Guia Operacional GCMS Solution

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GCMSsolution ver. 2.5 
 
Guia de Operação 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Shimadzu do Brasil 
Laboratório de Aplicações 
aplicacaoes.analitica@shimadzu.com.br 
www.shimadzu.com.br 
 
 
 1
 
Índice 
 
 
1. Parte I - Descrição dos Parâmetros ......................................................... 3 
 
 
2. Parte II – Procedimentos de Análise....................................................... 25 
 
1. System Configuration........................................................................ 26 
2. Auto Tuning........................................................................................ 27 
3. Criar uma pasta para projeto novo....................................................... 28 
4. Análise Qualitativa (Modo Scan)....................................................... 28 
5. Simlarity Search.................................................................................. 29 
6. Compound Table................................................................................. 32 
7. Análise Quantitativa............................................................................ 35 
8. Quantificação de Amostra com Concentração Desconhecida............ 37 
9. Usando Cromatograma de Massa para Encontrar Compostos Alvo... 40 
10. Análise de Composto Alvo................................................................. 44 
11. Cálculo do Índice de Retenção............................................................ 48 
12. Ajuste Automático de Tempo de Retenção (Função AART).............. 51 
13. Medição Simultânea de modos Scan e Sim (FASST)......................... 53 
 
3. Parte III – Exercícios Propostos................................................................... 55 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 2
 
 
 
GCMSsolution 
 
 
Objetivo 
 
Neste documento são relatados os procedimentos básicos para análise qualitativa e 
quantitativa com o sistema GCMS-QP2010. 
 
Procedimentos gerais 
 
Antes de usar o sistema GCMS alguns pontos devem ser observados. 
 
• Verificar o nível do óleo das bombas rotativas. 
• Verificar se a quantidade de hélio é suficiente para que se possa fazer as análises 
sem interrupção. Recomenda-se a troca quando atingir 10% da quantidade total. 
• Verificar as condições do septo do injetor do cromatógrafo. 
• Verificar a fonte de íons instalada. 
• Verificar a coluna instalada 
• Verificar se o glass insert instalado é o adequado. 
 
Procedimento para ligar o GC/MS 
 
1. Abrir a válvula de gás hélio. 
2. Ligar o GC 
3. MS e o micro. 
 
Abrir o GCMS Real Time Analysis 
 
Ao abrir o software é pedido o nome do usuário e a senha correspondente. 
User ID e Password. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 3
 
 
 
Parte I – Descrição dos Parâmetros 
 
 
Parâmetros para Desenvolvimento de Método 
 
Esta seção descreve como desenvolver um método usando os parâmetros na janela 
"Acquisition". Quando um método for salvo como arquivo de método (Method File) , 
resultados consistentes de análise podem ser obtidos usando o mesmo método. 
 
Configure o sistema usando GCMS Real Time Analysis antes de criar um método. Um 
método pode ser criado usando Instrument Parameters ou Method Wizard. Comece 
ajustando os parâmetros do autoamostrador (se possuir), do GC e por último o de MS. 
 
 
 
Sampler (Autosampler) Tab 
 
 
 
Selecione View > Instrument Parameters > Sampler tab. Os parâmetros do 
6 5 4 3 2 1 
Vials com amostras 
Vial com solvente (4mL)
Vial para descarte (4mL)
 4
autoamostrador podem ser visualizados. 
 
Parâmetro Descrição Unidade Faixa Default 
# of Rinses 
with Solvent 
(Pré-run) 
Especifica o número de vezes que a seringa é 
lavada com solvente antes da injeção. 
Quando o Solvent Flush está selecionado 
como modo de injeção, este parâmetro não 
fica disponível. 
 0-99 0 
# of Rinses 
with Solvent 
(Post-run) 
Especifica o número de vezes que a seringa é 
lavada com solvente após injetar no GC. 
Mude este numero quando injetar tipos 
diferentes de amostras ou quando injetar a 
mesma amostra diversas vezes. 
 0-99 1 
# of Rinses 
with Sample 
Especifica o número de vezes que a seringa é 
lavada com amostra antes da injeção. Mude 
este parâmetro quando injetar tipos diferentes 
de amostra ou quando a mesma amostra é 
injetada várias vezes. 
 0-99 2 
Plunger 
Speed 
(Suction) 
Especifica a velocidade do êmbolo quando 
aspira a amostra. Esta velocidade se aplica na 
aspiração da amostra para lavagem com 
amostra e para injeção da amostra. Para 
bombeamento e lavagem com solvente, a 
velocidade de aspiração é sempre a mais alta.
 High, 
middle, 
low 
High 
Viscosity 
Comp. Time 
Especifica o tempo de espera entre aspiração 
e injeção. Líquidos com viscosidade baixa 
são sugados para dentro da seringa 
simultaneamente com o êmbolo. Um tempo 
de espera maior deve ser utilizado no caso de 
líquidos de alta viscosidade. 
sec. 0-99.9 0.2 
Plunger 
Speed 
(Injection) 
Seleciona a velocidade do êmbolo durante 
injeção da amostra. Esta não é a velocidade 
que a seringa desce para dentro da porta de 
injeção. 
 High, 
middle, 
low 
High 
Syringe 
Injection 
Speed 
Seleciona a velocidade que a seringa entra na 
porta de injeção. 
 High, 
low 
High 
Injection 
mode 
Seleciona Normal ou um dos modos do 
Solvent Flush para a injeção. Pressione o 
botão Set para mudar o modo de injeção. 
 0 
Advanced Permite ajustes mais detalhados 
Injection 
mode 
Ajusta o modo de injeção. Ajuste é feito 
clicando no Setting... para abrir a janela 
“Injection Mode”. Selecione dentre as 5 
seguintes opções: 
 0-4 
3: pode 
ser 
selecio-
0 
 5
 0: Normal injection (somente amostra) 
 1: Amostra + ar + solvente 
Evita discriminação na seringa 
 
 2: Amostra + solvente 
 3: Amostra + ar + Padrão + ar + solvente 
 4: Amostra + Padrão + solvente 
nado 
quando 
está 
equipa-
do com 
AOC- 
20s. 
4: Pode 
ser 
selecio-
nado 
somen- 
te 
quando 
equipa-
do com 
AOC- 
20s 
 
 Quando o modo de injeção for diferente da injeção normal (i.e. solvent flush 
mode) , selecione uma das 2 seguintes opções para ajustar o número de 
lavagens com solvente antes da injeção da amostra. 
• Mesmo número de lavagens com solvente antes da injeção. 
• Mesmo número de lavagem com solvente após injeção. 
 
Após marcar estes parâmetros, clique no OK para finalizar. 
 
