Replicação do DNA (1)

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Prof. Luã Tainã 
 
UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA 
INSTITUTO DE BIOLOGIA 
BIO007 BIOLOGIA APLICADA À NUTRIÇÃO 
 Princípio básico da replicação (PAREAMENTO DE BASES) 
 
 
http://www.nature.com/scitable/content/the-meselson-stahl-experiment-18551 
 
 Bacteriana – 1 origem – OriC 
 Proteínas iniciadoras 
 
 3 Repetições tandem 
 13 nucleotídeos 
• (Rico em T-A) 
 
 
 4,6 x 106 Pb 
 
 
 500 a 1000 pb/seg 
 
 40min geração 
 
 
 
 
 
 
•John Cairns (1963) 
 
 
 Abertura da dupla hélice 
 (Quebra das ligações de hidrogênio) 
 
 Hexâmero 
 
 Hidrólise de ATP 
Fonte:http://aprendendogenetica.blogspot.com.br/2011_03_01_archive.html 
 
Fonte: http://www.ufsm.br/blg220/hide/replic3.htm 
 
 1957 – Isolada de Escherichia coli 
 (Nobel em 1959) 
 
• Polipeptídeo único 
 
 5’ trifosfatos desoxirribonucleosídeos 
 (dATP; dTTP;dCTP;dGTP) 
 
 Mg²+ 
 
 DNA molde 
 
 Primer/ iniciador 
 
 Extremidade 3’OH livre 
 
 
Fonte: http://www.nndb.com/people/936/000129549/ 
DNA Pol 
 
Fonte: http://gilneves18.blogspot.com.br/2011/04/genetica-primase.html 
 
 Necessidade de extremidade 3’OH 
 
Mecanismo de replicação é preciso 
•Pareamento específico de bases 
 
 
•Conformação da polimerase 
 
 
•Atividade exonucleolítica 
 
Mecanismo de replicação é preciso 
Mecanismo de replicação é preciso 
1 Par de base alterado – GAA – GUA (Glutamato • Valina) 
 
 Holoenzima - 900.000 Kd 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Fonte: http://www.biochimy.xpg.com.br/acidosnucleicos/acidos_nucleicos.html 
Grampo no DNA 
Subunidade catalítica 
Dimerização 
Grampo no DNA 
Subunidade catalítica Exonuclease 3’  5’ 
 
 Exonuclease 3’ -> 5’ 
 
 γ 
 δ 
 ε 
 
 
 
 5’  3’ 
 
 
 
 
 Fita contínua 
 
 
 Fita descontínua 
(Fragmentos de okazaki) 
 
Fonte: http://www.uel.br/pessoal/rogerio/genetica/respostas/pratica_03.html 
Filamento contínuo e descontínuo 
 
 Estabilizam fita única 
 
 Impedem formação de grampos 
 
 Ligam-se cooperativamente 
 
 Não impedem a adição de bases 
 
 
 
 Une os fragmentos de Okazaki 
 
 Topoisomerase II 
 (DNA Girase) 
 
 Tetrâmero 
 α/β 
 
 Evita torções 
 Quebras na dupla fita 
 
 
 
 
 
 Região de terminação 
 Ter 
 
 
• Proteínas 
Tus-Ter – Bloqueio da forquilha 
 
Fonte: http://www.infobiologia.net/2012/11/ciclo-celular-y-mitosis.html 
 
 6,5 x 107 nucleotídeos 
 
 2600 pb/min - 25º 
 
 1 origem de replicação? 
 (Quanto tempo custaria) Fonte: http://www.diptera.info/forum/viewthread.php?thread_id=43062&pid=188709 
Fonte: http://djalmasantos.wordpress.com/2010/10/10/cromossomos-gigantes/ 
 
Fonte: http://www.ufsm.br/blg220/hide/replic2.htm 
 
 
 
• Sequências GGGTTA 
 Repetidas em tandem 
 
• “Relógios” da divisão celular 
 (Senescência celular) 
 
• Evitam 
 
 degradação do DNA 
 
 Fusão de cromossomos 
 
 
Fonte: http://djalmasantos.wordpress.com/2011/08/06/testes-de-nucleo-celular-45/ 
 
Fonte: http://www.ufpe.br/biolmol/telomerases.htm 
 
• Atividade aumentada 
(Evita senescência replicativa) 
 
 
 
 
• Fenótipo “Imortal”