Ativação e Diferenciação de Linfócitos T

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ATIVAÇÃO E DIFERENCIAÇÃO DE LINFÓCITOS T
O que os linfócitos B e T tem de especial que chamamos de células da imunidade adaptativa?
• Elas precisam ser ativadas pra que possam exercer sua função; 
• Especificidade – reconhece diferentes epítopos;
• Essas células apresentam receptores únicos, cada uma delas apresenta 1 receptor:
 • linfócito T – receptor TCR
 • linfócito B – receptor BCR
Cada TCR possui um sito de reconhecimento que é diferente pra cada célula!
 CD4 e CD8 são ptns de membrana e funcionam como co-receptores (auxiliar, mas fazem parte da resposta). 
Onde estão os linfócitos? No linfonodo (são linfócitos T virgens) e no baço.
Como vc faz uma célula ir pra algum lugar? via quimiocinas e receptores!!
Onde são produzidos os linfócitos? Na medula óssea. Ai o precursor do linfócito T sai de la e vai pro timo, e la vai se tornar linfócito T (vai ser amadurecido). Se tornar um linfócito T significa ganhar um receptor! Esse receptor é funcional, mas a célula é virgem.
Pq um linfonodo nosso cresce quando estamos num processo infeccioso?
temos o linfonodo cheio de linfócitos.
quando temos linfócito T + ptn + cel apresentadora gera a ativação do linfócito que vai levar a expansão clonal*, ou seja, o linfonodo duro é a proliferação dos linfócitos! 
*a expansão clonal nada mais é do que a proliferação de clones, ou seja, proliferação de varias células iguais!
Pq a gente não responde toda hora contra a gente? Pq a célula dendritica precisa ter entrado em contato com um patógeno, precisa ser estimulada por um PAMP pra conseguir ativar o linfócito T, ela não se liga em qualquer coisa.
Várias regiões vão estar em contato com antígenos – mucosas (microbiota), intestino (ptns da dieta).
Células M – transcitose
Células dendríticas – captam para apresentar
Uma alternativa da gente apresentar antígeno sem ser pela via da mucosa: por meio de um corte; vetor invasivo 
A célula dendritica imatura tem pouca expressão de MHC de classe II; quando entra em contato com um patógeno, aumenta o MHC de classe II.
Relembrando....
MHC de classe II via endocítica – fagocita – processa – encontra o MHC de classe II e apresenta pra célula TCD4;
MHC de classe I (intracelular) via proteassomo – vai pro reticulo via TAP – se liga no MHC de classe I e apresenta pro TCD8.
Se vc tiver uma celula dendritica apresentando e não tiver as moléculas co estimuladoras, vc não tem a proliferação de células. E vai induzir anergia – faz com que o linfócito deixe de ser funcional, ou seja, ele não vai responder mais. 
ATIVAÇÃO.
Interação do 1º sinal e interação com 2º sinal
1º sinal: TCR ligado no MHC+pep (ele só reconhece MHC com pep!!!)
é um erro muito comum as pessoas falarem que o TCR se liga no pep, mas ele se liga NO MHC COM O PEP, não apenas em um ou outro. 
O CD4 vai estar se ligando ao MHC de classe II
O CD8 vai estar se ligando ao MHC de classe I
2º sinal: moléculas co-estimuladoras
o linfócito tem a molécula chamada CD28 e a célula apresentadora tem B7 (CD80) ou CD86; todo linfócito tem o CD28 mas nem toda célula dendritica tem o B7! Quem vai estar expressando o B7 vai ser quem teve contato com os PAMPs (quem amadureceu). Gerou expansão clonal.
O que poderia acontecer pra essa célula que estava no G0 sem se dividir, passar a se proliferar?
fator de crescimento; vc precisa que essa célula seja estimulada a proliferar; uma molécula que faz essa célula proliferar; seria uma molécula autócrina, vc vai ter que estimular ela a se ativar e ela mesma vai produzir moléculas que vão fazer ela proliferar.
