Histopatologia: Técnica e Coloração

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Histopatologia
Universidade Federal de Ouro Preto
Instituto de Ciências Exatas e Biológicas
CBI 610- Patologia Geral
Ouro Preto/ 2016
Daiane Rezende
Jéssica Emiliana
Lorena Filgueiras
Tatiane Maria dos Santos
Wilson
O QUE É HISTOPATOLOGIA?
Estudo de como uma doença específica afeta um conjunto de células (tecido).
OBJETIVO
Informar :
a natureza, 
a gravidade, 
a extensão, 
a evolução e a intensidade das lesões, 
sugerir ou até mesmo confirmar a causa da afecção. 
Resumindo: Fornecer o diagnóstico.
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA PADRÃO
Recepção
Análise Macroscópica
Clivagem
Processamento laboratorial (manual ou automático)
Desidratação => gradativa em álcoois (70%, 80%, 90% e 100%)
Diafanização (Clareamento) => xilol
Impregnação 
Inclusão em parafina
Microtomia
Desparafinização
Coloração
Análise Microscópica (Microscópio óptico + comum)
Resultado 
(Filho, Barbosa e Miranda ,2000
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA PADRÃO
Para uma correta identificação o material deve vir acompanhado de:
 Requisição preenchida com letra legível, informando o nome, prontuário, sexo, idade e cor do paciente;
 Identificação da peça enviada;
 Breve resumo da sua história, suspeita clínica, data e assinatura com CRM/CRO do MÉDICO ou CIRURGIÃO-DENTISTA solicitante. 
http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH001.html
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
Estação de Clivagem Ideal
Material p/ clivagem - bisturis e lâminas 
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
Análise e clivagem do material
	Pequenos fragmentos da área de lesão e de outras, pré-estabelecidas por um protocolo de clivagem. O número de fragmentos clivados varia de acordo com a peça e com o tipo de lesão. 
Fonte: http://wwwmedlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH003.html
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
Cassetes 
Frascos p/ acondicionar o material 
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
 Cassete com fragmento 
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
Auto-técnico
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
Moldes para inclusão 
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
Parafina histológica 
	Material deverá ser incluído em parafina para proporcionar firmeza e maciez suficientes para a realização de cortes finos (5 micra) o bastante para serem distendidos sobre uma lâmina de vidro. 
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
Auto-inclusor 
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
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ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
 Moldes para inclusão 
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
Micrótomo
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
Navalhas descartáveis para micrótomo 
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
Fonte: http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH008.html
ETAPAS DA TÉCNICA HISTOPATOLÓGICA
PADRÃO
 Banho-maria histológico 
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
Etapas da Técnica Histopatológica
Padrão
Banho-maria histológico (40ºC) e captura em lâmina
Fonte: http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH009.html
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
Lâminas histológicas 
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
As lâminas com os cortes parafinizados são colocadas na estufa à 60ºC para aumentar a aderência do corte à lâmina e para eliminar a parafina 
Fonte:http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH011.html
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
Auto-corador 
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
Auto-corador 
http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/HISTOTCH/TECH014.html
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
	Colorações mais comuns e principais estruturas e substâncias coradas:
 Hematoxilina-eosina (HE)  coloração histológica universal;
 Método de Papanicolau  coloração citológica universal;
 Tricômicos (Gomori, Masson e Mallory)  fibras colágenas, músculo;
 Verhoeff-van Gieson  fibras elásticas, colágeno, músculo;
 Impregnação pela prata  fibras reticulares, melanina, axônio, placas neuríticas, emaranhados neurofibrilares;
(Filho, Barbosa e Miranda ,2000)
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
	Colorações mais comuns e principais estruturas e substâncias coradas:
 Prata (método de Grocott)  fungos, bacilos diversos;
Ácido periódico-Schiff (PAS)  glicogênio, glicosaminoglicanos, membrana basal, fungos, parasitas;
Giemsa  células sanguíneas, bacilos espiralados, leishmânias;
Wade e Ziehl Neelsen  BAAR;
Vermelho-Congo  Amilóide;
Sudan  Lipídeos
(Filho, Barbosa e Miranda ,2000)
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/CINJHTML/CINJ009.html
Coloração por HE
Vermelho-congo
Giemsa
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
Lamínulas
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
	Após a coloração, as lâminas são cobertas por lamínula com bálsamo do Canadá ou outro meio de montagem, que serve para aderir a lamínula à lâmina, aprisionando definitivamente o corte corado, e a identificação é transcrita para uma etiqueta, que identifica a lâmina. 
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
Análise Microscópica
Fonte: http://www.zoneumidetoscane.it/eventi/microscopio.jpg
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
Arquivo de lâminas
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
ETAPAS DA TÉCNICA CONVENCIONAL
Arquivo de blocos de parafina
Fonte: http://www.anticorpos.com.br
HE
Papanicolau
CONCLUSÃO:
	Concluímos que a Histopatologia sendo o estudo dos tecidos em nível microscópico, tendo o propósito de identificar alterações estruturais e determinar a natureza das enfermidades, é de fundamental importância para o diagnóstico e prognóstico. Portanto, com a técnica podemos afirmar seguramente a natureza de uma lesão, para posteriormente adotar um tratamento específico para cada tipo de doença.
Obrigado!
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
FILHO, G.B.; BARBOSA, A.J.A.; MIRANDA D. Métodos de Estudo em Patologia. In: FILHO, G.B. Bogliolo. Patologia. 6ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, p.6-18, 2000. 
LABORATÓRIO ANTICORPOS. Disponível no endereço eletrônico: http://www.anticorpos.com.br em 20/01/05.
WEBPATH. Disponível no endereço eletrônico: http://www-medlib.med.utah.edu/WebPath/webpath.html em 21/02/05.
ZONEUMIDESTOCANE. Disponível no endereço eletrônico: http://www.zoneumidetoscane.it/eventi/microscopio.jpg em 28/02/2005.