Teste qualitativo para as proteínas e seus derivados.

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CENTRO UNIVERSITÁRIO CAMPOS DE ANDRADE - UNIANDRADE
Teste qualitativo para as proteínas e seus derivados.
Relatório Nº 2, submetido às avaliações bimestrais da disciplina de Bioquímica Geral do curso de Biomedicina.
Amanda Mantovani n° 03;
Bianka Dewes Steffen n°06;
Eliton Migacz Pietczak n°14;
Prof.ª Neuza Maria Ferraz de Mello
Gonçalves
CURITIBA
2015
1 INTRODUÇÃO
Proteínas são extremamente importantes ao organismo dos animais. Estas são macromoléculas formadas por aminoácidos e entre suas principais funções está a construção e reparação de tecidos entre outras tantas funções.
No seguinte trabalho serão apresentadas as reações de precipitação de proteínas e também reações de coloração de proteínas além de se explicitar a diferença entre aminoácidos e proteínas.
2 OBJETIVOS
2.1 Avaliar as reações positivas para as reações de precipitação;
2.2 Verificar as reações positivas para as reações de coloração;
2.3 Caracterizar a estrutura molecular da presente amostra.
3 MATERIAIS E MÉTODOS
3.1 Material
3.1.1 Equipamentos
Banho-Maria, banho-fervente, potenciômetro, capela.
3.1.2 Reativos
	Caseína 2% em álcool neutralizado com indicador vermelho de fenol;
	Albumina de ovo a 2% em água destilada (mínimo de espuma);
	Gelatina a 2% em água quente;
	Alfa-tirosina a 5% em água destilada (HNO3);
	Alfa-D- triptofano a 5% em água destilada (HNO3).
3.1.3 Vidraria
Becker, pipetas de 5 e de 10 ml, tubos de ensaio.
3.1.4 Acessórios
Estante para tubos, pipetador, pêra, pissete, conta-gotas.
3.2 Métodos
Pipetou-se 1 ml de cada solução supracitada em um tubo de ensaio diferente.
3.2.1 Reações de precipitação de proteínas.
3.2.1.1 Reação do acido tricloroacético: 
Pipetado 1 ml da solução de acido tricloroacético a 10% para os 5 tubos de ensaio contendo as soluções 1,2,3,4,5;
3.2.1.2 Reação do acetato de Chumbo: 
Adicionou-se 5 gotas da solução de acetato de chumbo a 5% para os tubos de ensaio 1, 2, 3, 4 e 5;
3.2.1.3 Reação da Solução saturada de sulfato de amônio: 
Adicionados 4 ml da solução saturada de sulfato de amônio a cada tudo contendo as 5 soluções mencionadas anteriormente;
3.2.1.4 Reação de ácido sulfúrico: 
Adicionou-se 1 ml, gota a gota, de ácido sulfúrico 0,1N aos tubos de ensaio contendo as 5 soluções;
3.2.1.5 Reação de coagulação: 
Foi deixado os 5 tubos de ensaio contendo as soluções 1, 2, 3, 4 e 5 em banho-maria por 5 minutos. 
3.2.2 Reações de coloração das proteínas
3.2.2.1 Reação de biureto: 
Pipetou-se 1 ml das soluções 1,2,3,4 e 5 em tubos de ensaio, adicionar 5 gotas da solução hidróxido de sódio a 2,5N e, cuidadosamente, gota a gota a solução de de sulfato cúprico agitando o tubo após a adição de cada gota, até obter uma coloração violeta;
3.2.2.2 Reação Xanto-proteica: 
Pipeta-se 1 ml das soluções 1,2,3,4 e 5 em tubos de ensaio, adicionar em seguida 10 gotas de acido nítrico concentrado e aquecer até fervura. Em seguida adicionar 4 ml de hidróxido de sódio a 20%. A reação é considerada positiva se aparecer coloração amarelada;
3.2.2.3 Reação de Millon: 
Pipetar 1 ml das soiuções1,2,3,4 e 5 em tubos de ensaio e gota a gota, com a pipeta encostada no fundo do tubo de ensaio, adicionar 1ml de ácido clorídrico concentrado, sem agitar o tubo. A reação e positiva se houver formação de um anel;
3.2.2.4 Reação para aminoácidos sulfurados: 
Pipetar 1 ml das soluções 1,2,3,4 e 5 em tubos de ensaio e adicionar 2 ml da solução de hidróxido de sódio a 2,5N e aquecer até fervura por 1 minuto. A seguir, adicionar 5 gotas de acetato de chumbo e ferver por 20 a 30 segundos. (Formação de um precipitado muito finamente de coloração castanho ou preto);
3.2.2.5 Reação de Ninidrina: 
Pipetar 5 ml das soluções 1,2,3,4 e 5 em tubos de ensaio e adicionar 5 ml da solução de ninidrina, a 0,1% e ferver por 2 minutos. O teste positivo é representado pelo aparecimento de cor violeta.
 4 RESULTADOS 
Interpretação do teste qualitativo das proteínas 
	
	
Caseína
	
Albumina
	
Tirosina
	
Triptofano
	
Gelatina
	Ácido tricloro-acético
	
+++
	
+++
	
-
	
-
	
++
	Acetato de Chumbo
	
++
	
++
	
-
	
-
	
+++
	Sulfato de amônio saturado
	
+++
	
+++
	
-
	
-
	
+++
	Ácido sulfúrico 0,1N
	
++
	
+++
	
-
	
-
	
++
	Coagulação pelo calor
	
+
	
+
	
+
	
+
	
+
	Reação de Biureto
	Azul
+
	Azul Violeta
+
	Azul Forte
+
	Azul Forte
+
	Azul Violeta
+
	Reação Xanto-proteica
	Amarelo Claro +
	Amarelo Médio +
	Laranja
+
	Laranja
+
	Amarelo Médio +
	Aminoácidos sulfurados
	Amarelo Claro +
	Amarelo Claro +
	
+
	
+
	Amarelo Forte
	Ninidrina
	Amarelo Claro +
	Violeta
+
	Violeta Escuro +
	Violeta Escuro +
	Violeta Escuro +
Legenda: 
Levemente precipitado: +;
Precipitado: ++;
Fortemente precipitado: +++.
5 DISCUSSÃO
	Na aula prática verificou-se que as proteínas se diferenciam entre si, tanto pelas reações de precipitação onde houve diferentes níveis de precipitação por amostra, quanto pelas reações de coloração, onde ouve a identificação e diferenciação do que era realmente proteína e do que era aminoácido (todas as reações que apresentaram tons de cores diferentes ao violeta são aminoácidos).