Quando a célula dendrítica ta ativada ela expressa moléculas que facilitam a adesão; por isso se chama de sinapse imunológica – pq a adesão é intensa para que vc possa sinalizar praquela célula!
Para ativação, um sinal externo precisa ser transformado em sinal interno.
Toda cascata de sinalização tem que gerar segundos mensageiros que são moléculas que amplificam o sinal e induzem fatores de transcrição que vão pro núcleo e estimulam a síntese de moléculas (no caso citocinas) que dependendo da quantidade vão ativar ou não a célula.
O TCR apesar de ser transmembrana, ele não possui cauda intracelular. Ele precisa do complexo TCR (CD3) que são mol que tem cauda intracelular que vão permitir a sinalização. O CD3 possui os motivos ITAMs que podem ser fosforilados. Quando esse receptor TCR se ligar, ocorre a fosforilação do complexo CD3 e vai começar a sinalização. (se não houver CD3 não há ativação de linfócitos T pois sem ele não há sinalização e o TCR não se liga)
Vc tem duas células que estão la que primeiro vão se aderir por moléculas de adesão, se isso tiver condições vai estimular a interação. Tendo o primeiro sinal, o TCR se ligou no MHC de classe II e o CD4 se ligou no MHC de classe II, então o que acontece???? vai acontecer a fosforilação dos motivos ITAMs ou seja, vai ter ativação do complexo!!!!
Na figura o “antigen-presenting cell” representa a célula apresentadora (no caso celula dendrítica) onde o MHC de classe II está ligado. O TCR se liga ao MHC de classe II + pep, vai ocorrer a fosforilação do complexo TCR (CD3) e o CD4 se liga no MHC de classe II. Toda essa série de eventos vai levar a fosforilação da ZAP 70 (ativada). 
Os segundos mensageiros gerados nessa cascata de sinalização vão ser: IP3 (inositol trifosfato) e DAG (diacilglicerol). 
>se perguntar sobre ativação, não pode deixar de falar disso, que essa ativação vai produzir segundos mensageiros<
IP3
Estimula o fluxo de cálcio – vai abrir os canais de cálcio – vai aumentar o cálcio extracelular – ativar calcineurina – vai desfosforilar a NFAT. Ou seja, vai ativar a NFAT.
OPA!!!!! O que é a NFAT? Um fator de transcrição! Ele vai pro núcleo ativar transcrição. 
DAG
Ativa a ptn G – gera RAF que gera MEK que gera ERK (RAF MEK ERK). ERK é fator de transcrição e ativa a AP-1 que também é um fator de transcrição – vai atuar no núcleo.
Outra forma:
quando vc ativa o DAG vai ter uma cascata que vai degradar os inibidores de NFKB que vai liberar ele de forma ativa e ele vai poder ir pro núcleo. 
3 fatores de transcrição: NFAT, AP-1 e NFKB. Eles atuam no núcleo na ativação da transcrição de alguma coisa, o que? Um fator pra estimular proliferação daquela célula. Os 3 são fatores de transcrição pra uma mesma molécula: citocina IL-2!!
 IL-2 é um fator de proliferação de linfócitos. Se vc pega um linfócito e joga IL-2 com uma pipeta vc vai estimular a proliferação dele. 
Vai ter muito IL-2 disponível? Não. É autócrino, o que ele produzir que vai interagir com ele. 
Vc libera o NFKB – vai pro núcleo. Estimula a transcrição do gene de IL-2.
Pq então o 1º sinal não é o suficiente se vc já produz o fator de proliferação?
se vc tiver a interação do 1º sinal e não tiver o 2º sinal, acontece a anergia do linfócito, ele não prolifera. Logo, o 2º sinal é essencial. 
O que o 2º sinal vai produzir de tão importante? 30x mais IL-2!!!
Teve interação do 1º sinal, teve interação do 2º sinal, vc vai ativar a fosforilação. O CD28 ligando no B7 vai ativar o que? NFKB e AP-1. Vão ativar a transcrição de IL-2. 
