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trascrição e tradução

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Prévia do material em texto

O processo de Transcrição
Denise Castro
Dogma central
TRANSCRIÇÃO
O que é?
Síntese de RNA(RNAt, RNAr, 
RNAm) a partir de um molde 
de DNA
-fenômeno local
Pra quê serve?
- Para ativação e 
desativação diferencial de 
genes
- Muda de acordo com o 
tecido, alimentação, 
estímulos ambientais
_____________________________________________________________Transcrição
• Estrutura do RNA
– Ribonucleotídeos 
– Açúcar – ribose
– Bases púricas: Adenina e Guanina
– Bases pirimídicas: Citosina e Uracila
– Uma cadeia - Lig fosfodiéster
– Origem – transcrição
– Enzima sintética – RNA polimerase
– Função – Síntese de proteínas
– Formação de muitas estruturas secundárias
– Facilmente degradado
RNA pols de eucariotos
Tipos de Polimerases Genes transcritos
RNA polimerase I Genes de rRNA 5.8S, 18S e 28S
RNA polimerase II Genes de mRNAs e snoRNAs, 
alguns genes de snRNAs
RNA polimerase III Genes de tRNAs, rRNA 5S, alguns 
snRNA, outros RNAs pequenos
RNA polimerase
Eucariotos
E onde é feito RNA?
Transcrição em procariotos
Não é que 
parece com a 
replicação?
Iniciação:
A transcrição é iniciada pela ligação 
dos fatores 
de transcrição: TF’s e a enzima RNA 
polimerase ao sítio promotor.
-DNA helicase
ALONGAMENTO:
A RNA polimerase catalisa a 
formação de uma ligação fosfodiéster 
entre o fosfato 5’ do ribonucleotídeo 
que chega à hidroxila 3’ da cadeia 
crescente de RNA.
TERMINO: sequencia específica
Fitas molde e codificadora
O processo de edição do mRNA
Capping, Poliadenilação e Splicing
O processamento 
do RNA eucariótico
• CAP5’: guanina modificada 
identifica o mRNA
• Cauda poli-A 3’ protege 
região codificadora (cds)
Cauda Poli-A
• 200-300bp de 
adeninas na 
extremidade 3’
• Sinal AAUAAA
• Complexo de 
poliadenilação
• Garante que o 
gene será 
traduzido com 
toda informação
O RNA é “maior” que a proteína
O RNA eucariótico
Processamento 
alternativo
Tradução/Síntese de Proteínas
5’Cap--------AUG---------------------UAA-------------AAAAAAAAAA3’
-A sequencia de bases entre AUG e 
UAA, determina a sequência exata 
de uma proteína
Mensagem no DNA baseada em 
códigos – 3 nucleotídeos
-Códon
-Codificam um aa ou a 
interrupção da mensagem
RNAm
Código Genético
• 64 códons: cada 1 tem 3
bases: A,U,C ou G
-61 aminoácidos e 3 sinais
de término(UAA,UGA,UAG)
- 61 dos 64 códons possíveis 
codificam os 20 
aminoácidos padrão
1 códon  3 nucleotídeos no RNAm
7 códons  21 nucleotídeos
Código Genético
Código Genético
• Características:
– Especificidade – um determinado
códon sempre codifica o mesmo
AA;
– Universalidade – é conservado em
todas as espécies; exceções: DNA
mitocondrial:
• (1) UGA especifica triptofano ao invés
de ser finalização
• (2)AGA e AGG-término, não arginina
– Redundância ou Degeneração – um
AA pode ter mais de 1 trinca que o
codifica;
– Contínuo – sempre lido de 3 em 3
bases.
Degeneração do código
Componentes da Tradução
• AMINOÁCIDOS, RNAm, RNAt e Ribossomos
– RNA mensageiro (mRNA)
Carrega as informações do DNA para o ribossomo, 
para a formação da cadeia polipeptídica
– RNA transportador (tRNA)
Serve de ligação entre a cadeia do mRNA e os 
