reprodutivos, onco hematologia. 
*
*
Bandeamento Q
Fluorocromos (quinacrina ou compostos semelhantes) e em seguida examinados por microscopia de fluorescência.
Os cromossomos coram-se num padrão específico de bandas brilhantes (positiva) e opacas (negativa).
Temporária podendo ser coradas novamente
Podem ser utilizadas quando existe a necessidade de se identificar regiões específicas do DNA.
*
*
Bandeamento R (reverso)
 Acridina Orange ou Chromomycin A3 ou Giemsa; Pré-tratamento em calor (80-90o) com solução alcalina;
Bandas positivas (verde) negativas (vermelhas)
Análise das regiões terminais (deleções e translocações)
Podem ser utilizadas quando existe a necessidade de se identificar regiões específicas do DNA.
*
*
Bandeamento C
 Coloração com nitrato de prata 
 Envolve a coloração da região centrômérica de cada cromossomo e outras regiões que contenham heterocromatina. 
 Cromossomo Y - região distal do braço longo
 Podem ser utilizadas quando existe a necessidade de se identificar regiões específicas do DNA.
*
*
Bandeamento C
*
*
Hibridização in situ Fluorescente (FISH)
Detecta sequências específicas de ácidos nucléicos, como regiões de microdeleções e rearranjos cromossomais. 
Essa técnica pode ser usada para estudar os cromossomos de células em metáfase, mas seu principal uso é nas células em intérfase, quando anormalidades numéricas e algumas estruturais podem ser detectadas.
Iodeto de propidio e DAPI
*
*
*
*
*
*
*