 
Funções Avançadas: 
 
 6
 
 
Mudanças não podem ser efetuadas durante análises 
 
Pumping Times Determina o número de vezes que a microseringa 
aspira/descarrega. Bombeamento serve para prevenir a formação 
de bolhas na amostra. 
Faixa de ajuste: (0-99) 
Inj. Port Dwell Time Determina o tempo de espera que a microseringa fica na porta de 
injeção após injetar a amostra no cromatógrafo a gás. 
Faixa de ajuste: (0-99.9) 
Terminal Air Gap 
 
Seleciona se deve ou não aspirar o ar após a amostra. Isso é eficaz 
quando tem problema na separação, normalmente quando injeta 
amostras com faixa ampla de ponto de ebulição. 
NOTA: Quando os parâmetros de análise especificam uso de 
temperatura inicial alta, ou quando usa coluna de alta polaridade 
como o sistema PEG, injetando ar pode encurtar a vida da coluna. 
Plunger Washing 
Speed 
Seleciona a velocidade que o êmbolo desce durante lavagem da 
amostra e bombeamento 
Washing Volume Seleciona o volume de aspiração para lavagem com amostra e 
bombeamento. 
Syringe Suction Especifica a posição até onde a seringa é abaixada na hora de 
sugar a amostra. Entrando com valor alto, aumenta a posição ou 
 7
Position 
 
com valor menor, diminui a posição. 
Faixa de ajuste: (1.5mLvial:-2 - 20mm; 4.0mL vial:-10 -20mm) 
Syringe Injection 
Position 
 
Especifica a posição que a seringa é abaixada quando a amostra é 
injetada. Entrando com valor alto, aumenta a posição ou com 
valor menor, diminui. 
Faixa de ajuste (Quando a porta de injeção é um OCI, a faixa é de 
3 - 22mm. Nos demais casos, a faixa é de 0 - 22mm) 
Use 3 Solvent Vials 
 
Mesmo se não estiver usando o autoamostrador, uso de “3 solvent 
vials” pode ser selecionado. 
Pode ser selecionado quando o autoamostrador (AOC-20s) é 
usado. 
Solvent Selection Seleciona o solvente para ser usado na lavagem da microseringa. 
0: A,B,C Usa todos os 3 vials de solvente (Solventes A, B, C).
1: A only Usa somente 1 vial de solvente (Solvente A). 
2: B only Usa somente 1 vial de solvente (Solvente B). 
3: C only Usa somente 1 vial de solvente (Solvente C). 
Estas opções podem ser selecionadas quando o uso de 3 solventes 
está especificado. 
 
 
Parâmetros GC (GC Tab) 
 
Esta seção descreve como ajustar os parâmetros para o cromatógrafo a gás. 
 
Selecione View>Instrument Paramters>GC Tab 
 
 8
 
Instruments Parameters GC Tab 
 
 
 
 
 
 
 
Nota: O parâmetro Control Mode determina quais parâmetros de Carrier Gas serão 
exibidos. Os parâmetros do Carrier Gas incluem Column Inlet Pressure, Column Flow, 
Linear velocity, Split Ratio, Total Flow, e Carrier Gas Flow. Parâmetros de pressão e 
controle de fluxo não podem ser ajustados para um instrumento que não possui um 
controlador eletrônico de fluxo. 
 
Nota: Ao usar coluna wide bore (diâmetro interno de 0,53mm), a faixa de controle de fluxo 
em baixa temperatura do forno fica estreita, e pode causar erro de controle no fluxo. 
Deve-se tomar cuidado ao ajustar o fluxo usando a seguinte tabela. 
 
Faixa de controle (usando injeção completa de volume com coluna D.I. 0.53 mm, 
comprimento de 30m) 
 
Temperatura do Forno (ºC) Faixa de Ajuste de Taxa de Fluxo (mL/min) 
50 10-15 
100 7-15 
 9
150 6-15 
200 4-15 
 
Dependendo da taxa de fluxo, pode gerar erro quando a temperatura do forno é baixada 
mesmo se estiver correndo normalmente a temperatura alta. 
 
Obs. : Programar primeiro a temperatura e depois entrar com fluxo. A pressão do GC é 
calculada automaticamente. 
 
Parâmetro Descrição Unidad
e 
Faixa Default 
Column Oven 
Temp. 
Especifica a temperatura do forno de 
coluna 
ºC -99- * 50 
Injection Temp. Especifica a temperatura na porta de 
injeção 
ºC -99- * 25 
Injection mode Seleciona o modo de injeção. Este 
parâmetro não é exibido para 
OCI/WBI 
 Split/ 
Splitless/ 
Direct 
Split 
Sampling Time Se Splitless for selecionado no 
Control Mode, o parâmetro Sampling 
Time especifica o intervalo entre o 
tempo de injeção de amostra e o 
tempo em que a válvula do fluxo split 
é aberta. 
Min. 0-999.99 1 
Control Mode Seleciona o modo de controle do fluxo 
de gás de arraste. Flow não pode ser 
selecionado quando o modo de injeção 
é Split ou Splitless. 
 Flow/ 
Linear 
Velocity/ 
Pressure 
Split 
Pressure kPa 0-970 100kPa 
 Kfg/cm2 0-9.89 
 
Este parâmetro fica desabilitado 
quando Direct é selecionado no 
Injection Mode e Flow é selecionado 
no Flow Control Mode. 
psi 0-140.6 
Total Flow Total Flow = Column Flow + Split 
Flow + Purge Flow. O valor é mantido 
constante durante o programa de 
temperatura. Este parâmetro fica 
desabilitado quando Direct é 
selecionado no Injection Mode e 
Linear Velocity ou Pressure é 
selecionada no Flow Control Mode. 
mL/min 0-1200 50 
Column Flow Exibe a taxa de volume do fluxo 
dentro da coluna. O Column Flow é 
automaticamente calculado a partir do 
Column Inlet Pressure. 
mL/min 
Linear Velocity Exibe a velocidade linear. Velocidade cm/sec 
 10
linear é automaticamente calculada do 
Column Inlet Pressure. 
Purge Flow Especifica o fluxo de purga. 
Desabilitado no caso de No Purge 
APC. 
mL/min 0.0-1200 
Split ratio Especifica o split ratio ou ratio do 
column flow para o split flow. Quando 
um split ratio é ajustado, o sistema 
ajusta o fluxo total baseado no fluxo 
calculado de gás de arraste, para que 
assim o split ratio desejado ocorra a 
temperatura do forno. Ajuste o split 
ratio para -1.0 para ficar o fluxo total 
independente do forno de temperatura. 
Este parâmetro é desabilitado quando 
Direct é selecionado no parâmetro de 
Injection Mode. 
 -1/0 
0-9999.9 
-1 
Detail of 
Injection Port 
Abre a janela “Detail Setting of 
Injection Port”. Caracteres aparecem 
em preto quando detalhes são 
ajustados. Este parâmetro fica 
desabilitado para WBI. 
 
Program Permite a entrada do programa de 
tempo em estágios. Itens a serem 
programados: temperatura do forno, 
pressão, e/ou taxa de fluxo. 
 Tempera
-tura do 
forno, 
Fluxo, 
Pressão, 
Fluxo de 
purga. 
 
Rate Taxa de acréscimo e decréscimo para 
programa de fluxo, pressão e 
temperatura, expresso em unidades de 
incremento. 
 