NFKB e AP-1 aumentam em 3x a transcrição e aumenta a estabilidade do RNAm. O que isso gera? uma tradução 30x maior da proteína IL-2. Nesse momento vc vai produzir IL-2 suficiente pra tirar o linfócito do G0 e ir pro G1 e começar a proliferar. 
Não é só ter IL-2, tem que ter IL-2 numa quantidade o suficiente pra célula produzir e se auto-ativar a uma resposta autócrina. Por isso a necessidade do 2º sinal, pra produzir 30x mais IL-2!
 
**na realidade são muitos complexos TCR (no mínimo 10) se ligando no MHC+pep e essa ativação é fraquíssima e geralmente não produz! Pra ter uma resposta imune ativando o linfócito T, precisa de 100 a 1000 MHC+pep se ligando ao TCR** 
Célula dendritica apresentando pro linfócito T – 1º e 2º sinal – produção da citocina IL-2 – ela vai ser secretada e vai interagir no linfócito T. Então o que o linfócito T tem que ter? Receptor pra IL-2!!
O receptor do IL-2 tem 3 cadeias:gama, beta e alfa. Quando o linfócito T é virgem, ele não tem a cadeia alfa. 
O que isso faz no receptor? Vc produz IL-2, a quantidade pra ativar o receptor tem que ser muito alta por isso vc precisa dos 2 sinais. Quando essa célula é ativada pelo próprio IL-2 ele auto ativa e passa a expressar a cadeia alfa. Isso aumenta a afinidade do receptor, então uma menor quantidade de IL-2 passa a ser suficiente pra proliferar e sobreviver esse linfócito. 
Pq é interessante vc responder mal quando é virgem e responder bem quando tá ativado?? Vc precisa produzir muito IL-2 pra ativar então vc ta garantindo um controle que só quando tiver o segundo sinal vc vai ter IL-2 o suficiente pra ativar essa célula. Eh um mecanismo de controle que faz a dificuldade de ativar. Quando ativa, agora fica mais fácil sobreviver a essa célula. 
O linfócito já é efetor, ele sai do linfonodo e vai lá no sítio da infecção (um macrófago, por exemplo – apresenta). Vai ter o MHC+pep que interage com o TCR daquele linfócito, ele vai precisar do segundo sinal no sitio da infecção? Não!! Pois ele já possui a cadeia alfa do receptor, já tem afinidade bem alta pelo IL-2. Só o 1º sinal gera capacidade suficiente pra ele produzir um monte de citocinas loucamente.
É um processo totalmente evolutivo que dificulta ativar mas que no final vai facilitar o funcionamento. O nome dessa molécula é CD25+
o CD25 é um receptor que passa a ser expresso e aumenta a afinidade pela IL-2 que aumenta muito mais a sobrevivência. É crucial pq no futuro quando vc tiver apresentação, vc só precisa de um sinal pra que isso gere resposta, vai precisar de muito menos IL-2; e vai sobreviver mais fácil, proliferar mais fácil.
Resumindo a primeira parte da aula....
tudo o que foi dito é o que acontece na sinapse imunológica: célula dendritica interagindo com o linfócito pra fazer a expansão de um clone patógeno-especifico. Essa interação tem que produzir IL-2 pra que autocrinamente ele possa ser ativado a proliferar. 
Proliferou o linfócito...pra que? O que esse linfócito faz?? Modula toda a resposta imune inata através da produção de citocinas, tanto que antigamente as citocinas eram chamadas de LINFOCINAS. 
Então o linfócito TCD4 produz citocinas!!!!
Se a função do linfócito é produzir citocinas, o que tem que acontecer pra gente poder responder contra diferentes patógenos? (ajudar no combate de um vírus e não de uma bactéria, por exemplo)
produzir diferentes citocinas pois diferentes citocinas possuem diferentes funções.
por isso que vc responde contra vírus em uma, contra bactérias extracelulares em outras.
DIFERENCIAÇÃO.
