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Fertilização in vitro É um procedimento que envolve a colheita de ovócitos e de espermatozoides e a união de ambos, in vitro, com o objetivo de promover a fertilização para obtenção de embriões. Produção in vitro ▪Obtenção dos oócitos; ▪ Maturação in vitro; ▪ Fecundação in vitro; ▪ Cultivo in vitro. A B C Aspiração Folicular por Ultra-sonografia Obtenção dos oócitos ▪Ovum pick up – OPU: - Aspiração folicular guiada por ultrassom. Obtenção dos oócitos ▪ Post mortem ou ovariectomia: -Aspiração Folicular; - Slicing (Técnica de Fatiamento). Seleção dos oócitos Complexo cumulus oócito Maturação in vitro ▪ 20 a 24h de incubação a 38,5°C e 5% CO2. Fecundação in vitro Seleção dos espermatozóides ▪N2 Líquido : 196 °C; ▪Motilidade e vigor; ▪Percoll: centrifugação em gradiente de densidade; ▪ Finalidade: separar os sptzs do líquido seminal e do diluente e obter sptzs viáveis para o processo de fertilização. Meio diluente Inviáveis Viáveis Sêmen Meios e Metodologia ▪ 12 a 18 horas de incubação. Cultivo in vitro ▪Lavagem dos embriões; ▪Transferência dos zigotos para meio CIV; - 38,5°C , 5% CO2 , 5% O2 e 90% de N2; - 48 horas após a FIV – Clivagem; - 7 dias após a FIV – Blastocisto. Transferência de embrião ▪Transferência direta: necessário receptora sincronizada.; ▪ Criopreservação dos embriões: diminui taxa de prenhez. Vantagens ▪Acelera ganho genético; ▪Animais jovens; ▪Animais senis ou mortos; ▪Animais com problemas de infertilidade adquirida. Desvantagens ▪Baixos índices de blastocisto; ▪Dificuldades na criopreservação de embriões; ▪Problemas de desenvolvimento fetal e placentário; ▪Alto custo dos embriões. OBRIGADA!