Temp/Pressure/ 
Flow 
O valor da temperatura , pressão, ou 
fluxo no programa. 
 
Hold Time O tempo em que permanece com a 
mesma temperatura, pressão e fluxo 
no programa. 
Min 0-9999.9
9 
 
Coluna Exibe os parâmetros referentes à 
coluna ajustado no System 
Configuration. Para mudar estes 
parâmetros, clique no botão Set na 
seção de coluna. 
 
Automatic Zero 
Correction after 
Executa a correção do zero 
automaticamente quando o 
 
 11
Ready instrumento está pronto. Para detector 
que não seja o MS. 
CRG (Oven) Usa CRG para forno de coluna. Este 
parâmetro é exibido quando 
CRG(Oven) é selecionado no tab 
Option na janela GC2010/System 
Configuration. 
 
* Vide GCMS Help para limites superiores. 
 
Para mudar os parâmetros do GC com tempo controlado durante aquisição de dados, crie 
um programa de tempo. Clique no GC Program para abria a janela “GC Program”. 
 
 
GC Program 
 
 
 
O Pre-run program é o programa de tempo que controla a operação de várias unidades 
antes da análise. 
 
O run-time program é o programa de tempo que controla a operação de várias unidades 
durante análises. 
 
Parâmetros Descrição Unidade Faixa 
Time (min) Determina o tempo de retenção em que o 
comando é executado. 
min 0-655 
Device Seleciona a unidade para ser usada da lista 
combo Box. Dispositivos são definidos no 
menu Instrument Configuration. 
 
Event Selecione o comando apropriado. 
Vide GCMS Help para mais informação. 
 
Setting Entre com o valor que corresponde ao 
dispositivo selecionado e evento. 
 
 12
Vide GCMS Help para mais informação. 
 
Nota: Quando o botão Load Chromatogram for selecionado no “GC Program”, pode-se ler 
o TIC de um arquivo existente. Selecione um campo de tempo (min) e clique no 
cromatograma para entrar com o tempo de retenção selecionado. 
 
 
Parâmetro MS (MS Tab) 
 
Esta seção descreve os parâmetros para o MS. Selecione o Method > Instrument 
Parameters > MS tab para visualizar os parâmetros. 
 
 
Parâmetro MS 
 
Aquisição de dados e análise podem ser executados com valores de default. Veja a tabela 
abaixo para mais detalhes. 
 
Parâmetro Descrição Unidade Faixa Default 
Temperature Entre com a temperatura da fonte de 
íon. 
ºC 0-260 
Interface 
Temperature 
Quando GC é conectado, pode-se 
definir a temperatura de 
aquecimento de GC. Quando GC não 
estiver conectado, essa temperatura 
da interface aparece acinzentada. 
ºC 0-* 
Solvent Cut 
Time 
Determina o tempo para o filamento 
acender pois o solvente elui após a 
injeção de amostra. 
Normalmente, quando a amostra é 
injetada, uma grande quantidade de 
solvente é introduzido para dentro do 
sistema. Isto resulta num decréscimo 
Min 0-9999.9 2.00 
 13
acentuadode vácuo dentro da fonte 
de íon, que possui efeito prejudicial 
no filamento e outros componentes. 
Para prevenir isso, o filamento é 
desligado enquanto o solvente passa 
pelo sistema. 
Nota: quando for analisar amostra 
com picos que elui antes do solvente, 
use um programa MS para ligar e 
desligar o filamento. 
Detector 
Voltage 
Determina a voltagem do detector. 
Pode-se selecionar entre o valor 
absoluto ou relativo ao resultado do 
tuning. 
Absoluto: usado quando ajusta 
diretamente a voltagem. 
Relativo ao resultado do tuning: 
usado quando ajustado ao valor 
absoluto da voltagem no arquivo do 
tuning a ser usado. Pode ser usado 
sinal (-) ou (+). 
Cuidado: note que quando é 
selecionada alta voltagem, um 
número grande de íon será detectado 
e o detector pode ser danificado. 
Entretanto, com o uso prolongado do 
instrumento, a sensibilidade cai e a 
voltagem do detector pode ser 
gradualmente aumentada. 
kV Abs: 
070-3.00 
Rel.: 
-2.30-2.30 
Rel. 0 
Threshold Determina o limite do nível de ruído. 
Sinais de íon abaixo deste valor 
serão tratados como ruído e 
apagados dos dados. Este parâmetro 
é determinável quando Scan é 
selecionado no modo de aquisição. 
Count 0-9999 1000 
Use MS 
Program 
Especifica se usa ou não o programa 
para massa. Quando selecionado o 
botão Set é habilitado. 
 
Micro Sacn 
Width 
Determina a largura do scan quando 
executar medição em micro scan . 
A faixa de ajuste é (0.00 a 1.00). 
Quando ajustado para “0”, micro 
scanning não é executado. 
Medição micro scan: em análise 
SIM, dados são coletados com 
controle MS fixo a um valor m/z 
Amu 0.00-1.00 0 
 14
determinado. Micro scanning é um 
método de medição que coleta dados 
com o scaneamento de MS sobre 
uma faixa de minuto. Pode-se 
esperar melhor reprodutibilidade nos 
dados de análise quando este método 
é usado. 
*veja o GCMS Help 
 
Scan Parameters 
 
 
Scan Parameters 
 
Parâmetro Descrição Unidade 
Start Time Determina o tempo inicial de aquisição de dados min. 
End Time Determina o tempo final de aquisição de dados min. 
Acquisition 
mode 
Seleciona scan. 
Interval Determina o intervalo para um único scan. sec 
Start m/Z Determina a massa inicial da faixa m/z u 
End m/Z Determina a massa final da faixa m/z u 
San Speed Determina a velocidade que o scan é executado 
numa faixa específica m/z. Esta será 
automaticamente selecionada e exibida de um 
possível ajuste de acordo com a faixa de medição 
m/z e o Interval. Um valor menor (scan mais lento) 
reduz o ruído no dado. 
 
 
Nota: A velocidade do scan que é realmente medida, como mostra abaixo, é mais rápida do 
que a velocidade de scan exibido na tela, devido à relação com o número de freqüência de 
operação do instrumento. 
(Velocidade de scan medido real)=(velocidade de scan exibido na tela) x 1.1 
 
Parâmetros SIM 
 
 
Parâmetros SIM 
 
Parâmetro Descrição Unidade 
 15
Star time Determina o tempo inicial de aquisição de 
dados 
Min. 
End Time Determina o tempo final de aquisição de 
dados. 
Min. 
Acquisition mode Seleciona SIM 
Interval Determina o intervalo para um scan simples Sec. 
Ch1m/z – Ch64m/z Determina o m/z para cada canal. u 
 
Para mudar os parâmetros de MS durante a aquisição de dados, use o programa de tempo. 
Selecione o “Use MS Program” e clique no set para abrir a caixa do “MS Program”. 
 