Os linfócitos podem virar subpopulações – pequenos grupos que existem dentro do “grupão” TCD4.
3º sinal: citocinas no microambiente.
Subpopulações principais: th1, th2, célula T reguladora e th17.
O que significam subpopulações diferentes? Linfócitos que vao produzir diferentes citocinas.
Qual a diferença do linfócito th1 pro linfócito th2? A citocina que cada um produz!!!
•Th 1 produz interferon gama
•Th2 produz IL-4
•T reguladora produz IL-10 (TGF beta)
•Th17 produz IL-17
Como uma célula T pode virar qualquer uma dessas 4 subpopulações? Através da citocina (que vai estar sendo secretadas pela célula dendrítica) presente no microambiente. 
Ou seja, dependendo da citocina que vai ser produzida, vai levar ao estímulo pra célula T se diferenciar. 
Paradigma do th1/th2 (descoberta por: Mosmann e Coffman):
- existência de 2 clones distintos de células T:
•th1 associado a dano tecidual, resposta parasitária e produção de igG
•th2 associado a alergia, resposta contra helmintos e produção de igE
sabiam com o que cada subpopulação estava relacionada mas não sabiam como isso acontecia; uma das coisas que ele perceberam é que tinha uma relação cruzada: quando tinha th1 não tinha th2 e quando tinha th2, não tinha th1 – por isso um paradigma.
O 3º sinal é a citocina que é secretada pela célula dendritica que vai se ligar no receptor e ele quem vai estimular a diferenciação do linfócito T. 
Célula dendritica – célula educadora, pois é ela quem “decide”, “direciona” o linfócito a ser th1, th2 através da citocina que vai ser secretada. 
Existem 2 citocinas que podem estimular o linfócito T a ser Th1: interferon gama e IL-12 (secretada pela célula dendrítica).
O IL-12 vai ativar o receptor de IL-2, este vai ativar o STAT4;
O STAT4 (segundo mensageiro) quando ativado, dimeriza e ativa o T-bet – fator de transcrição;
O T-bet vai pro núcleo e ativa a transcrição do interferon gama.
Então pq o linfócito Th1 produz interferon gama? Pq ativa o T-bet que age no núcleo produzindo interferon gama. 
Ao mesmo tempo esse T-bet inibe a produção de IL-4. Quem que produz IL-4? O Th2! Ou seja, comprova que quando tem Th1, não tem Th2 pois ela se auto regulam. Como? O próprio fator de transcrição que ativa th1, inibe o th2.
Célula da imunidade inata que produz interferon gama: NK (natural killer). A gente pode ter interferon gama no início ajudando na diferenciação pra th1, mas quem geralmente vai estar presente no início é a IL-12 pq a célula dendritica produz o IL-12. 
Uma célula que produza interferon gama também pode participar desse processo. No caso se tiver interferon gama e ele se ligar no seu receptor, vai ativar a STAT1 que ativa T-bet – transcreve interferon gama e inibe th2.
No caso da leishmania: o linfócito vai produzir interferon gama, este tem um receptor no macrófago. Quando o interferon gama interage com o macrófago, ele ativa o buster oxidativo – que é a produção de NO e ROS. Ou seja, aumenta a respiração da célula. Se vc produz mais NO e ROS, esse macrófago se torna “matador”. Ele não estava pronto pro macrófago de verdade, mas quando vc coloca o interferon gama, a história muda. Ao invés de produzir um pouco de NO, vai produzir muito NO e muito ROS. 
ou seja, a resposta adaptativa regula a imunidade inata. No caso do macrófago: aumenta a capacidade de matar. E aumenta muito a capacidade de fagocitar pois estimula a produção de anticorpos do tipo igG (opsonizantes). 
A leishmania serviu muito pra entender esse paradigma th1/th2:
C57BL/6: quando infecta com a L major, vc tem a doença mas ela é resolvida pq ele produz muito interferon gama que ativa o macrófago e mata via produção de NO;
BALB/c (albino): péssimo produtor de interferon gama mas ótimo produtor de IL-4; ou seja, o animal fica suscetível e não resolve a infecção. A pata cresce até cair.
