_RELATÓRIO- Apresentação do Laboratório de Microbiologia e Orientações de coleta

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Aula prática 01 e 02
Tema: Apresentação do Laboratório de Microbiologia e Orientações de coleta
Data: 08 de MaIo de 2013
Preceptor: Karla	
Introdução
Antes de trabalhar/estudar em um ambiente é essencial conhecê-lo em todos os aspectos desde seu espaço físico e equipamentos que o compõe até as regras do local. No laboratório de microbiologia assim como em outros laboratórios é obrigatório o uso de Equipamentos de Proteção Coletiva (EPC’s) e Equipamentos de Proteção Individual (EPI’s) para que alguns riscos de acidentes e/ou contração de doenças sejam evitados.
Os EPI’s auxiliam na realização dos trabalhos e amenizam os efeitos negativos, garantindo a segurança e eficácia do trabalho e também do material utilizado, eliminando o risco de contaminação das amostras biológicas as quais são estudadas no laboratório. Os EPC’s são dispositivos utilizados no ambiente, afim de proteger o manipulador nas suas atividades.
Para que os exames realizados no laboratório sejam de qualidade, além da capacitação dos técnicos e infraestrutura, um elemento é essencial para isso, a coleta e transporte do material a ser analisado.
Desenvolvimento
Neste primeiro momento foi nos apresentado o ambiente do laboratório de microbiologia e os seus equipamentos, o espaço é divido em três partes: 1. Onde fica localizado um computador (para pesquisa e resultado de exames) e armários onde funcionários guardam seus objetos pessoais para não haver contaminação. 2. Uma sala ajustada ao ensino. 3. Um outra sala para realização de exames microbiológicos. Os materiais do laboratório são: microscópios, estufas bacteriológicas, estufa refrigerada, centrifuga refrigerada, microondas (para dissolver meios de cultura), ágar (meios de cultura), centrifuga comum, banho-maria, destilador,..., leitor de ELISA, espectrofotômetro, balança semi-analítica, placa aquecedora, pHmetro (meios de cultura entre 6,0 e 7,0), capelas de fluxo laminar, pipetas, ponteiras, estufa de secagem (materiais não contaminados), geladeira de material contaminado, geladeira de reagentes, geladeira para meio de cultura e descartex.
Na visita fomos apresentados as normas do laboratório, exemplo a utilização de EPI’s, e aos funcionários e estudantes que realizam trabalhos no local. O laboratório de microbiologia, assim como outros laboratórios da faculdade, depende de outros serviços, a esterilização, por exemplo, dos materiais utilizados é realizada em um outro local fora do laboratório.
Na sala de esterilização é possível perceber alguns problemas físicos no ambiente, que podem comprometer o serviço, nesta sala temos os seguintes equipamentos para esterilização de materiais de vários laboratórios: auto-clave, embalagem (triagem), estufa de secagem e destilador.
No laboratório de imunologia também conhecemos alguns equipamentos que são utilizados como suporte ao laboratório de microbiologia.
Durante a aula conversamos sobre algumas técnicas de coleta, sendo que nos foi mostrado alguns tipos de semeio: 1. Em placa - onde se usa alça em aro que se deve esterilizar, retirar a amostra e se o objetivo for quantificar as estrias devem ser feitas próximas, e se o objetivo for identificar é de estrias afastadas. 2. Em tubo - se usa a alça ponta de agulha para inocular o meio, sendo que a profundidade que esse meio alcançará dependerá do meio utilizado.
Conclusão
Para se trabalhar em um local é de suma importancia conhecê-lo ao todo, para que o trabalho e o próprio trabalhador estejam seguros e garanta a qualidade dos seus serviços. Por isso fomos apresentados ao laboratório de microbiologia e todos os aspectos que o dão suporte, para que pudessemos saber todos os recursos utilizaveis para melhor aprendizado.
Aula prática 02
Tema: Identificação de Staphylococcus sp.
Data: 08 de Maio de 2013.
