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Microbiologia Resumos Acelulares: vírus é semelhante e vírus - não sobrevivem sem ter células hospedeiras Unicelulares: bactérias, protistas, alguns fungos e algas verdes Pluricelulares simples: fungos e algas verdes Experiência de Pasteur: Pasteur refutou a teoria da geração espontânea, que dizia que quando deixávamos um líquido depois de cozer ou leite, várias coisas apareciam do nada. Pasteur pegou nesse "caldo" e ferveu-o, deixando-o depois em repouso, ficando alguns tapados, noutro grupo de balões cortou-lhes o colo, e verificou que após algum tempo essas "coisas" apareciam no caldo sem colo e nos balões com colo passado muito tempo não aparecia nada. Portanto essas coisas tinham ser de matéria viva, refutando a teoria de amiasma. Robert Koch : desenvolveu os postulados de Koch ainda hoje aplicados no diagnóstico de doenças causadas por micro-organismos. Postulados de Koch: sempre que existe uma doença, uma alteração, num determinado organismo (hospedeiro) nesse hospedeiro tenho de encontrar o organismo causal (Postulado1), assim o microrganismo pode ser isolados, cultivado em cultura pura e identificado(Postulado 2). Como provar que ele é que causou a doença? Por colocá-lo em contacto com o hospedeiro são, se conseguir induzir os mesmos sintomas no novo sintomas faz-se a prova de patogenicidade (Postulado 3), por isolar novamente o microrganismo. O microrganismo isolado deve ser idêntico ao original (postulado 4) Sendo que este microrganismo deve ser suscetível a ser cultivado em meios de cultura artificiais . Sendo que os vírus não podem ser cultivados por precisarem de um organismo vivo. Taxonomia: distribuição de organismos partindo das suas características e semelhanças ou relações evolutivas, Engloba: classificação, nomenclatura e identificação Classificação: Definição dos grupos taxonómicos com base na semelhança mutua ou relação evolutiva entre organismos Nomenclatura: conjunto de regras para atribui nomes de acordo com regras pré-estabelecidas Identificação: Procedimento usado para determinar a que grupo taxonómico pertence cada individuo. Níveis de classificação- Domínio, reino, phylum (filo), classe, ordem, família, género, espécie O sistema binomial de Lineu combina o nome do género - maiúsculas- com o adjectivo de natureza específica epíteto -minúsculas - o binômio designa a espécie. Escrita por extenso, itálico ou sublinhado cada palavra e em seguida quando mencionado pela primeira vez o nome do classificador. Todas as outras vezes que a espécie é escrita pode ser abreviada sem necessidade do nome do classificador. Classificação filogenetica ou filogenia: estuda as relações evolutivas entre os organismos vivos e é traduzida sob a forma de árvores filogeneticas. Ramos - comprimento representa a distancia evolutiva entre organismos Nós internos - organismos ancestrais Nós externos - organismos atuais Raiz - ancestral comum - partícula de RNA ribossomal. 3 domínios - Bacteria, Archaea e Eukarya Archaea ✔️ São procariontes, ✔️ São unicelulares ✔️ Parede celular sem peptidoglicano ✔️ Ligação éter aos lipídios - mais fortes ✔️ Habitam em ambientes extremos ✔️ Incluem, entre outros, organismos 🌸 Metanogenicos 🌸 Halobacterias 🌸 Termófilos extremos ou hipertermófilos Bacteria ✔️ Procariontes ✔️ Parede celular com peptidoglicano ✔️ Divisão binária ✔️ Energia obtida a partir de 🌸 Compostos orgânicos 🌸 Compostos inorgânicos 🌸 Fotossintese Eukarya- fungi ✔️ Eucariontes ✔️ Parede celular de quitina ✔️ Energia a partir de compostos orgânicos ✔️ Alguns multicelulares com micélio, composto por de rifas (bolores, cogumelos) ✔️ Outros unicelulares (leveduras) Eukarya - Protistas ✔️ Eucariontes ✔️ Algas 🌸 Eucariontes 🌸 Unicelulares ou pluricelulares 🌸 Parede celular de celulose 🌸 Realizam fotossíntese; possuem clorofila a e b e carotenóides 🌸 Produzem O2 e compostos organicos ✔️ Protozoários 🌸 Eucariontes 🌸 Absorvem ou ingerem compostos orgânicos 🌸 Podem ser móveis por: - pseudópodes; - cílios; - flagelos Como obtêm energia? 