Isso ajudou pois se viu que no C57BL/6 tinha interferon gama e no BALB não, tinha IL-4.IFN gama KO: ai pegaram um camundongo que era KO (knock out) em interferon gama, a lesão ficou horrível, o que mostra que o interferon gama é essencial pro controle da infecção visto que ele vai ativar a produção de NO e ROS no macrófago; a enzima que induz essa produção é a iNOs (NO induzida), quando tem interferon gama aumenta a expressão dessa iNOs que produz mais NO
iNOs KO: se vc usa um KO pra iNOs fica muito pior, pois não tem produção de NO, então a leishmania faz a festa;
IL-12 KO: célula dendrítica produz o IL-12 que vai ativar o linfócito T virgem a virar th1 que produz interferon gama que vai ativar macrófago a produzir NO; se vc usa um KO pra IL-12, não será gerada essa resposta.
STAT4 KO: é induzida por IL-12; 
STAT1 KO: é induzida por interferon gama; 
Mostra que todas essas vias são importantes pra ter a resposta a th1; qualquer ponto que corte da via, já era. No caso não pode tirar nem IL-12, nem interferon, pois tudo influencia na resposta do th1.
 
Produz IL-4 e outra duas citocinas: IL-5 e IL-13. Mas a citocina que induz a diferenciação pra th2 é a IL-4!!!
O IL-4 se liga no receptor de IL-4 que vai ativar o STAT6 (segundo mensageiro; porém também é um fator de transcrição). Este vai ativar o GATA3 que é o fator de transcrição. Ele vai pro núcleo ativando a transcrição das citocinas IL-5, IL-13 e IL-4 e também vai inibir a produção de interferon gama pois se tem th2 não tem th1. 
OBS.:((Isso tudo acontece no linfócito mas a citocinafoi produzida pela célula dendrítica))
IL-4 e IL-13: produção de muco quando estamos gripados; aumentar a contração muscular; alergia; produção de igE
(quem tem alergia é um super th2)
Th17
IL-23 é da mesma família da IL-12 porém não induz th1
IL-23 é produzida pelo macrófago e células dendríticas
Onde tinha IL-23 tinha IL-17 e tinha as doenças inflamatórias, crônicas
Essa população é diferente das outras populações pois o IL-23 não é um estimulador de diferenciação, ele é um estabilizador de fenótipo. Ou seja, mantem a característica da célula. 
o IL-23 faz com que a célula continue sendo th17, sem a IL-23, deixa de ser th17 e vira outra célula
((Onde uma resposta th1 vai ter produção de IL-12? No linfonodo pq a cel dendr vai produzir IL-12 pro linf virar th1. E no sitio da infecção o linf vai produzir interferon gama.))
 No microambiente ou na célula dendrítica tem que ter TGFbeta+IL-6 ou TGFbeta+IL-21 pois são as citocinas que fazem o direcionamento pra virar th17.
A cel dendrítica produz IL-6 e este se liga no receptor de IL-6 do linf e induzir o segundo mensageiro STAT3 – vai estimular a produção de RORgamaT. O TGFbeta vai produzir RORgamaT diretamente. O RORgamaT estimula a produção de IL-17 e IL-21 (ajuda na diferenciação do linfócito). 
Ao mesmo tempo no sistema tem que ter IL-23 que vai ativar a própria STAT3 que estimula RORgamaT.
Então, o que o linf Th17 produz? 
IL-17
IL-21
IL-22
(a IL-17 é a mais importante, as outras são detalhe)
O th1 e o th2 quando estão totalmente diferenciados, eles não mudam, vão ser th1 e th2 pra sempre. Já a th17 não, se a IL-23 for retirada e for colocado IL-4, a célula vai se diferenciar pra th2. Isso se chama “fenótipo frouxo”.