Preceptor: Karla
Introdução
Os Estafilococos são bactérias gram-positivas, em formas de cocos, não esporulados, catalase positivos e são os que mais resistem no meio ambiente. São relativamente resistentes ao calor e podem tolerar altas concentrações de sal. Este microorganismo ainda é um dos principais patógenos que atinge o homem, sendo o principal a espécie Staphylococcus aureus.Apesar de fazerem parte de nossa microbióta normal, em condições especiais acometem diversas doenças. A sintomatologia dessas infecções são comuns a muitas outras infecções por outros patógenos, por isso, é importante que se realize exames específicos para a comprovação de uma infecção por Estafilococos.
Nesta aula demonstraram-se diversas técnicas para a diferenciação de Estafilococos de demais gêneros e a identificação entre as principais espécies, sendo estas: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermides e Staphylococcus saprophyticus.
Desenvolvimento
Antes de se iniciar as técnicas foram relembrados alguns conceitos importantes para determinação de Estafilococos, como a morfologia e seu comportamento diante de algumas substâncias, dados que são decisivos na identificação. 
As colônias de Estafilococos crescem em meio Agar simples, Agar sangue e Chapman (manitol), em geral, essas colônias são arredondadas, opacas e de coloração que vai do branco ao amarelo-dourado. Depois que o material biológico é coletado se faz a cultura em um meio de enriquecimento (ágar sangue, por exemplo) e a coloração pelo método de Gram. Um dos meios de cultura muito utilizados, que nos foi mostrado, é o manitol salgado onde cresce Staphylococcus aureus, que utiliza o açúcar manitol como fonte de energia através da fermentação, a alteração de pH pela liberação de ácidos durante a fermentação é que faz a viragem de cor do meio, que contêm o indicador de pH Vermelho de Fenol, a principio o meio é vermelho e se houver colonização por Staphylococcus aureus o meio fica amarelo, sendo que após a semeadura o meio deve ser incubado a 37°C por 24 horas.
Outro teste que realizamos durante a aula foi a prova da catalase, que detecta a produção ou não da enzima catalase. Esta enzima decompõe o peróxido de hidrogênio com formação de água e oxigênio molecular (bolhas), para detectar essa enzima acrescentamos em uma pequena amostra retirada do meio de cultura, o peróxido de hidrogênio (H2O2), como era uma cultura de Estafilococos, foi degradado e houve a formação de bolhas. Essa prova é usada para diferenciar estafilococos de estreptococos.
No teste da oxidase identifica-se a enzima oxidase que catalisa uma reação de oxidação/redução que reduz o oxigênio a água ou a peróxido de hidrogênio, ele é realizado com uma fita de identificação, porém são utilizados para diferenciar bactérias gram-negativas, o que não e o caso dos estafilococos.
Nos foi mostrado o teste da coagulase que identifica esta enzima que na presença de plasma/sangue desencadeia a coagulação, por menor que seja pode ser considerado positivo, como estafilococos, a prova é feita com a inoculação do microorganismo em um tubo contendo plasma, se deve fazer leituras periódicas. O teste também pode ser feito direto na lamina, com o material biológico e o plasma citrato, a coagulação, quando positivo, é rápida.
Outro teste citado para identificação de Staphylococcus aureus foi a prova da DNAse, pois estes utilizam o DNA como fonte de energia, se semeia o microorganismo em um meio de cultura com DNA, depois do crescimento adiciona-se HCL para desnaturação das proteínas o que apresenta uma turvação no meio, se houver um halo ao redor da semeadura o teste é positivo. O teste da Novobiocina foi o ultimo teste mostrado onde se coloca um disco do antibiótico na placa de ágar simples onde foi inoculado o microorganismo, incubar por 24 horas se a bactéria for sensível a antibiótco aparecerá um halo onde este agiu e inibiu o crescimento bacteriano. Este teste é utilizado para diferenciar Staphylococcus pidermides (sensível) de Staphylococcus saprophyticus (resistente) 
Aula prática 04
Tema: Identificação de Streptococcus sp.