🌸 Ingestão (semelhantes a animais) ex: amibas e paramécias 🌸 Absorção (semelhante a fungos) 🌸 Fotossíntese (semelhante a plantas) ex: algas ✔️ Possuem grande diversidade podendo não ser considerandos animais, plantas ou fungos, podem também ser patogénicos ou benéficos. Ciclo Celular A divisão celular faz-se por fissão binária. Tempo de geração ou de duplicação: intervalo de tempo necessário para uma determinada população duplicar. A curva típica do crescimento de populações microbiana em “batch” contempla 4 fases: Lag (latência): adaptação da população microbiana inicial ao meio de cultura Exponencial: fase de intensa divinação celular onde cada célula divide-se em duas, portanto existe um crescimento exponencial Estacionária:o número total de células mantém, sendo que algumas dividem-se e outras morrer Morte: diminuição exponencial do nº de células viáveis. Medidas de crescimento bacteriano: podem ser realizadas através de métodos diretos ou indiretos Métodos diretos ✔️ Contagem de células: realiza-se através de câmaras de contagem. 🌸 A lâmina de vidro especial contém uma depressão no centro, visto essa depressão ser conhecida é possível estimar o volume de suspensão de células sobre o reticulado. 🌸 É útil para contar células sanguíneas e células de eucariontes e procariontes 🌸 Não distingue células viáveis de mortas e não permite contar as células móveis ✔️ Contagem de células viáveis: é necessária a utilização de membranas de filtração 1º Numa suspensão pouco concentrada ocorre a filtração sob vácuo 2º As bactérias que ficam retidas no filtro são incubadas em meio de cultura apropriado 3º Contagem das colónias existentes ✔️ Contagem de células viáveis (N) pelo método de diluições sucessivas e espalhamento em meio sólido Método indireto: Método espetrofotométrico 🌸 Relaciona a intensidade da luz incidente (de determinado λ) (I0) com a intensidade da luz transmitida (I) por uma amostra, ou seja a Transmitância (T) Cálculo da taxa específica de crescimento (curva de Batch): variação da concentração de células numa população bacteriana Estimativa de tempo de duplicação, g: (exemplo) g= ln2/μ =ln2/0.7 =1h μ= 0,7 Ln1= 0; Ln2=0,7; Ln3=1,1; Ln4=1,4 Fatores que influenciam o crescimento os microorganismos Fatores físicos: Temperatura: ✔️ Temperatura mínima: o crescimento é lento, devido aos canais com exterior ficarem tapados, portanto não há trocas com o exterior ✔️ Temperatura ótima: o crescimento é rápido ✔️ Temperatura máxima: leva ao desnaturamento proteico, logo à morte celular Tendo em conta a temperatura podemos classificar os organismos em: 🌸 Psicrófilos: desenvolvem-se em condições de temperatura até aos 10ºC sendo a temperatura ótima é a 4ºC. Normalmente vivem em ambientes gelados, nomeadamente algas. Têm ácidos gordos saturados com cadeia longa. Proteínas e enzimas termoestaveis a temperaturas baixas. Nestes seres existe uma acumulação de solutos compatíveis. 🌸 Mesófilos: desenvolvem-se em condições de temperatura até aos 50ºC, e a sua temperatura ótima é 38º 🌸 Termófilos: desenvolvem-se em condições de temperatura até aos 70ºC e a temperatura ótima é 60ºC 🌸 Hipertermófilos: desenvolvem-se em condições de temperatura até aos 110º e a temperatura ótima é 106º, logo são seres que desenvolvem-se no ponto de ebulição. Termófilos e hipertermófilos: Vivem por exemplo em águas termais. Têm ácidos gordos saturados de cadeia curta que suportam melhor temperaturas altas, possuindo enzimas estáveis a altas temperaturas - termoestáveis ✔️ Importância da Tº em segurança Alimentar 🌸 Esterilização: a 120ºC, 1 Pa entre 20 a 30 minutos. Por exemplo para esterilizar alimentos proteicos enlatados para destruição de endoesporos. - Tindalização: Tipo de esterilização que serve para conservaralimentos a menos de 120ºC durante curtos períodos de tempo (3 dias), é descontinuada. 🌸 Pasteurização: aplicados a alimentos como o leite, a cerveja e os sumos, de maneira a reduzir a carga microbiana. (Não esteriliza) pH: Tendo em conta o pH podemos classificar os organismos em: ✔️ Acidófilos: pH ótimos entre 1 e 6, são associados a meios ácidos, ex. fontes/ águas termais usados para problemas de pele; minas de ferro, ou no vinagre ✔️ Neutrófilos: pH ótimo entre 6 e 8, constituem a maior parte das bactérias e protozoários existentes ✔️ Alcalófilos: pH ótimo entre os 8,5 e os 11,5, podem ser bactérias presentes nas salinas ou no bacalhau seco Pressão Osmótica: Ambientes hipertónicos (elevada concentração de sais ou de açúcares) originam plasmólise, excepto para halófilos extremos Halófilos obrigatórios: requerem pressões osmóticas elevadas Halófilos facultativos: toleram pressões osmóticas elevadas até certo ponto Tendo em conta o pH podemos classificar os organismos em: 🌸 Halotolerantes: