LISTA DE EXERCÍCIOS 2a AP MICROBIOLOGIA GERAL E BÁSICA

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LISTA DE EXERCÍCIOS MEDIDAS QUANTITATIVAS DE CRESCIMENTO 
1 Discuta 2 condições em que a fase lag não é observada numa curva de crescimento 
bacteriano. Por que as células entram em fase estacionária? 
2 Qual a diferença entre a constante de taxa de taxa de crescimento (k) de um organismo 
e seu tempo de geração (g)? Explique utilizando a curva de crescimento bacteriano num 
sistema fechado. 
3 Descreva como você procederia, otimizando o uso de vidrarias, para preparar as 
diluições para contagem de uma cultura com aproximadamente 10
8
 células/ml. Qual a 
série que você plaquearia? Justifique. 
4 Em qual etapa da curva de crescimento bacteriano as células aumentam de tamanho 
acentuadamente? Explique sua resposta. 
5 Considerando-se um inóculo de 10.000 células de Escherichia coli por ml em caldo 
nutritivo e um tempo de geração de 20minutos, quantas bactérias haverá na cultura após 
10 horas de incubação, considerando-se que a cultura passou 2 horas na fase lag. 
6 Como você procederia para determinar experimentalmente o número de células 
viáveis da questão anterior, especifique: a) método / técnica utilizada; b) meio de 
cultura; c) diluições utilizadas; d) temperatura / tempo de incubação; e) leitura e 
expressão dos resultados. 
7 Suponha que a contagem de células viáveis em placas de uma bactéria A após 05 
horas de incubação e 7 gerações apresentou uma média de 238 x 10
5
 UFC/mL. 
Considerando que a referida bactéria duplica-se a cada 20 minutos responde e justifique: 
a) Diluição eu que foi realizada a contagem; b) Tempo da fase log; c) número de células 
inicial (No). 
8 De uma amostra de uma Estação de Tratamento de Efluente (ETE) foram retirados 25 
ml e colocados em 225 ml de solução salina estéril; em seguida 11 ml dessa diluição 
foram adicionados em 99 ml do mesmo diluente. Na sequência retira-se 10 ml dessa 
diluição e adiciona-se em 90 ml do citado diluente. Dessa última diluição retira-se 
novamente 1mL e transfere-se para 9ml de salina. A partir do procedimento descrito, 
que diluições foram obtidas? 
9 Para determinar a população bacteriana da amostra da questão anterior foi usado o 
método de contagem de células viáveis em placas pela técnica do “spread plate”. Foram 
empregadas as três últimas diluições e após o período de incubação o resultado foi o 
seguinte para as 3 diluições em triplicata:; 298, 290 e 276 ; 35, 37 ; 40.e 8,19 e 22. Qual 
a concentração de bactérias na amostra original do efluente? 
10 Se um meio de cultura foi cultivado com 5 x 10
4
 cél/mL no tempo zero, quantas 
gerações terão surgido após 8 horas de incubação com uma população final de 6 x 10
8
 
cél/mL. Qual a velocidade de crescimento desta cultura? 
11 Quais as técnicas de contagem de células viáveis em placas? Quais as principais 
vantagens e desvantagens de cada uma? 
12 Considerando a curva de crescimento bacteriano em um sistema fechado, descreva a 
fase lag e discuta que fatores afetam a duração da mesma. 
13 A contagem de células viáveis em placas de uma cultura de Serratia marcescens 
após 24 horas de incubação apresentou uma média de 238 x 10
6
 UFC/mL. Qual a 
diluição em que foi realizada a contagem? Justifique. 
14 Uma suspensão de esporos de Bacillus subtilis foi inoculada simultaneamente em 
dois meios de culturas distintos. Ao longo do tempo, as culturas apresentaram as 
seguintes curvas de crescimento: Explique as curvas levando em conta os prováveis 
fatores que podem ter influenciado no experimento e justifique o motivo pelo qual não 
foi observada a fase de declínio. 
 
 
Tempo (horas) 
15 Uma cultura de bactérias, utilizada num processo fermentativo foi coletada na fase 
exponencial de crescimento. A contagem total por microscopia numa câmara de 
Neubauer apresentou na diluição 10
-5
 um número médio de 5 células. O químico 
responsável pelo processo não aceitou a cultura para ser utilizada no processo, mas o 
microbiologista argumentou que a mesma poderia ser usada sem problemas. Com base 
no exposto, discuta as posições dos dois profissionais e caso você fosse chamado para 
resolver a questão, qual seria seu posicionamento? Justifique. 
16 No preparo de uma torta de creme ocorreu acidentalmente uma contaminação com 
20 células de Staphylococcus aureus. Considerando que o tempo de geração desta 
bactéria é de 15 minutos, quantas células deveriam existir na torta após 8 horas? 
17 Como você procederia para determinar experimentalmente o número de células 
viáveis da questão anterior, especifique: a) método / técnica utilizada; b) meio de 
cultura; c) diluições utilizadas; d) temperatura / tempo de incubação; e) leitura e 
expressão dos resultados. 
18 Uma cultura de Lactobacillus bulgaricus e outra de Steptococcus lactis utilizadas no 
processo de produção de iogurte foram incubadas a 37 °C por 8horas. Após este 
período, as culturas ainda se encontravam na fase exponencial de crescimento e o 
número de células de ambas foi determinado por turbidimetria. Os resultados 
encontrados para as duas culturas foram idênticos (DO=0.8). O profissional responsável 
pelo processo afirmou que estes valores poderiam ser utilizados como referência para 
iniciar o processo de produção. Discuta a posição desse profissional e diga como a 
mesma pode interferir nos resultados do processo fermentativo. 
19 Uma bactéria cresce no meio A com velocidade específica de crescimento máxima 
de 0,095 h-1. Qual o tempo necessário para esse microrganismo duplicar sua 
concentração na fase exponencial de crescimento? 
A 
B 
 
