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Prof. Ronaldo Luis ThomasiniProf. Ronaldo Luis Thomasini ICT – UFVJM – Campus JK Diamantina BIOQUÍMICA � É um conjunto de reações químicas controladas enzimaticamente, em que uma molécula orgânica (geralmente a glicose) é degradada em compostos mais simples, liberando energia. 3 � � Este processo tem grande importância econômica, sendo utilizado na obtenção de bebidas alcoólicas, vinagres, pão, queijos entre outros alimentos. � Estudos realizados por Louis Pasteur (1822-1895), permitiram verificar que a fermentação alcoólica estava sempre associada ao crescimento de leveduras, mas que se estas fossem expostas ao oxigênio produziriam (em vez de álcool e dióxido de carbono) água e dióxido de carbono 4 carbono � � � C6H12O6 + 6O2 ----> 6CO2 + 6H2O + 36ATP(ADENOSINA TRIFOSFATO) � Destas observações, Pasteur concluiu que a fermentação é o mecanismo utilizado pelos seres vivos para produzir energia na ausência de oxigênio. � FERMENTAÇÃO � Fermentação→ � Glicose degradada ausência de O2 → substância + simples: 5 simples: • Ácido lático = fermentação lática; • Álcool etílico = fermentação alcoólica • Ácido acético = fermentação acética � � Dependendo do tipo de microrganismo presente, a fermentação pode ser: • Alcoólica – produz etanol e dióxido de carbono, produtos utilizados pelo Homem na produção de vinho, cerveja e outras bebidas alcoólicas e do pão; Acética – produz o ácido acético, que causa o azedar do 6 • Acética – produz o ácido acético, que causa o azedar do vinho ou dos sumos de fruta e sua conseqüente transformação em vinagre; • Láctica – produz o ácido láctico, geralmente a partir da lactose do leite. O baixar do pH causado pela acumulação do ácido láctico causa a coagulação das proteínas do leite e a formação do coalho usado no fabrico de iogurtes e queijos � As enzimas são proteínas especializadas na catálise de reações biológicas( FERMENTAÇÕES) � As enzimas aceleram a velocidade de uma reação, sem no entanto participar dela como reagente ou produto. 7 � Atuam em concentrações muito baixas e em condições suaves de temperatura e pH. � � Numerosas enzimas podem ser encontradas no leite, como lipases, proteinases, óxido-redutases, fosfatases, catalase e peroxidase. O desenvolvimento de microrganismos no leite, sejam estes provenientes de culturas láticas selecionadas ou contaminantes, contribui para o complexo enzimático. 8 contribui para o complexo enzimático. � � -O ácido lático é o nome comum do ácido 2-OH propiônico; � C6H12O6 ----------- 2CH3 – CHOH – COOH � Glicose Ácido Láctico � 1780 - O farmacêutico Schelle, em descobriu sua estrutura, isolou-o e identificou-o como sendo o principal constituinte do leite ácido. 10 identificou-o como sendo o principal constituinte do leite ácido. � 1847 - O pesquisador Blandeau, identificou-o como produto de fermentação. � Após 1881. - A produção industrial do ác lático passou a ter maior importância � Atualmente, é produzido, principalmente, a partir de glicose de milho, melaços e soro de queijos. � - � Uma característica fisiológica diferenciadora das bactérias láticas é sua alta tolerância à acidez. � O crescimento de todas as bactérias láticas continua através da fermentação, até que o pH tenha reduzido-se a um valor menor ou igual a pH =5. 11 � Em cerveja e vinho as bactérias láticas são agentes deterioradores potenciais, que as vezes crescem e produzem uma acidez indesejável. � Um outro habitat característico das bactérias láticas é o leite, para o qual elas tem acesso através do corpo da vaca ou por materiais vegetais. � Principais microrganismos empregados industrialmente: � Para a produção do ácido lático, são as bactérias do gênero Lactobacillus e Streptococcus. � A espécie escolhida depende do carboidrato disponível e da temperatura a ser empregada: 12 temperatura a ser empregada: � - Lactobacillus delbrueckii, L. bulgaricus: temperatura de 45 - 50°C; � - L. casei e Streptococcus lactis: temperatura ao redor de 30°c; - L. pentosis, L. leishmanii: temperatura acima de 30°C. � É conveniente para cada caso, estudar a temperatura mais conveniente. IMPORTÂNCIA DAS BACTÉRIAS LÁTICAS NA INDÚSTRIA DE ALIMENTOS Obtenção de vegetais fermentados: pickles, chucrute, azeitonas, forragem para gado. - Gênero Leuconostoc - produção de sabor no chucrute Lacticínios: iogurtes, leites acidificados, queijos, manteiga; 13 Leuconostoc, S. lactis, S. diacetilactis e L. cremoris: são usados como fontes de flavorizantes* na indústria de lacticínios e são responsáveis pelas diferentes características conferidas à manteiga, queijos e iogurtes. Iogurte: L. bulgaricus (45 - 50°C), produção de elevada acidez - 2,7% de ácido lático S. thermophilus (40 - 45°C), produção de 1% de ácido lático. Carnes curadas: salames e outros embutidos; � O químico francês Lavoisier (1743-1794), escreveu no livro "Tratado de Química Elementar" que � “o vinagre não era nada mais que o vinho acetificado devido à absorção do oxigênio, portanto o resultado apenas de uma 15 absorção do oxigênio, portanto o resultado apenas de uma reação química” � Somente mais tarde, Pasteur mostrou que sem a participação da bactéria acética não há formação do vinagre. � Assim provou: sempre que o vinho se transforma em vinagre, é devido à participação de bactérias acéticas � Na indústria de alimentos é largamente utilizada na produção de vinagre, � PRINCÍPIO - oxidação do álcool por bactérias acéticas, as Acinobacter e Gluconobacter. 