 
MS Program Dialog Box 
Entre com os parâmetros dentro da tabela como descrito abaixo. 
 
Parâmetro Descrição Unidade Faixa
Tempo (min) Especifica o tempo de retenção para executar cada 
comando. 
Min. 
Command Seleciona um comando para executar durante 
aquisição de dados. Clique na célula desejada, e a 
célula se tornará um combo Box. Selecione um 
comando desta caixa combo. 
 
 DetectorVolts= Muda a voltagem do detector no 
tempo determinado. 
kV 0.7 – 
3.00 
 FilamentON Acende o filamento no tempo 
determinado 
 
 FilamentOFF Desliga o filamento no tempo 
determinado 
 
 PFTBAOpen Abre a válvula solenóide do 
 16
padrão PFTBA no tempo 
determinado. 
 PFTBAClose Fecha a válvula solenóide do 
padrão PFTBA no tempo 
determinado. 
 
 Reagentgas1Open Abre a válvula solenóide do gás 
reagente 1 
 
 Reagentgas1Close Fecha a válvula solenóide do gás 
reagente 1 
 
 Reagentgas2Open Abre a válvula solenóide do gás 
reagente 2 
 
 Reagentgas2Close Fecha a válvula solenóide do gás 
reagente 2 
 
Value Especifica um valor para o parâmetro Command 
 
 
Nota: O botão “Load Chromatogram” possibilita a abertura de um arquivo de dado. Clique 
no cromatograma enquanto o campo Time é selecionado para entrar com tempo de 
retenção que desejar. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Single Run Setup (Corrida Única) 
 
 17
 
Sample Login Dialog Box 
 
Sample Name Especifica o nome da amostra. O nome é usado para identificar 
arquivos de dados e aparece nos relatórios. 
SampleID Especifica o número de identificação ou número de lote da amostra. É 
muito útil no caso de procurar um arquivo de dados. Pode ser 
modificado durante aquisição de dados. Até 31 caracteres. 
Data File Especifica um nome para salvar o arquivo. 
A extensão do arquivo é automaticamente adicionada. Se digitar apenas 
o nome, o arquivo fica gravado no mesmo caminho do arquivo de 
método que foi aberto. 
Base Line Data Determina um nome para arquivo de dados para cromatograma 
diferencial (cromatograma de linha de base). Este campo é usando 
somente quando usado detector GC. 
Data 
Description 
Espaço para comentários. 
 
Clique no ícone da pasta ao lado do “Data File” para selecionar a pasta onde será gravado o 
arquivo de dados. Ou também gravar por cima de um arquivo existente. Use a função 
“increment” para incrementar o número do arquivo de dados evitando assim gravar por 
cima de um arquivo existente ou para análise múltiplos. 
 
Parâmetros do Autoamostrador 
 18
 
Vial # Especifica a posição ocupada pelo vial no autoamostrador 
Injection 
volume 
Especifica a quantidade de amostra a ser injetada. Este volume é 
injetado quantas vezes for determinado no “Multi Inj Times”. 
Multi Inj Times Especifica quantas vezes deve injetar a amostra 
Tuning File Se este campo ficar em branco, será usado o arquivo de tuning usado na 
última aquisição de dados ou que foi salvo durante o último tuning. O 
caminho do arquivo quando somente é entrado com nome do arquivo é 
GCMSsolution\System\Tune#. (# é o número do sistema, 
GCMSsolution é a pasta especificada durante a instalação.) 
Syringe 
Capacity 
Verifica a capacidade da seringa especificada no System Configuration. 
Note que este parâmetro não pode ser editado na janela “Sample 
Login”. 
Report Seleciona o relatório para impressão após completar a aquisição de 
dados. Entre com o nome completo do arquivo do formato de relatório 
para ser usado na impressão ou clique no File Folder para procurar pelo 
arquivo. 
 
Monitoração do Instrumento 
 
 
Instrument Monitor 
 
Itens Descrição 
GC, MS, HS Apresenta cores diferentes dependendo do status corrente do 
GC, MS e HS. Consulte o Help para mais informação. 
Units Seleciona a Linha 1 ou 2 para exibir a informação 
correspondente de cada unidade. Estes botões são exibidos 
somente quando são conectadas 2 linhas. 
Vacuum Indica vácuo com o gráfico. O indicador no formato de triangulo 
 19
mostra o estado do vácuo corrente. 
GC consumables, MS 
consumables 
A cor de fundo muda para indicar necessidade de manutenção 
ou substituição. 
Outros parâmetros Para ajustar outros parâmetros, clique em Details... para abrir a 
janela “Instrument Monitoring Details”. 
 
 
Integraçao Automática de Pico 
 
Selecione Qualitative > Qualitative Parameters.Qualitative Parameters Peak Integration 
 
Parâmetro Descrição Unidades Faixa 
Integration 
Mode 
Seleciona como integrar picos: 
• Auto (Area): o slope é automaticamente 
ajustado até o número # de picos 
determinado é obtido. Se o número de picos 
não for obtido após ajustar o slope, os picos 
com as áreas maiores são incluídos para 
satisfazer este parâmetro de número de 
picos. Confirma o slope final da tabela de 
pico qualitativo. 
• Auto (height): o slope é automaticamente 
 
 20
ajustado até encontrar o número de picos 
determinado #. Se o número de picos não for 
obtido após o ajuste do slope, os picos mais 
altos são incluídos para satisfazer este 
parâmetro. Confirma o slope final da tabela 
de pico qualitativo. 
• Detail: Integração baseada no slope, width, 
drift and T.DBL parameters. 
# of Peaks Se Auto (area) ou Auto (height) for selecionada 
como método de integração, este será o número de 
picos a serem obtidos durante o ajuste do slope. 
Dependendo do cromatograma, este parâmetro 
pode não ser a melhor forma. Se o # de picos não for 
atingido, escolherá os picos com maior área ou pico 
mais alto até satisfazer o parâmetro. Se for 
selecionado ‘Detail” este parâmetro será 
desabilitado. 
 