 
 Log 
UFC/mL 
20 A contagem em placas de uma cultura de bactérias apresentou no tempo zero um 
valor médio de 275UFC/mL. Qual a possibilidade de obter-se resultados 
estatisticamente confiáveis se após 6 horas de incubação o método for repetido 
utilizando-se as mesmas diluições para a contagem de células? 
21 Compare os métodos de medidas quantitativas de crescimento realizados até o 
momento em sala de aula no que se refere a aplicações, vantagens e limitações. 
22 Se um meio de cultura foi cultivado com 8 x 10
3
 cél/mL no tempo zero, quantas 
gerações terão surgido após 10 horas de incubação com uma população final de 6 x 10
8
 
cél/mL? Qual a velocidade de crescimento desta cultura? 
23 Foram realizadas diluições sucessivas de uma cultura de Escherichia coli. O volume 
do inóculo plaqueado foi de 0,1 ml e após o período de incubação a contagem foi a 
seguinte (10
-2
 7054 e 6893); (10
-3 
687 e 632); (10
-4
 406 e 438); (10
- 5 
59 e 65); (10
-6
 23 
e 18) (a) Qual a técnica de contagem utilizada? (b) Cite uma vantagem e uma 
desvantagem desta técnica (c) Qual o número de células viáveis da amostra? 
24 A contagem final de células viáveis em placas após 5 horas de incubação no de uma 
cultura de Escherichia coli, cujo tempo de geração é de 20 minutos, apresentou pela 
técnica do spread - plate nas diluições 10
-3
, 10
-4
 e 10
-5
 os seguintes resultados 
respectivamente: 298 e 290; 32 e 30; 3 e 4. Qual o provável número de células desta 
cultura no tempo zero e, que diluições deveriam ser preferencialmente utilizadas para se 
obter um resultado confiável no citado período? Justifique. 
25 A contagem de células de uma amostra de leite pasteurizado por turbidimetria 
apresentou uma D.O igual 0.3. Sabendo-se que este valor corresponde a um valor médio 
de 0,2 células numa câmara de Neubauer, qual a carga microbiana desta amostra? 
Considere que foram preparadas diluições decimais seriadas a partir de 1ml da amostra 
em 9 ml de salina fisiológica, sendo utilizada para contagem a diluição 10
-6
 .OBS: O 
volume da câmara de Neubauer é de 1/4000mm
3
 
26 Se N1= número de células encontradas pelaContagem Total por Microscopia e N2= 
número de células determinada pela Contagem de Viáveis em Placas, compare N1 e N2 
(<, > ,=) nas fases de crescimento da curva. Justifique. 
27 Como uma simples célula bacteriana, invisível a olho nu origina uma colônia visível 
em meio de cultura sólido? 
28 Analisando a curva de crescimento bacteriano observa-se que as fases lag e 
estacionária apresentam os mesmos perfis, todavia elas representam situações 
completamente diferentes. Como você explicaria tal fato? 
29 Para a construção de uma Curva de Calibração de uma determinada bactéria (curva 
padrão) somente a leitura das densidades ópticas – DO (densidade óptica) não é 
suficiente. Que outro recurso deve ser utilizado? Justifique. 
30 O número de células de uma cultura de Escherichia coli na fase estacionária da curva 
de crescimento foi determinado por dois diferentes métodos, obtendo-se os seguintes 
resultados: 3,5x10
3
 cel /mL e 1,7x10
3
ufc/mL. Relacione os resultados aos métodos 
utilizados e comente a coerência dos mesmos. 
31 O crescimento de duas culturas diferentes de bactérias é medido por turbidimetria, 
sendo obtidos resultados idênticos. O que se pode concluir com relação ao número total 
de células? E do número de células viáveis? 
32 Na fase inicial da curva de crescimento de uma cultura de Bacillus subtilis em 
sistema fechado você realizou uma contagem de células viáveis em placas (Pour Plate) 
encontrando um valor médio de 50 colônias nas placas da diluição 10
-6
. Após 200 
minutos de incubação e sabendo que a bactéria duplica-se a cada 30 minutos você 
realizou uma nova contagem em Câmara de Neubauer (1/4000mm3) na diluição 10
-2
 
encontrando um número médio de 4 células para a população final: Com base nestes 
dados responda: a) Número de gerações(n)?, b) Tempo de geração, c)Tempo de duração 
da fase LAG? 
33 Você tem 20 ml de um meio de cultura líquido com 2 x 10
7
 células de Proteus 
vulgaris. Após seis horas a cultura estava na fase logarítmica de crescimento com a 
população de 7 x 10
7
 cél/ml. O tempo médio de geração deste organismo neste meio de 
cultura é de 40 min. Determine se houve ou não a fase lag. Em caso afirmativo, qual sua 
duração?