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Gabrie lla D ia s HEMATOLOGIA BIOQUÍMICA CLÍNICA (Proteínas, Função hepática, Função pancreática) PLASMA • Água: 91,5% • Proteínas plasmáticas (albumina, globulinas e fibrinogênio): 7,0% • Sais inorgânicos, íons, lipídeos, carboidratos, enzimas, vitaminas, hormônios e outros: 1,5% PLASMA x SORO Proteínas Plasmáticas: quantidade de albumina, globulinas e fibrinogênio presentes no plasma. → Para a realização do exame utilizamos, o material coletado no tubo roxo, com anticoagulante, passamos pela centrífuga para a separar as células e medimos o total de proteínas. → Não utilizamos bioquímica nessa técnica, utilizamos refratometria → Não é um método que possui tanto precisão quanto o bioquímico Albumina: responsável pela pressão oncótica; mantém o líquido dentro dos vasos → Um indivíduo com baixa quantidade de albumina apresentará edema, pois o líquido se moverá para o espaço extravascular. → Não é possível aumentar a produção de albuminas, pois sua síntese está diretamente relacionada ao DNA dos hepatócitos. Esses hepatócitos produzem albumina conforme sua capacidade de produção genética. • Caso o teste mostre um excesso de albumina, geralmente está relacionada a perda de líquido. → A desidratação é a causa mais importante de hiperalbuminemia. Globulinas: gamaglobulinas (anticorpos) → Se o paciente estiver passando por um processo patológico e imunogênico, no qual o sistema imunológico esteja sendo desafiado e comece a produzir mais anticorpos, o exame pode revelar um aumento de globulinas e fibrinogênio (especialmente nas reações inflamatórias agudas) - ruminantes e equinos são mais evidentes. → Em ruminantes, não se observa uma leucocitose imediata. Portanto, podemos utilizar o aumento do fibrinogênio como parâmetro para identificar uma reação inflamatória aguda. • Se realizarmos a dosagem de proteínas plasmáticas, os resultados podem estar dentro do limite de referência (sem alterações), acima do valor de referência (hiperproteinemia) ou abaixo do valor de referência (hipoproteinemia) • Com o exame de refratômetro, não é possível identificar qual proteína está aumentada ou reduzida. • A diminuição de globulinas pode estar relacionada à imunossupressão, enquanto o aumento de globulinas está associado ao aumento da estimulação antigênica SORO Para a avaliação do soro não é necessário o anticoagulante, o material é coletado no tubo vermelho ou amarelo para a formação do coágulo. - Após a coleta, o material coletado nos tubos vermelho ou amarelo não deve ser levado imediatamente para a geladeira, pois o resfriamento retardará o processo de coagulação e promoverá hemólise da amostra. Apenas as amostras coletadas no tubo roxo devem ser refrigeradas de forma imediata. - No soro, encontraremos albumina e globulinas, mas o fibrinogênio estará ausente, pois ele se transforma em fibrina para a formação do coágulo. Proteínas totais: medição da albumina com globulinas no soro → Este exame é realizado por meio de um teste bioquímico, utilizando reagentes e equipamentos para a leitura. → É um exame de maior precisão Se dosarmos a proteína plasmática e a proteína total simultaneamente no mesmo animal, a dosagem da proteína plasmática será maior devido à presença de fibrinogênio. Além dos resultados semelhantes de hipoproteinemia e hiperproteinemia, na avaliação do soro podemos realizar uma segunda dosagem, especificamente de albumina. Se subtrairmos o valor da albumina do valor das proteínas totais, obteremos o valor das globulinas (são proteínas séricas). Gabrie lla D ia s Proteínas séricas: Proteínas totais - Albumina = Globulinas Exame: proteínas totais e frações • Podemos solicitar um exame de proteínas totais, que indicará a presença de hipoproteinemia ou hiperproteinemia, e também um exame específico para a dosagem de albumina, que revelará a presença de hipo ou hiperalbuminemia • A hipoalbuminemia pode estar relacionada à dieta (uma vez que a proteína precisa ser sintetizada), à falha na absorção devido a problemas intestinais, e a problemas hepáticos e renais (falha na filtração renal). Proteínas totais e frações: o laboratório realiza a dosagem de proteínas e albumina para posteriormente calcular o valor de globulinas. - É o exame mais pedido - O valor de globulina é calculado, não existe um teste que realize a dosagem de globulinas. - Entrega o valor de proteínas totais, albumina e globulinas. Taxa A/G = n° de albumina / n° de globulina = > ou = 1 - Normalmente, a quantidade de albumina é maior do que a soma de todas as globulinas. - A albumina é a proteína mais abundante no sangue - Se o valor de albumina for baixo, a taxa A/G também será baixa - Se o valor de globulina for alto, a taxa A/G irá diminuir A diminuição da albumina ou o aumento das globulinas leva à inversão da taxa A/G O histórico completo (anamnese) e o exame físico do paciente são essenciais para a interpretação correta dos dados hematológicos. ELETROFORESE (PROTEÍNAS SÉRICAS) Método laboratorial para separar as proteínas presentes no plasma em frações, de acordo com suas respectivas cargas elétricas - Teste de triagem mais utilizado para investigação de anormalidades proteicas presentes no sangue. Nesse exame, depositamos a amostra em cada canaleta do gel. O gel, sob a influência de uma carga elétrica, atrai as moléculas, fazendo com que as proteínas se desloquem pelos poros presentes. Dependendo do tamanho da proteína, ela pode ficar retida nos poros, resultando em um acúmulo. Durante o procedimento, adicionamos um corante azul para identificar em qual canaleta ocorreu o maior acúmulo. No exemplo acima, a canaleta identificada como A apresenta uma banda mais evidente. Esta banda corresponde à Albumina, que é a proteína individual presente em maior quantidade no soro. Existe um leitor capaz de ler a intensidade de cada banda e montar gráficos de acordo com cada resultado. → Perfil eletroforético de proteínas séricas de um paciente normal → Teste complementar → Este teste é realizado quando há alterações no teste de proteínas totais e frações. Ele nos revela qual globulina está aumentada. → É um exame pouco solicitado (pode ser por falta de conhecimento e dificuldade de interpretação) → Não são todos os laboratórios que fazem No exemplo ao lado temos o perfil eletroforético de um paciente com hiperglobulinemia. → Presença do aumento de imunoglobulinas → Por ser um teste de alta precisão, é possível identificar qual imunoglobulina está em maior quantidade com base no local do pico identificado. - No exemplo ao lado, o paciente B apresentou um aumento de IgM (anticorpos de fase aguda) HEMATOLOGIABIOQUÍMICA CLÍNICA(Proteínas, Função hepática, Função pancreática)