Slope 
 
(Tgθ=slope) 
Este parâmetro determina a sensibilidade de 
detecção do pico. O slope, usado para achar o inicio 
e final do pico, é calculado pelas tangentes ao longo 
do pico. O ponto inicial do pico é determinado 
quando o slope alcança o valor ajustado. Se o ponto 
inicial não puder ser confirmado, os pontos inicial e 
final são calculados a partir da metade da largura do 
pico. A área é calculada para os picos com seus 
pontos inicial e final determinados. 
Se o slope for alto, a sensibilidade será baixa. Se o 
slope for baixo, a sensibilidade será alta, mas picos 
largos também podem ser detectados. 
Precauções para o parâmetro slope 
• O parâmetro slope muda no intervalo de 
tempo especificado no parâmetro T. DBL 
• Para prevenir que seja detectado pico na 
linha de base, o slope deve ser maior que o 
drift para análise com drift extremo de linha 
de base. 
 
min-1 0-4E+11
Drift Este parâmetro é usado para determinar a linha de 
base. Normalmente, o valor é ajustado para 0, e a 
linha de base é automaticamente corrigida. Se a 
correção automática da linha de base for incorreta, 
entre com o valor que irá obter linha de base 
apropriada. O Drift deverá ser maior que o slope, 
para diferenciar da linha de base. 
O drift leva a resultados diferentes dependendo do 
método de separação que pode fornecer separação 
min-1 -1E+7 – 
1E+7 
 21
completa ou incompleta. 
Width Este parâmetro é a largura na metade da altura do 
pico mais estreito detectado. O parâmetro width é o 
padrão usado para distinguir entre ruído e picos. 
Como ruído é mais estreito que picos, se Width for 
ajustado pelo pico mais estreito a meia altura, picos 
que são mais estreitos podem ser distinguidos como 
ruído e eliminado. Se este valor não for ajustado 
corretamente, ocorrerão erros na integração do pico. 
O parâmetro Width não pode ser maior que a 
largura a meia altura do pico mais estreito no 
cromatograma. 
Precauções com parâmetro Width 
• O parâmetro width muda no intervalo de 
tempo especificado no parâmetro T.DBL. 
• Mudanças automáticas pelo parâmetro 
T.DBL pode ocorrer até 15 vezes por 
cromatograma, incluindo as mudanças no 
programa de tempo. Para análise 
quantitativa MS, o parâmetro width pode 
mudar somente até 2 vezes. 
sec. 0.04 – 
200 
T.DBL 
(time 
doubled) 
Este parâmetro é o intervalo em que o slope e o 
width mudam automaticamente. 
Para prevenir que o slope e o width fiquem 
mudando automaticamente, entre com o valor que é 
maior que o tempo final de análise. Quando a 
largura do pico aumenta com o tempo, tal como 
análise isotérmica de GC, o slope e width devem ser 
trocados com o tempo. Quando o T.DBL é 0, o 
slope e width muda automaticamente conforme os 
picos alargam. Se o intervalo determinado 
automaticamente estiver incorreto, entre com 
T.DBL como especificado pela formula abaixo. O 
width é dobrado e o slope é dividido a cada 
intervalo T.DBL. 
T.DBL (min)=(width/peak half-width)x(peak 
retention time)x2 
Precauções 
- o width e slope muda no intervalo de tempo 
determinado neste parâmetro. 
Min 0 – 
10000 
Min. 
Área/Height 
Pico com área/altura menor que este ajuste não 
serão reconhecidos e nem serão processados. 
 
Base Este estabelece se usa ou não min. Área/height. 
 
Nota: Ajustando o Quantitative tab determina se 
área ou altura será utilizada no cálculo quantitativo. 
 
 22
Smoothing 
(alisamento) 
Seleciona o método smoothing para none, Standard, 
e Savitzky-Golay. 
- none: não será feito o smoothing 
- Standard: alisamento é feito pela média do 
movimento como no Class-5000. 
- Savitzy-Golay: alisamento é feito com método do 
savitzy-golay. 
 
# of 
Smoothing 
Times 
Se for utilizado o método padrão de alisamento, este 
parâmetro especifica quantas vezes o alisamento 
deve ser executado. Se a primeira média der pouco 
efeito, ajuste este parâmetro. Alisando várias vezes, 
o efeito da média será melhorado. Smoothing não é 
executado quando o # of smoothing time for 0. 
Este parâmetro é desabilitado se None ou 
Savitzky-Golay é selecionado como método de 
smoothing. 
 0-99 
Smoothing 
width 
Se o método de Standard smoothing for usado, este 
parâmetro especifica o comprimento médio para a 
média de movimento em segundos. 
Se o método de alisamento Savitzky-Golay for 
usado, este parâmetro especifica o número de 
pontos para alisar. Somente números ímpares de 
pontos são efetivos. Mesmo que o número par for 
colocado, um número ímpar de pontos será alisado. 
Este parâmetro fica desabilitado se None é 
selecionado como método de smoothing. 
Sec 
 
Points 
0 – 200 
 
3 - 25 
 
 
Time Program for Peak Integration 
 
Clicando no botão “Program” e será exibido o “Time Program for Peak Integration”. 
 23
 
Time Program for Peak Integration Dialog Box 
 
Se não for possível obter um bom processamento dos picos com os parâmetros default do 
método, utilize esta caixa para criar um programa de tempo e mudar os parâmetros de 
integração de picos ao longo do tempo. 
 
Quando inicia integração de pico, análise qualitativa procede com os parâmetros que foram 
determinados no Peak Integration tab. O programa de tempo muda os parâmetros no 
tempo estabelecido. Processamento de pico continua com os parâmetros trocados. 
 
Use o cromatograma para facilitar a programação do tempo. Selecione Load 
Chromatogram para escolher o arquivo apropriado. 
 
Clique na coluna Time para inserir o tempo clicando no cromatograma. O tempo de 
retenção irá ser inserido automaticamente na tabela. Selecione um comando da lista 
dropdown para entrar com os comandos desejados. 
 
Comando Descrição Unidades Faixa 
INTEGRATION 
ON/OFF 
Picos que ocorrem entre INTEGRATION 
OFF e ON são considerado 
desnecessários e não serão integrados. 
 ON/OFF 
TAILING 
ON/OFF/AUTO 
Este programa executa processamento 
automático de cauda. Processamento 
forçado de cauda é feito entre TAILING 
ON e TAILING OFF no tempo 
especificado. Para TAILING AUTO, 
processamento de cauda será executado 
automaticamente no tempo especificado. 
 ON/OFF/ 
AUTO 
HORIZ BASELIN A linha de base de picos dentre intervalo ON/OFF 
 24
ON/OFF HORIZ BASELIN ON a HORIZ 
BASELIN OFF é processado para se 
tornar horizontal. 
PEAK 
DETECT/TOP/END 
Dois ou mais picos são forçados a ser 
processado como um só pico. 
 DETECT/ 
TOP/END
LEADING PK 
ON/OFF 
Processamento leading (fronting) é feito 
dentro do LEADING PEAK ON a 
LEADING PK OFF. 
 ON/OFF 
WIDTH= Muda o parâmetrode integração de pico 
Width. 
Precauções 
O valor Width muda sobre tempo quando 
T.DBL é usado. Para maiores 
informações consulte o manual. 
sec 0.04-200 
SLOPE= Muda o parâmetro de integração de pico 
Slope. 
Precauções 
O valor do Slope muda com o tempo 
quando usar T.DBL. Para maiores 
informações consulte o manual. 
min-1 0.0-4E+11
DRIFT= Muda o parâmetro de integração Drift. 
 
min-1 -1.0E7- 
1.0E7 
T.DBL= Ajusta o parâmetro de integração de pico 
T.DBL. 
min. 0.0- 
10000.0 
 
Após ajustar todos os parâmetros do Peak Integration Table, Clique no OK. 
 
Quantificando e Verificando Resultados 
 
Esta seção explica o processo para quantificar e visualizar os resultados. 
 