Se for cortada a IL-23 e não for adicionada outra citocina, a cel vai ser uma má produtora do seu fenótipo de th17
Monoclonal anti-IL-23: vc bloqueia o IL-23 fazendo com que aquele linfócito deixe de ser th17 e pode introduzir uma outra citocina pra auxiliar na diferenciação do linfócito novamente.
Se vc bloqueia o IL-23 mas vc tem um ambiente que tem TGFbeta, vc gera possibilidade dessa célula virar uma célula T reguladora (Treg) visto que o fator de indução desta é TGFbeta+IL-2. A Treg vai ser a célula que vai curar o dano que a th17 fez; se tiver muita Treg e pouca th17 causa um descontrole da microbiota e se tiver muito th17 e pouca Treg é doença inflamatória. 
Isso nos mostra que há um equilíbrio entre elas e estas células são auto-reguladas.
FUNÇÕES DA IL-17:
•Sinergia com IL-1beta, TNFalfa, INFgama – gera alta resposta inflamatória e consequentemente o recrutamento de células;
•Produção de citocinas pró-inflamatórias (IL-6) e NO (reativos de oxigênio) que geram muita inflamação;
•Estimula produção de G-CSF e GM-SCF que são fatores de crescimento de colônias que estimulam mieloides (macrófago e neutrófilo);
•Recrutam muito monócito e neutrófilo;
LOGO, a IL-17 (no caso o th17) É SUPER INFLAMATÓRIA!!!! A principal função é a resolução de patógenos extracelulares pelo recrutamento de neutrófilos, impedindo que a microbiota entre pra dentro da célula
CÉLULA T REGULADORA.
Induz/ativa uma célula que inibe/desativa a resposta imune. 
A Treg pode inibir todas as células! Em 1985 foi visto que a timectonia (retirada do timo) causava autoimunidade sistêmica visto que no timo não há produção apenas de células inflamatórias, também há produção de células que vão estar suprimindo a resposta imune (no caso as células Treg).
Fenótipo da Treg: CD25+FoxP3+
Vc bota suas células na câmara e uma célula por vez vai passar por um laser; vc vai colocando anticorpos ligados na célula que vão ter cores diferentes; PE (eixo y) representa a cor laranja e V450 (eixo x) representa a cor roxa; se vc tem uma célula que é laranja, ela vai estar pra cima do lado esquerdo; as células que não são nem laranjas e nem roxas, vão ficar situadas no quadrante debaixo no canto esquerdo; as células que são roxas ficam no quadrante debaixo no canto direito; as células que são roxas e laranjas ficam no quadrante de cima do lado direito, e estas são as positivas pra CD25 e FoxP3 (CD25+FoxP3+).
OBS.: quando o IL-2 ativa o linfócito T (cadeia alfa do receptor de IL-2), ele passa a expressar o CD25 pra ter alta afinidade pela IL-2 e não precisar de tanto IL-2 no sistema.
A célula Treg é gerada no timo. Elas eram chamadas de células Treg naturais, porém esse nome caiu e agora são chamadas de células Treg tímicas; elas já saem do timo como células reguladoras. (já saem com o fenótipo CD25+FoxP3+)
10% dos linfócitos que produzimos, são células Treg tímicas!!! 
Células que saem do timo: 
•TCD4 virgem (ou seja, CD25 negativa [CD25-] pois não foi ativada pelo IL-2 pra produzir CD25);
•A que foi ativada pra ser Treg vai ser TCD4+ (efetora), CD25+ e já expressa o FoxP3;
Uma célula virgem é aquela que os fatores de transcrição são todos negativos. Ela sai do timo T-bet -, GATA3-, RORgamaT- pois ainda não foi diferenciada.