aminoácidos da cadeia polipeptídica
-Ribossomos
Local da síntese
•RNAt:
Estrutura secundária: folha de trevo
O pareamento códon-anticódon é complementar
Componentes da TraduçãoComponentes da Tradução
RNAt ou moléculas adaptadoras:
TRADUTOR DO CÓDIGO GENÉTICO
-Sítios de ligação ao AA –
extremidade 3’ do RNAt se liga ao
grupo carboxila do AA;
-Anticódon → seqüência de 3
nucleotídeos que reconhece o
códon específico do RNAm;
-Pode estar carregado ou
descarregado.
AA é ligado aqui
Componentes da Tradução
• RNAm (molde);
• Ribossomos:
Ribossomos: grandes complexos de RNAr e
proteínas compostos por duas subunidades.
São as estruturas responsáveis pela síntese
protéica (local da síntese). Livres ou no RER.
Ribossomo de eucariotos: subunidades 60S
(maior) + 40S(menor), cada uma das subunidades
desempenham uma função específica na síntese
de proteínas
Etapas da Síntese Protéica
• Ativação dos AAs:
– Ligação dos AAs aos seus RNAt
ocorre no citosol pelas aminoacil-
RNAt sintetases.
– Duas lig. de alta energia
Etapa 1Etapa 1
Etapa 2Etapa 2
Iniciação:
O RNAm liga-se a menor das 2 subunidades
ribossômicas e ao aminoacil-RNAt de iniciação;
O aminoacil-RNAt de iniciação pareia com o
códon AUG, que é o códon que sinaliza o início
da proteína a ser sintetizada;
Reconhecimento dos Códons pelo RNAt
• A ligação entre códon do RNAm e
anticódon do RNAt é
antiparalela;
• O códon é lido de 5’ para 3’; o
anticódon também deve ser lido
de 5’ para 3’. Portanto a primeira
base do códon pareia com a
última base do anticódon;
Iniciação
Etapa 2Etapa 2
-Fatores de iniciação específicos estão 
envolvidos no processo de iniciação.
-O IF2 liga-se a GDP(guanosinadifosfato) para 
formar o complexo que liga o RNAt carregado a 
subunidade menor do ribossomo;
-O complexo IF2-MET-tRNA-GDP começa a 
percorrer o RNAm até encontrar o códon de 
iniciação
-Após encontrar o códon de iniciação, a 
subunidade maior do ribossomo se liga ao 
complexo para formar a estrutura final do 
ribossomo
-ao término dessa etapa,a IF2 e a GDP são 
liberadas do complexo
Alongamento:
- Começa quando o aminoacil t RNA
seguinte entra no ribossomo e se liga ao
segundo códon;
– Peptidiltransferase (ribozima) → liga o
peptídeo em formação e o AA a ser
adicionado;
– Após a ligação peptídica se formar, o
ribossomo avança 3 nucleotídeos na
direção 3’→Translocação (requer
energia, GTP) .
– O RNAt não-carregado vai para o sítio
E
– Um novo códon no RNAm é exposto
Etapas da Síntese Protéica
Etapa 3Etapa 3
Terminação
Etapa 4Etapa 4
-Ocorre quando 1 dos 3 códons 
(UAA, UAG, UGA) de terminação 
é “colocado” no sítio A;
-O fator de liberação(RF) liga-se 
ao ribossomo e o peptídio é 
liberado do ribossomo
Etapas da Síntese Protéica
• Polissomos ou Polirribossomos:
– Complexo de 1 RNAm e vários ribossomos.
Inibidores de Síntese Protéica
Tetraciclina: 
bloqueia o sítio A ribossomal
Estreptomicina: 
Liga-se à subunidade 30S e distorce 
sua estrutura inibindo a iniciação
X
X
Inibidores de Síntese Protéica
Cloranfenicol:
Inibe a atividade de peptidil-
transferase procariótica
X
Clindamicina e Eritromicina:
Ligam-se de maneira irreversível à 
subunidade 50S do ribossomo 
bacteriano, inibindo o deslocamento.
X

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