1. Clique no ícone Quantitative. 
 
2. Abra o arquivo de dados a ser quantificado. 
 
3. Clique no “Load Method” que se encontra na Barra Assistente. 
 
4. Selecione o arquivo de métodos em que foi salvo a curva de calibração e abra-o. 
 
5. Clique em “Quantitate for All IDs” ou selecione Quantitative > Calculate. 
 
As informações apresentadas são: 
 
 25
 
Tabela de Resultados 
 
Coluna Descrição 
ID# Exibe o número de identificação do composto 
Nome Exibe no nome do composto 
Conc Exibe a concentração calculada 
Re. Time Exibe o tempo de retenção do pico identificado. 
Type Exibe o tipo como foi designado no Compound Table. Se o pico não for 
identificado, será exibido “Unknown”. 
m/z Exibe o número de massa designado no Compound Table 
Área Exibe a área do pico identificado 
Height Exibe a altura do pico identificado 
Unit Exibe a unidade selecionada no Compound Table 
Recovery Exibe a porcentagem de recuperação calculada. A porcentagem de 
recuperação é calculada quantificando a amostra fortificada (spiked). 
Fórmula para cálculo: 
(% Recuperação)=(concentração calculada de amostra fortificada – 
concentração calculada de amostra não fortificada)/quantidade 
fortificada)x100 
Quando criar “batch table”, as amostras fortificadas e não fortificadas 
devem sempre entrar na seqüência, com a amostra não fortificada 
precedendo a amostra fortificada. Entre com a informação para a amostra 
não fortificada, ajustando o Sample Type no “batch table” para 
“Unspiked”. E então entre com a informação para a amostra fortificada e 
ajuste o para “Spiked” no Sample Type. 
Modo Se a integração do pico for realizada, exibe o modo de integração do pico. 
• Auto: Indica que a integração do pico é automática e de que já foi 
efetuada. 
• Manual Integrate: Indica que a integração é manual ou que a 
identificação já foi feita. 
Search Indica se o Similarity Search foi executado no espectro identificado. Para 
exibir os resultados da pesquisa, dê um duplo clique na célula ou 
selecione Show Search Result para Compound Table com clique no 
botão direito. 
SI O resultado do cálculo da similaridade. 
Nota: Compostos que não foram identificados são exibidos numa linha acinzentada. Compostos 
identificados são exibidos em verde. 
 26
Parte II - Procedimentos de Análise em GC/MS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Ajuste o System Configuration 
Ajuste as Condições Analíticas 
Analise a amostra em modo Scan 
Identifique os componentes da amostra
usando biblioteca 
Crie “Compound Table” 
Crie Tabela SIM 
Analise a amostra em SIM 
Crie Curva de Calibração 
Quantificação com Curva de Calibração
GC, MS, Coluna, Autoamostrador, etc.. 
GC (coluna, temperatura, etc...) 
MS (temperatura da fonte de íon, tempo de 
varredura, etc..) 
Sample Login 
Similarity Search 
Compound Table Wizard 
Selecionando íons 
Amostras com 3 concentrações diferentes 
Parâmetros de identificação e quantitativo 
Relatório de Curva de Calibração e resultados 
 27
Ícones disponíveis do GCMSsolution no Desktop 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
GCMS Real Time Analysis 
 
1. System Configuration 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Seleção das unidades que serão utilizadas para análise. 
 
 
GCMS Postrun Analysis.lnk
GCMS Real Time Analysis.lnk
GCMS Analysis Editor.lnk 
GCMS Browser.lnk 
Programa para comunicar e 
operar o GCMS-QP2010 
Programa para processar dados 
adquiridos pelo Real Time 
Programa para criar método enquanto 
adquire os dados pelo Real Time 
Programa para exibir múltiplos arquivos 
de dados de cromatograma e espectro 
simultaneamente. 
 28
2. Auto Tuning 
Após dar partida no instrumento ou após mudar a temperatura da fonte de íon, 
espere cerca de 2 horas para executar o auto tuning. O Auto-tuning deve ser feito 
antes de iniciar uma série de análises. Porém, não faça auto-tuning entre as 
medições de quantificação. 
 
Em auto tuning, os números de massa são calibrados e a resolução do pico de massa 
é ajustada. 
 
 
Itens a serem verificados: 
 
• Verifique se há vazamento checando as intensidades de m/z 18, 28. Se a 
intensidade de m/z 28 > m/z 18, então é provável que tenha vazamento 
• Verifique se o ganho do detector é 2kV ou menor. Se for maior que 2kV, é 
necessário substituir o detector ou efetuar manutenção. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 29
3. Crie uma pasta para projeto novo 
 
Utilize Data Explorer para criar uma nova pasta e organizar os dados. 
 
4. Análise Qualitativa (Modo Scan) 
 
4.1 Ajuste os parâmetros de AOC (se possuir), GC e MS e crie o arquivo de 
método (method file). 
 
4.2 Adquira os dados (Single run) 
 
• Clique no Standby para fazer o download do método e preparar o instrumento para 
análise. 
• Clique no Start para iniciar a aquisição de dados. 
• Durante a análise poderá clicar no SnapShot para analisar o cromatograma até 
aquele momento do clique. 
• Clique no Stop para parar a análise!! Se este botão for acionado o programa MS 
parará imediatamente, mas o programa de temperatura do GC continuará até o final. 
Isto previne deixar resíduo na coluna. Para parar o GC imediatamente, pressione o 
botão Stop no próprio GC. 
 
GCMS Postrun Analysis 
 
 4.3 Abra os dados no GCMS Postrun Analysis 
 
4.4 Registro de Composto Alvo e Pesquisa de Similaridade 
 
Registro Manual 
 
a. Identifique cada pico e registre o espectro clicando com o botão direito do mouse com o 
ponteiro sobre o espectro de massa e selecione “Register to Spectrum Process Table”. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 30
b. Abra o “Spectrum Process Table” que se encontra no “Qualitative Table”. 
 
 
 
c. Verifique se ocorreu o registro e faça “Similarity Search”. 
 
d. Clique em cada fileira para verificar se fez a busca certa. 
 
 
Registro Automático 
 
a. Clique no ícone “Peak Integration for All TICs” no Qualitative Processing 
 
b. Selecione o Peak Integration tab na janela “Qualitative Parameters” e entre com os 
parâmetros. 
 
c. Abra o “Qualitative Table” 
 
d. Selecione o tab TIC e verifique os picos registrados. 
 
e. Selecione todas as linhas e registre os compostos no “Spectrum Process Table”. 
 
 
 31
7. Clique no tab Spectrum Process e faça a busca de similaridade em todos os compostos: 
Simiarity Search > Search All Rows. 
 
 
 
8. Salve os dados para completar o registro. 
 
5. Similarity search 
 
Esta seção descreve como compara espectros da biblioteca. 
 
1. Selecione um pico para ser estudado com a biblioteca. O espectro alvo será exibido no 
Spectrum View: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
2. Clique no Similarity Search Result para abrir a janela “Similarity Search Results”. 
 