DIFERENCIAÇÃO DE nTREG
Interação com TCR e são centrais no desenvolvimento de Treg – indução de FoxP3; TCR ligando no antígeno lá no timo;
TCR com alta afinidade por antígenos próprios; o TCR se liga no pep+MHC, sendo que o pep é nosso, por isso que ele reconhece antígenos próprios; é super inteligente ter uma célula Treg contra antígenos próprios pois se algo der ruim, essa célula vai conseguir eliminar células que vão responder contra a gente (nosso corpo);
Precisa do CD28, ou seja, tem que ter ativação (1º e 2º sinais);
Participação da TGFbeta e IL-2; IL-2 precisa estar pois ele possui CD25 high
CÉLULA Treg INDUZIDAS
Células que saíram virgens do time e estão na periferia (linfonodo); uma célula dendrítica se tiver os fatores TGFbeta, IL-2, ácido retinóico (vem da vitamina A), vai gerar uma célula que é Treg induzida. Tem muito dessas células no intestino visto que lá há muito ácido retinóico e este é um co-fator essencial pra gerar célula Treg.
Precisamos ter mais células Treg no intestino pois toda hora estamos inserindo antígenos, então respostas Treguladoras induzidas tem que ser geradas contra antígenos da dieta e da microbiota, se não não podemos comer. A gente pode comer e não morremos devido às células Treg, sem elas há um desbalanço, pois é ela quem faz a gente não responder, não gerar inflamação de antígenos que inseríamos através da dieta.
(a maioria das doenças intestinais vem da ausência de células T reg induzidas)
Ao contrário das células T reg tímicas que são produzidas no timo e são contra antígenos próprios, as células T reg induzidas são induzidas em contato com o antígeno, principalmente no intestino, ou seja, são antígenos não próprios (ou da dieta ou da microbiota).
Elas têm os mesmos fatores: FoxP3 e STAT5
FUNÇÕES DAS Treg:
•Controle de células auto reativas pra que vc não se auto ataque;
•Manutenção de sítios de imuno privilégio (intestino e alguns outros sítios); o intestino é extremamente complexo pois tem muitas respostas imunes acontecendo o tempo todo, então precisa de uma capacidade de regular isso de forma brilhante;
CARACTERÍSTICAS DAS Treg:
•Não se proliferam; uma vez que vira Treg, ela não se prolifera mais, não se expande;
•É uma má produtora de IL-2 e não produz nem IL-4 e nem INFgama
CONTROLE DA SUPRESSÃO DAS Treg:
•Produz as citocinas TGFbeta e IL-10 – são citocinas extremamente inibidoras; se vc pipeta TGFbeta num macrófago, vai inibir a produção de NO na hora, mesmo tendo um patógeno dentro do macrófago; também inibe a proliferação de linfócitos; uma forma de inibir a resposta imune adaptativa é inibindo a expansão do clone pois quanto mais células do clone, mais citocinas, então inibindo a expansão desses clones, não vai haver a produção de citocinas.
•CTLA-4: inibidor; compete com o B7 e CD28, pois a molécula co estimuladora vai ativar a proliferação, se ligar o CTLA-4 essa resposta vai ser inibida então não haverá proliferação;
•LAG 3: é um ligante de alta afinidade com o MHC de classe II, então quando ela se liga ao MHC, ela impedea ligação do TCR; também tem uma sinalização que desativa a célula dendrítica e mantém ela como uma célula dendrítica*
*lembrando que a célula dendrítica pra ativar precisa do MHC+pep na membrana e moléculas co estimuladoras, manter ela imatura significa não ter moléculas co estimuladoras na membrana, então ela não ativa o sistema imune
•Galectina 1: induz apoptose de linfócitos;
•CD3/CD46: leva também a morte da célula por apoptose;
O que precisamos saber: a célula T reg é uma célula com alta capacidade de inibir a resposta tanto do linfócito T quanto da célula dendrítica, gerando uma inibição da resposta imune adaptativa. 
Quando a célula Treg se liga à célula dendritica, o CTLA-4 se liga no B7, ativando a inibição dessa célula dendrítica pois não haverá a ligação do CD28 ao B7. Ou seja, há uma sinalização pra que essa célula dendrítica fique imatura. Esse sistema garante que outras células não sejam geradas pois não é um sistema que apenas mata a célula que está proliferando (no caso a célula dendritica) mas também inibe a indução de novas células pq vai inibir a célula dendrítica.