Trabalham melhor sem qualquer sal, mas toleram concentrações baixas do mesmo 🌸 Não-halófilos: não toleram qualquer sal 🌸 Halófilos: crescem melhor com algum sal, mas se não tiverem sal crescem mais devagar. Concentrações moderadas de sais são ótimas 🌸 Halófilos extremos: Elevadas concentrações de sais. Não crescem se não tiverem sais., p.e no mar morto Fatores Químicos Fontes de Carbono: 🌸 Integra moléculas orgânicas e estruturais 🌸 Fonte de energia 🌸 Integra moléculas orgânicas e estruturais 🌸 Quimioheterotróficos utilizam diretamente substratos orgânicos contento carbono 🌸 Autotróficos usam directamente o CO2 Outras fontes: ✔️ Azoto: 🌸 Em aminoácidos e proteínas 🌸 Algumas bactérias usam NH4+ ou NO32 outras (grupo restrito) usa directamente N2 (fixadoras de azoto) ✔️ Enxofre: 🌸 Em aminoácidos 🌸 Algumas bactérias usam SO422 ou H2S. ✔️ Fósforo: 🌸 Em DNA, RNA, ATP, e membranas 🌸 PO432 é uma fonte de fósforo e poder tampão ✔️ Elementos traço ou Oligoelementos 🌸 Requeridos em quantidade diminuta 🌸 Usualmente como cofatores de enzimas Oxigênio: aeróbios: utilizam a molecula de O2 como aceitador final de eletroes obrigatórios: para crescer têm de ter 02 na concentração atmosférica Microaerobios: a concentração de O2 pode ser mais baixa anaerobios: outras moleciulas como aceitadoras dinais de eletroes Obrigatórios: O2 perigoso ou letal Facultativo: O2 não é necessário, mas crescem bem na sua presença Aerotolerantes: Toleram O2, mas não crescem bem na sua presença O processo anaeróbio resulta na produção de compostos que se chamam espécies reativas de oxigênio que são aniões ou moléculas que levam à morte celular Meios de Cultura Meios quimicamente definidos: composição química exacta e conhecida Meios complexos: não se conhece a composição química exata de alguns dos componentes Meios seletivos: Usam aditivos que suprimem organismos indesejáveis e promovem o crescimento dos desejáveis (ex: antibióticos, acidificastes ou alcalinizantes, fo te nutritiva específica) Meios diferenciais: distingue espécies com base numa determinada atividade metabólica Meio de MacConkey: utilizado como meio seletivo e diferencial. contém sais biliares e cristal violeta que são inibidores do crescimento de bactérias gram positivas. Contém também lactose que permite diferenciar bactérias fermentativas gram negativas capazes utilizar lactose (colónias vermelhas ou rosas) daquelas que não a utilizam (colónias incolores). Meios de enriquecimento: favorecem o crescimento de determinados microorganismos por adição de factores de crescimento. Meios de conservação: 🌸 utilizados para a manutenção de viabilidade e das características fisiológicas de uma culturas 🌸 evita-se a adição de compostos que promovam o crescimento rápido como a glucose 🌸 meio diferente do ótimo para o crescimento, pois o desenvolvimento rápido leva à morte rápida Metabolismo Microbiano Catabolismo: liberta energia pela quebra de compostos orgânicos complexos em compostos químicos simples Anabolismo: Requer energia pela síntese de moléculas orgânicas complexas a partir de outras mais simples Metabolismo de hidratos de carbono: 🌸 A maioria dos microrganismos oxida hidratos de carbono como fonte primária de energia celular 🌸 A glucose é a fonte mais comum de energia utilizada pelas células 🌸 A produção de energia a partir da glucose faz-se pela respiração celular ou fermentação Fermentação: processo em que há libertação de energia, a partir de açúcares ou moléculas orgânicas. Não requer oxigénio, mas pode ocorrer na presença dele Não requer o uso do Ciclo de Krebs ou de uma cadeia de transporte de electrões Utiliza uma molécula orgânica como aceitado final de electrões Produz pequenas quantidades de ATP Grande quantidade de energia original da glucose permanece nas ligações dos produtos orgânicos finais (álcool ou ácido láctico) Respiração: Organismos aeróbios que usam O2 e anaeróbios que usam outras moléculas tais como nitratos . Processos de controlo de organismos Processos Físicos: 🌸Aquecimento/arrefecimento 🌸 Radiação 🌸 Filtração 🌸 Dessecação 🌸 Altas pressões 🌸 Esterilização Processos Químicos: 🌸 Agentes antimicrobianos (antibacterianos, antivírus, antifúngicos, antiprotozoários) 🌸 Antimicrobianos que matam os microrganismos - Microbicida 🌸 Antimicrobianos que apenas inibem o crescimento dos microrganismos - Microbioestáticos PAGE 12
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