A primeira janela exibe o cromatograma a ser analisado. A segunda janela é o primeiro 
candidato com o índice de similaridade mais alto. A terceira janelavaria de acordo com a 
opção escolhida. 
 
- information: exibe informações sobre o candidato 
- compare: exibe o segundo candidato 
- subtract: exibe o espectro subtraído. 
 
 
 32
 
 
Pode-se selecionar no máximo 5 bibliotecas a ser estabelecidas no Qualitative Parameters. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 33
6. Crie Compound Table usando Wizard. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Selecione o item “Use current Spectrum Process Table”. (janela 1/7) 
 
Caso selecionar “Integrate of TIC”, os parametros “Integration Param” e “Spectrum 
Format” ficarão habilitados. 
 
a. Verifique o número de picos do cromatograma (janela 2/7) 
 
 
 
 34
b. Verifique a validade do espectro e selecione o composto que será usado para 
análise. (janela 3/7) 
 
 
 
c. Entre com os parâmetros para método quantitativo, calibração e concentração 
(janela 4/7) 
 
 
 
d. Entre com as concentrações e # de íons de referência (janela 5/7) 
Se usar padrão interno for selecionado no Quantitative Method, entre com a 
quantidade de padrão interno também. 
 
 35
 
 
e. Selecione os íons (janela 6/7) 
 
 
 
Na tabela a direita os íons de referência e alvo são listados seqüencialmente de maior para 
menor intensidade. Clique na célula para selecionar o tipo “Target Ion”, “Reference Ion” 
ou “Not used”. 
 
 
 
 
 
 
 36
Preencha a tabela abaixo para auxiliar a criar o arquivo de método no modo SIM. 
 
No. Nome do Composto T.R. m/z Cracterístico Grupo Tempo 
inicial 
Tempo 
final 
 
 
 
 
 
f. Salve o Compound Table no arquivo de método para o modo SIM. 
 
 
GCMS Real Time Analysis 
 
7. Análise Quantitativa (modo SIM) 
 
7.1 Ajuste os parâmetros AOC (se possuir), GC e MS no modo SIM com os íons 
selecionados 
7.2 Analise os padrões usando Batch Table 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
7.3 Programe a análise usando o Wizard do “Batch Processing”. 
 
GCMS Postrun Analysis 
 
7.4 Após o termino das análises, abra o arquivo de método no Postrun. 
 
 
 37
 
 
 
Mude o tipo de arquivo a ser exibido para Datafile. 
 
7.5 Clique e arraste os dados da análise adquiridos nos níveis correspondentes. 
 
 
 
 38
7.6 Clique no Peak Integration for All Data. 
 
7.7 Cheque a curva 
 
7.8 Selecione File > Save Method File 
 
8. Quantificação de Amostra com Concentração Desconhecida 
 
8.1 Analise a amostra usando o método file com o modo SIM 
 
8.2 Abra o arquivo adquirido no GCMS Postrun Analysis 
 
 
 
 
8.4 Clique no “Peak Integration” 
 
8.5 Verifique o resultado no <Results> do “Compound Table” para exibir o resultado 
do cálculo quantitativo. 
 
 
8.3 Clique no ícone “Load Method” dentro do 
“Quantitative” 
 
 39
 
 
 
8.6 Verifique o resultado da marca de detecção do pico e linha de base do 
cromatograma. Integre manualmente caso o pico não for detectado corretamente. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
8.7 Clique no <Report> do subitem 
Quantitative 
 
 40
 
 
8.8 Clique na curva de calibração 
 
8.9 Especifique a faixa de apresentação da curva de calibração com o mouse. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Clique no “Position” na janela de propriedade 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Entre com “2” no “Block” 
para exibir duas curvas de 
calibração horizontalmente. 
 41
Selecione “Quantitation Graph” 
 
 
 
 
Especifique o tamanho e o “Block”. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
9. Usando Cromatograma de Massa para Encontrar Compostos Alvo 
 
 
Abra GCMS Postrun e clique no ícone “Library Editor”. 
 
Selecione “Open Library (O)” do menu “File”. Selecione a biblioteca “PEST_EI”. 
Clique no “Preview” para checar as 
informações. Caso tudo estiver OK, clique no 
“Print” para imprimir o resultado.
 42
 
 
Clique no “Index” e selecione “Compound Name”. 
 
 
 
 
Entre com “Simazine” como parâmetro. E clique no ícone “Start” 
 
 
 
 
 
 
 43
 
O resultado será exibido: 
 
 
 
Os números de massa típicos são: 201, 186, 173 e 158. O pico do Simazine pode ser 
identificado com os cromatogramas de massa desse números. 
 
Exibindo cromatograma de massa 
 
 
 
 
Abra o arquivo de dados no GCMS Postrun. 
Clique no ícone “Fragment Table” do 
subitem Qualitative. 
 44
Clique com o botão direito do mouse e selecione “Base Shift” 
 
 
 
Obtemos o seguinte cromatograma de massa: 
 
 
 
Dê um duplo clique no pico a 11 minutos de tempo de retenção. E clique com botão direito 
do mouse em cima do espectro de massa e faça a busca de similaridade. 
 45
O pico com tempo de retenção a 11 minutos foi identificado como simazine com os 
cromatogramas de massa com m/z típicos desse composto (201, 186, 173 e 158). 
 
10. Análise de Composto Alvo (Compound Finder) 
 
Use análise de composto alvo para determinar se a amostra contém simazine. 
 
A análise de composto alvo encontra o pico no cromatograma que mais se assemelha ao 
espectro de massa do composto alvo (Nesse exercício usaremos simazina) 
 
Registre o espectro do composto alvo como espectro padrão. “Qualitative integrate” será 
efetuado para números de massa (incluindo TIC e MIC) designado no Compound Table e o 
grau de similaridade entre o espectro de massa dos picos detectados e os espectros padrão 
registrados no compound table será calculado. O pico com o mais alto grau de similaridade 
será exibido na tabela de resultados de identificação. 
 
Nesse exercício, os espectros padrão no compound table será registrado da biblioteca de 
espectro de massa. 
 
Criando método para Análise de Composto Alvo 
 
Abra o arquivo de dados no GCMS Postrun. 
 
Se já tiver o Compound Table, apague o conteúdo para criar outra tabela para Target 
Compound Finder. 
 
Mude o estilo da tabela para Compound Finder 
 
 
 46
Selecione “Table Style”do menu pop-up. 
 
Selecione “Compound Name, Type, Mass Number, Processing Start Time, Processing End 
Time, Standard Spectrum e Minimum SI”. 
 
 
 
Coloque o Compound Table no Modo Edit e selecione Register Standard Spectrum > 
Library Spectrum. 
 
 
 47
Selecione Open Library (O) do menu “File”. E selecione “PEST_EI”. 
 
 
 
Selecione Compound Name e digite “Simazine”. 
 
 
 
Selecione “Start” para iniciar a busca. 
 
Selecione o “With Name” e depois “Register”. 
 