(Comentários:
1 citocina é produzida por 1 célula
Poucas células produzem mais de 1 citocina
Na vacinação a gente gera células multifatoriais, ou seja, que produzem mais de 1 citocina)
Esses perfis têm respostas antagônicas e todos eles são regulados, todos se inibem. Quando ta expressando th17, não vai gerar nenhuma outra pois ela inibe as outas. Porém, também existe a plasticidade!!
Plasticidade: capacidade da célula de mudar o seu fenótipo, 
ou seja, uma célula se transformar em outra célula!A th1 e a th2 totalmente diferenciadas (late th1 e late th2) não são capazes de se transformar em outra célula. Porém, quando elas ainda estão em processo de diferenciação, elas podem ser desviadas para virarem outra célula. A early th1 pode virar Treg, early th17, early th2. Isso acontece pois no processo inicial de diferenciação ainda não tem T-bet o suficiente pra estabilizar a célula. 
A Treg e a th17 mesmo quando totalmente diferenciadas podem ser capazes de se transformarem em outra célula. Ambas podem virar tanto th1 quanto th2. Ou seja, são plásticas!*
Dependendo do grau de diferenciação, vai ter diferentes capacidades de diferenciação;
*o que faz a Treg e a th17 virarem outras células é a citocina no microambiente
ATIVAÇÃO DE LINFÓCITOS TCD8+
É exatamente igual ao TCD4+; 1º sinal do MHC+pep ligado ao TCR+CD8; 2º sinal B7 – CD28; 3º sinal é o interferon do tipo 1 e IL-12
Pq a evolução colocou o interferon do tipo 1 pra ser o ativador das células TCD8+? A célula TCD8 é citotóxica, ela mata células tumorais ou infectadas com vírus. Todas infecções virais induzem o interferon do tipo 1 (toll like receptors – TLR3, TLR7, TLR8, TLR9, RIG) via TRIF. 
O interferon do tipo 1 pra fazer o linfócito TCD8 se tornar efetor!!!
O IL-2, assim como na TCD4, ele é essencial pra proliferar o TCD8. Porém, o TCD8 é um mau produtor de IL-2, então ele precisa da exposição de CD4 pra que o linfócito TCD4 produza muito IL-2. Não tem como ter TCD8 sem ter TCD4!!!
Só tem anticorpo (vacinas) e linfócito TDCD8 se tiver TCD4!!!!
Toda célula nucleada tem MHC de classe I
A célula TCD8 efetora tem o TCR que vai reconhecer o pep viral. A célula infectada vai ter o pep do vírus no MHC de classe I pois o vírus ta no citoplasma e a ptn vai pro proteassomo pra ser degradada. 
O grito de socorro de uma célula infectada é o MHC de classe I com o pep viral na superfície e a CD8 acha (1º sinal). Não vai precisar do 2º sinal pois já é efetora. 
A morte da célula infectada é feita por duas vias: 
•perforina granzima-A: secreta perforina que forma poros e secreta granzima-A que são enzimas que ativam a caspase 9 – apoptose
•fas – fas ligante: induz caspases – caspase 9 – apoptose
Resumindo.....pro linfócito TCD8 matar ele tem que reconhecer o MHC de classe I+pep viral e matar por via de indução à apoptose!! 
((existem células TCD8 reguladoras e supressoras porém como são pouco estudadas, não vai ser cobrado))
PARA CÉLULA EFETORA: apresentação via TCR porém não precisa do co-estímulo (2º sinal) – (ao contrário da célula virgem que pra se tornar efetora precisa do 2º sinal)
•quando vc ativa e começa a proliferar no 1º dia, há células efetoras e parte dessas células já viram memória; as células de memória não entram em apoptose, mas as efetoras sim!
•de 4 a 14 dias vai ter muita célula efetora, parte delas vão virar memória e o restante que não virou vai sofrer apoptose!
•e quando tiver uma infecção, a maioria das células vão morrer por apoptose e vão restar poucas de memória!