Data: 15 de Maiode 2013
Preceptor: Karla
Introdução
Os estreptococos são bactérias gram positivas, anaeróbios facultativos (algumas crescem melhor nessa condição, estimulado por O2), fermentam glicose tendo como único produto o ácido láctico sem a formação de gás, possuem hemolisinas, são catalase negativos, sendo este um diferencial de estafilococos/micrococos (catalase positoivos), são oxidase negativos, crescem em cadeias ou diplococos. Os estreptococos podem ser confundidos com enterococos que também são gram positivos, anaeróbios facultativos, catalase negativos e provocam hemólise (total, parcial ou nenhuma). Para que se consiga distingui os estreptococos dos estafilococos e enterococos, bem como das principais espécies de interesse médico (S. pyogenes, S. agalactiae e S. pneumoniae), são necessários alguns testes bioquímicos e cultura de microorganismos que tem como fundamento as características de cada micoorganismo para diferencia-los.
Desenvolvimento
Conclusão
Aula prática 05
Tema: Identificação de Bacilos Gram Negativas não fermentadoras.
Data: 22 de Maio de 2013
Preceptor: Karla
Introdução
As bactérias gram negativas não fermentadoras formam um grupo de bacilos aeróbios não formadores de esporos que não utilizam carboidrato como fonte de energia, nem os degradam através de vias metabólicas fermentativas, são considerados oportunistas em infecções hospitalares, sendo as três espécies clinicas mais frequente: 1. Pseudomonas aeruginosa: formam colônias grandes com odor de uva, produções de piocianina que confere uma coloração esverdeada ao meio de cultura, que podem ser secas ou mucóides, sendo que algumas cepas podem produzir alguns outros pigmentos (piorrubina-vermelho, piomelanina- marrom a preto e pioverdina – amarelo), são móveis, crescem bem a 37-42°C (principalmente a 42°C), oxidam glicose e não oxidam lactose. A infecção por P. aeruginosa prevalece principalmente em pacientes com feridas de queimadura, fibrose cística, leucemia aguda, transplante de órgãos e águas de recreação. Acinetobacter baumannii: são cocos ou cocobacilos, não produzem a citocromo oxidase, exibem uma rápida utilização de glicose (com produção de ácido), exibem uma rápida utilização de lactose a 10% (com produção de ácido), são imóveis e resistentes a peicilina. E Stenotrophomonas maltophilia: são bastonetes móveis, que não produzem citocromo oxidase, oxidam glicose, maltose e lactose, não oxidam manitol, são lisina-descarboxilase positivas, DNAse positivas e algumas cepas possuem pigmentos amarelo.
Aula prática 06
Tema: Identificação Enterobactérias.
Data: 29 de Maio de 2013
Preceptor: Karla
Introdução
As enterobactérias são bacilos gram negativos cujas principais características são: fermentação de glicose com produção de ácido ou ácido e gás (fermentação de muitos carboidratos), ausência da enzima citrocromo-oxidase (oxidase-negativo) e redução do nitrato a nitrito. Muitos gêneros são móveis e capsulados, podem ser aeróbias ou anaeróbias facultativas. São catalase positivos, crescem de 22°C a 37°C e tem ampla distribuição no meio ambiente.
Os fatores de virulência associados as enterobactérias são: endotoxinas, cápsula, variação de fase antigênica, sequestro de fatores de crescimento, resistência ao poder bactericida do soro e resistência a antibióticos. A endotoxina (LPS) possui o antígeno O que é um carboidrato que induz a variabilidade e o lipídio A (antígeno A) que induz a resposta imune.
Os principais patógenos são: 
Aula prática 07
Tema: Identificação de dos BAAR e Coloração de Gram e Ziehl-Neelsen.
Data: 05 de Junho de 2013
Preceptor: Karla
Aula prática 07
Tema: Identificação de Bactérias relacionadas a DST's bacterianas.
Data: 19 de Junho de 2013
Preceptor: Karla
Aula prática 08
Tema: Urocultura e Antibiograma.
Data: 03 de Julho de 2013
Preceptor: Karla