 48
 
 
Verifique se o espectro foi registrado no Quantitative Table e selecione “Discovery" 
 
 
 
Clique no View. 
 
Salve o método “Save Method File as” com um nome. 
 
Detectando os compostos alvos usando análise de compostos alvos. 
 
Abra o arquivo de dados no GCMS Postrun. 
 
Clique no ícone “Load Method”. E Clique no “Peak Integrate for all IDs.” 
 
 
 
 
 
 49
O resultado é exibido. 
 
 
 
11. Cálculo do Índice de Retenção 
 
11.1 Análise de n-alcanos 
 
Analise uma mistura de n-alcanos com as mesmas condições de análise para sua amostra. 
 
 
Coloque nome, 
TR e IR. 
 50
 
 
Clique no “Quantitative” e “Peak Integration” para identificar os picos. 
 
Verifique se os picos registrados no compound table foram identificados corretamente. 
Caso contrário, execute manualmente. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Salve as alterações. Este arquivo será usado como referência para cálculo de índice de 
retenção. 
 
11.2 Análise da Amostra 
 
Apesar do índice de retenção poder ser inserido diretamente no compound table, o 
procedimento a seguir apresenta o modo automático para cálculo desses índices. 
 
Analise a amostra e abra o arquivo de dadosno GCMS Postun Analysis 
 
Clique no “Qualitative Parameter” e na aba “Retention Index”. 
 
Verifique se os compostos 
foram identificados 
corretamente. 
 51
 
 
Clique no “Load from Data File” e selecione o arquivo de dados de n-alcanos previamente 
adquirido. 
 
Clique OK na janela “Qualitative Parameters”, execute a integração e registre os picos no 
“Spectrum Process Table”. 
 
Crie uma nova tabela de composto usando Wizard. 
 
Salve o arquivo usando “Save Data File” e no método usando “Save Compound Table”. 
 
Para incluir índice de retenção para arquivos com compound table já definido, pode-se 
utilizar o “Wizard (Modify)”, do “Compound”. 
 
 
 52
Na página 1 de 4 no wizard do “Modify Compound Table”, selecione “Modify Retention 
Index”. 
 
A nova tabela de compostos incluirá os índice de retenção: 
 
 
 
12. Ajuste Automático de Tempo de Retenção (Função AART) 
 
Quando ocorrer alguma modificação na informação, como no comprimento da coluna 
devido a limpeza, medindo o índice dos padrões, é possível alterar os tempos de retenção 
estabelecidos no compound table e/ou parâmetros de instrumento de MS no método para 
análise de compostos alvo. 
 
(1) Analise os n-alcanos após a modificação e abra o resultado no Post Run. 
 
(2) No item “Create Compound Table”, clique em “Adjust Ret. Time [AART]”. 
 
(3) Selecione o arquivo de método onde será modificada a informação referente a 
tempo de retenção. 
 
(4) Os resultados da identificação dos padrões aparecem na primeira janela. 
 
 53
 
 
Também é possível modificar os parâmetros de MS usando os tempos de retenção 
calculados no compound table. Para isso, selecione “Modify the time of MS Instrument 
parameters”. 
 
 
 54
13. Medição Simultânea de modos Scan e Sim (FASST) 
 
Após a criação do Compound Table, clique em “Create Sim Table [COAST]” e selecione o 
método a ser alterado. 
 
 
 
Clique no “FASST” para habilitar a função Scan/SIM simultâneo. Selecione na tabela os 
compostos a serem medidos nos dois modos. Clicando na linha do composto, exibirá o pico 
deste no “Quantitative View”. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Esta função possibilita a análise em SIM dos compostos com concentração baixa para 
aumentar a sensibilidade. 
 
Clique no 
composto 
 55
Parte III – Exercícios Propostos 
 
 
Exercício 1: “Identificação de pesticidas por GCMS-QP2010/GCMSsolution” 
 
Objetivos: 
 
• Aprender como ajustar os parâmetros de instrumento para análise qualitativa. 
• Aprender como usar GCMSsolution para identificar compostos orgânicos na amostra. 
 
Amostra: Mistura de 20 pesticidas 
 
Condições Analíticas 
 
Temperatura do injetor : 250ºC 
Coluna : Rtx-5MS 
Gas de arraste : Helium 99,9999% de pureza 
Modo de injeção: : Splitless (sampling time = 2min) 
Modo de alta pressão : 300kPa (2,3 min) 
Controle de gás de arraste : Constant Linear Velocity 
Velocidade linear de gás de arraste : 45 cm/sec 
Programa de forno de coluna : 80ºC (2min) – 40ºC/min – 140ºC (0min) – 10ºC/min - 
 280ºC (5min) 
Volume de injeção : 1µl 
Modo de ionização : Impacto Eletrônico 
Temp. Fonte de íon : 200ºC 
Temp. Interface : 280ºC 
Modo de aquisição : Full scan 
Intervalo de scan : 0,5 seg 
Solvent Cut Time : 5min 
Tempo de aquisição : 5.5 – 21 min 
Faixa de Massa : 60 – 400 a.m.u 
Split ratio : 20 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 56
Exercício 2: “Determinação de pesticidas por modo de Monitoração de Íon 
Selecionado (SIM)” 
 
Objetivos: 
 
• Aprender como ajustar os parâmetros do instrumento para análise em modo SIM 
• Aprender como preparar curva de calibração usando software GCMSsolution 
• Aprender a determinar as quantidades dos compostos alvos em uma amostra desconhecida 
 
Solução padrão 
 
• CALSTD1 
• CALSTD2 
• CALSTD3 
 
Condições Analíticas 
 
Baseado nos dados do exercício No. 1, complete a tabela abaixo. 
 
No. Nome do 
Composto 
T.R. m/z característico Grupo Tempo 
inicial 
Tempo 
final 
1 
2 
3 
4 
5 
6 
7 
8 
9 
10 
11 
12 
13 
14 
15 
16 
17 
18 
19 
20 
 
 
Temperatura do injetor : 250ºC 
Coluna : Rtx-5MS, 30m x 0.25mm I.D. x 0.25µm df 
Gas de arraste : Helium 99,9999% purity 
Modo de injeção : Splitless (sampling time = 2min) 
High Pressure mode : 300kPa (2.3 min) 
Control de gas de arraste : Constant Linear Velocity 
 57
Velocidade linear de gas de arraste : 45 cm/séc 
Programa de forno de coluna : 80ºC (2min) – 40ºC/min – 140ºC (0min) – 10ºC/min - 
 280ºC (5min) 
Injection Volume : 1µL 
Modo de ionização : Impacto Eletrônico 
Temp. Fonte de íon : 200ºC 
Temp. Interface : 280ºC 
Modo de aquisição : SIM 
Intervalo de scan : 0,2 seg 
Solvent Cut Time : 5min 
Tempo de aquisição : Use a tabela de composto acima (tempo inicial e final 
 do grupo) 
Número de massa : Use m/z característicos da tabela de composto acima 
Split ratio : 20