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14/03/2025
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Meios de cultura e 
isolamento dos principais 
microrganismos
PROF.ª RAISA MELO LIMA
QUESTÃO ENADE
14/03/2025
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MEIOS DE CULTURA
Meios de cultura artificiais  preparações que fornece condições aos 
microrganismos para crescimento e/ou isolamento
 Algumas bactérias crescem bem em qualquer meio, outras precisam de 
algumas substâncias especiais para crescimento  bactérias exigentes
 Algumas bactérias podem não ser cultiváveis  apenas em organismos vivos
Treponema pallidum
Mycobacterium leprae
Critérios para o crescimento de microrganismos em cultura
Nutrientes adequados e proporcionais
Macronutrientes  proteínas, carboidratos e lipídeos
Micronutrientes  sais mineirais, vitaminas
Temperatura e pH ideal 
Geralmente varia entre TA (+-25 °C a 36 °C) e pH entre 6 a 8
Presença ou não de oxigênio
Anaerobiose
Aerobiose
Esterilidade meios autoclavados ou filtrados 
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Classificação dos meios de cultura
Sólidos  contêm substância gelificante (ágar 
observamos as colônias)  tubos ou placas
Semi-sólidos pouca quantidade de ágar (0,5 a 0,8%) 
Tubos usados para avaliar a motilidade bacteriana
Líquidos (caldos)  não tem substância gelificante (não 
tem como observar colônias)
Tubos usados para aumentar a população de bactérias ou 
fungos mais rapidamente e provas bioquímicas
Classificação dos meios de cultura
Naturais  complexos
Sem composição química definida
Contêm hidrolisado de carne, sangue, açúcares, 
vitaminas, extrato de leveduras
Para organismos menos exigentes 
Ex.: Ágar sangue, chocolate, MacConkey, Fava-Netto
Artificiais quimicamente definidos
A composição química, bem como a quantidade, são 
conhecidas.
Ex.: caldo tetrationato, 
Ágar sangue
Caldo tetrationato
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Transporte e conservação (manutenção)  não 
contém nutrientes e sim apenas “conservantes” 
Stuart diversas amostras 
Semissólido
Transporta e conserva microrganismos viáveis 
Haemophillus spp, Salmonella spp, Shigella spp, 
Pneumococcus spp.
Não há fonte de nitrogênio  não há proliferação
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Transporte e conservação (manutenção)  não 
contém nutrientes e sim apenas “conservantes” 
Ágar Cary Blair (Stuart modificado) amostra fecal 
e retal (Salmonella e Shigella)
Semissólido 
A carência de nitrogênio impede a proliferação 
também
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Transporte e conservação (manutenção)  não 
contém nutrientes e sim apenas “conservantes” 
Salina tamponada  NaCl tamponado
Líquido
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar nutrientemeio relativamente simples, de fácil preparação e barato, 
muito usado em Microbiologia como um cultivo preliminar
Uso mais freqüente é para a conservação e manutenção de culturas em 
temperatura ambiente método opcional para os laboratórios que não dispõem 
freezer à - 80ºC
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Crescimento e isolamento  fornece nutrientes para proliferação microbiológica
Enriquecidos  meio rico que permite crescimento mais rápido de microrganismos em 
baixa quantidade na amostra.
Ex.: chocolate, BHI, sangue
Diferenciais permite a distinção entre 2 ou mais tipos de microrganismo
Ex.: sangue (cocos GRAM+  hemólise) , MacConkey (não fermentadoras de lactose muda a cor do meio 
para amarelo), Cled (fermentadoras de lactose muda a cor do meio), EMB (colônias com cores diferentes 
dependendo da fermentação da lactose ou não)
Seletivos  seleciona o crescimento de 1 tipo de bactéria 
Ex.: ágar sabouraud (inibe bactérias  baixo pH) ágar MacConkey (inibe Gram+  cristal violeta e sais 
biliares), EMB (inibe Gram+)
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar sangue  diferencial e não seletivo
Sangue de carneiro
Nesse ágar os eritrócitos estão íntegros  favorece a 
visualização da hemólise
Produção ou não de hemolisina
Beta-hemólise total  Streptococcus pyogenes ou 
Staphylococcus aureus 
Alfa-hemólise  parcial  Streptococcus viridans ou 
Streptococcus pneumoniae
Gama-hemolíticas  esbranquiçada  Enterococcus faecalis
ou Staphylococcus epidermidis
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar chocolate meio enriquecido
Para microrganismos exigentes
Sangue de cavalo, carneiro ou coelho na preparação  alta temperatura 
lisa as hemácias e liberam hemina e hematina
Crescimento de microrganismos exigentes Haemophilus spp., Neisseria spp., 
Brahamella catarrhalis e Moraxella spp
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar Thayer-Martin chocolate meio seletivo e enriquecido
Antibióticos  inibem algumas bactérias e fungos 
Colistina
Vancomicina
Nistatina
Crescem apenas espécies patogênicas de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria 
meningitidis
IMPORTANTE: é um meio de escolha quando a amostra vem de um sítio não 
estéril (que pode ter contaminação ou infecção por outros microrganismos)
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◦ Ágar MacConkey: seletivo, diferencial
◦ GRAM + não se desenvolvem (Streptococcus, Staphylococcus)
◦ Sais biliares
◦ Cristal violeta
◦ Peptonas  utilizada pelas bactérias não fermentadoras de lactose (aumenta o pH)
◦ Lactose utilizada pelas bactérias fermentadoras de lactose (reduz pH)
◦ Vermelho neutro  indicador de pH 
◦ Fermentadoras lactose: rosa e avermelhadas (E. coli)
◦ Não fermentadoras: meio amarelado
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Seletividade para GRAM -
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
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ÁGAR CLED: fácil, barato, diferencial e não seletivo
◦ Estabilidade muito boa (em geladeira dura até 2 meses)
◦ Peptonas  utilizada pelas bactérias não fermentadoras de lactose (aumenta o pH)
◦ Lactose  utilizada pelas bactérias fermentadoras de lactose (alteração de pH : reduz)
◦ Azul de bromotimol marcador de pH
◦ Colônias amarelas  fermentadores de lactose
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar Salmonella-Shigella (SS) meio seletivo e diferencial 
Crescem apenas Gram negativos 
Sais de bile, verde brilhante e citrato de sódio inibem Gram positivos. 