16 as Acinobacter e Gluconobacter. � Outras espécies acéticas podem oxidar o álcool a ácido acético, mas muitas delas também podem oxidar o ácido acético a gás carbônico e água, o que é indesejável • A produção de ácido acético a partir de soluções alcoólicas é conhecida há tanto tempo quanto a produção de vinho (10000 anos). • Vinagre diluído como uma bebida refrescante. 17 • Era obtido deixando o vinho aberto, processo era muito lento e uma película de bactérias flutuava sobre o vinho • No século XIX, processos em superfície foram desenvolvidos tornando o processo mais rápido. • Em 1949, o processo em profundidade foi desenvolvido. � MICROORGANISMO � São utilizadas principalmente as de um grupo especial do gênero Acetobacter, conhecido como bactérias acéticas. 18 � Emprega-se inóculo misto de Acetobacter contendo diferentes espécies ou variedades. � BIOSÍNTESE: � C 6 H 12 O 6 = 2C 2 H 5 OH + 2CO 2 � glicose (180g) etanol (46g) dióxido de carbono � 2C2H5OH + 2O2 = 2CH3COOH + 2H2O 19 � etanol oxigênio(32g) ácido acético (60g) � 1 mol de etanol → 1 mol ácido acético � Cepas altamente produtoras produzem de 13 a 14% de ácido acético. � Para uma ótima produção é necessária uma quantidade suficiente de oxigênio � 1532 – montado o primeiro engenho de açúcar � Primeira Guerra – álcool como combustível de motores de explosão 1929/1931 – Crise internacional; instalação da Fermentação Alcoólica Breve histórico � 1929/1931 – Crise internacional; instalação da primeira destilaria de álcool anidro – obrigatoriedade da mistura de 5% de etanol à gasolina (Dec. 19717) � 1974 – crise do petróleo – Pró-álcool No Brasil, o etanol é utilizado de duas maneiras: - como mistura na gasolina, na forma de 22% de etanol anidro, a 99,6º Gay-Lussac (GL) e 0,4 % de água, formando uma mistura "gasohol" com o objetivo Importância água, formando uma mistura "gasohol" com o objetivo de aumento da octanagem da gasolina; - como etanol puro, na forma de etanol hidratado, a 95,5º GL No Brasil a cana de açúcar é a principal matéria prima utilizada;na França é a beterraba; nos EUA e na maioria dos países europeus o bioetanol é essencialmente produzido a partir de cereais, principalmente milho. Produção de àlcool principalmente milho. Fermentação alcoólica é o processo através do qual certos açúcares, principalmente a Sacarose, Glicose e Frutose são transformados em Álcool Etílico (ou Etanol). Definição transformados em Álcool Etílico (ou Etanol). Mecanismo anaeróbio de produção de energia que não envolve cadeia respiratória ou citocromos. Equação da fermentação Balanço energético da fermentação O etanol pode ser produzido a partir de qualquer carboidrato fermentável pela levedura . Classificação das matérias-primas: - açucaradas Matérias-Primas - açucaradas - amiláceas ou feculentas - celulósicas Matérias açucaradas - diretamente fermentescíveis: monossacarídeos - sucos de frutas - não diretamente fermentescíveis : dissacarídeos – sacarose da cana-de- Matérias-primas - preparo dissacarídeos – sacarose da cana-de- açúcar e dos melaços Matérias celulósicas - fermentam após hidrólise Dissacarídeos Hidrólise(inversão) Açúcar fermentescível Matérias amiláceas e feculentas - fermentam após hidrólise do amido – sacarificação: * via química * via enzimática Matérias-primas - preparo * via biológica direta - Ação enzimática do malte - Ação microbiana de certos fungos Agente de fermentação: Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces sp * O etanol é inibidor à altas concentrações, e a tolerância das leveduras é um ponto crítico para Fatores que afetam a fermentação tolerância das leveduras é um ponto crítico para uma produção elevada deste metabólito primário. * A tolerância ao etanol varia, consideravelmente, de acordo com as linhagens de leveduras. Temperatura - 26 a 35°C (chega a 38 °C) pH - mostos industriais: 4,5 a 5,5 Nutrição mineral e orgânica - fonte de carbono Fatores que afetam a fermentação - fonte de carbono - vitaminas: tiamina, ácido pantotênico - Nitrogênio: sais de amônio - Sais minerais: P, S, K, Mg, Ca, Zn, etc Sistema de Fermentação Obrigado!Obrigado!
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