Indicador de pH : vermelho neutro
Fermentadoras de lactose  colônias de cor rosa (E.coli e Klebsiella)
Não fermentadoras  colônias transparentes (Salmonella e Shigella)
Tiossulfato de sódio e o citrato férrico  detecção de H²S evidenciado por 
formação de colônias de cor negra no centro. 
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar EMB meio seletivo e diferencial 
Crescem apenas Gram negativos 
Diferencia as fermentadoras de lactose (E.coli e Klebsiella) de não 
fermentadoras (Salmonella e Shigella)
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Caldo selenitomeio seletivo e enriquecido
Os caldos de enriquecimento seletivo são utilizados para diminuir a quantidade de bactérias 
da microbiota intestinal (Streptococcus e E. coli) normal no espécime fecal, inibindo de 
alguma forma seu metabolismo e propiciando o desenvolvimento franco dos verdadeiros 
enteropatógenos
Usado para crescimento e isolamento de (Salmonella e Shigella)
Inibe E. coli e Streptococcus spp.
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Caldo tetrationatomeio seletivo e enriquecido
Os sais de bile contidos no meio de tetrationato inibem microrganismos Gram positivos e a 
adição da solução de iodo inibe a microbiota normal de espécies fecais.
Usado para crescimento e isolamento de Salmonella
Estes caldos devem ser sempre utilizados como uma etapa prévia, uma vez 
que a semeadura direta das fezes em meios sólidos geralmente leva a um 
supercrescimento da microbiota normal, em detrimento às poucas colônias que 
podem ser formadas pelos verdadeiros patógenos
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
BHI meio enriquecido
Meio para cultivo de estreptococcos, 
pneumococos, meningococos, 
enterobactérias, não fermentadores, 
leveduras e fungos. 
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar LÖWENSTEIN JENSEN meio enriquecido de 
isolamento de M. tuberculosis
A base do meio é constituída por ovos integrais, o que 
permite amplo crescimento das micobactérias
Capacidade de produção de niacina  positivo para M. 
tuberculosis (colônias amarelas) 
Colônias brancas  Nocardia spp.
Cor original verde claro
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar Sabouraud Dextrose meio para fungos (leveduras e filamentos
 Características macroscópicas 
Colônias algodonosas  filamentos
Colônias cremosas e pastosas  leveduras
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar CHROMagarmeio seletivo para Candida
Isolamento e identificação para Candida albicans (verde), C. tropicalis (azul) e C. krusei
(rosa) de amostras clínicas. 
Possui uma ação inibidora para as bactérias 
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar batata dextrose meio para fungos (leveduras e filamentos)
Rico em carboidratos simples de batata  amido
Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Ágar mycoselmeio seletivo para fungos (leveduras e filamentos)
A Cicloheximida, um dos componentes do meio, serve para selecionar dermatófitos
Microsporum, Trichophyton e Epidermophyton
 O cloranfenicol inibe o crescimento de bactérias e alguns fungos filamentosos. 
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Classificação dos meios de cultura  quanto ao objetivo
Meio para testes de 
sensibilidade (antibiograma)
Ágar Muiller Hintonmétodo 
de disco-difusão ou e-test
Diversas Bactérias  Gram + e –
Ágar Muiller Hinton Sangue 
antibiograma
Streptococcus
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MAPA MENTAL -> folha sem linha ou PowerPoint
1) Escolher um dos grupos de bactérias abaixo
Cocos GRAM+ ou Bacilos GRAM- ou Micobactérias ou Espiroquetas 
2) Através de uma mapa mental , mostrar o passo a passo desde a coleta do 
material suspeito, o meio usado para o transporte (se necessário), os exames 
diretos, colorações e culturas até o isolamento da bactéria
3) Em cada uma das etapas, apresentar as características (mudança de cor, 
aspecto da cultura, aspecto microscópico, teste de motilidade...)
4) Ao final identificar o gênero e se possível a espécie “isolada”.

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