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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 1 UTILIZAÇÃO DO MICROSCÓPIO DE LUZ Profa. Aparecida Zerbo Tremacoldi OBJETIVOS: � Conhecer e aprender como manusear corretamente o microscópio de luz. � Exercitar, identificando e citando as funções de cada componente do microscópio de luz. � Relacionar a imagem formada e os aumentos obtidos com o funcionamento do sistema óptico. A capacidade de ver, separados ou distintos, dois objetos que se encontram muito próximos um do outro, depende do grau de contraste entre eles e do poder de resolução do processo de visão. No caso do olho humano, desarmado e em condições ótimas de visão, o limite de resolução é de 0,1 mm, isto é, se dois pontos estiverem separados por uma distância igual ou superior a 0,1 mm, o olho humano será capaz de perceber dois pontos distintos. A uma distância menor, veremos apenas um único ponto. O microscópio de luz comum é um instrumento formado por duas lentes convergentes que permite um poder de resolução de 0,2µm, cerca de 500 vezes maior do que o olho humano. UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 2 UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 3 UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 4 DESCRIÇÃO DOS COMPONENTES DO MICROSCÓPIO O microscópio é constituído, basicamente, por dois sistemas: o óptico, formado pelas lentes, e o mecânico, que sustenta o sistema de lentes. A seguir, encontra- se descrita cada uma das partes desses dois sistemas. a) Pé ou Base: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras. b) Coluna ou Braço: é a peça que liga a base à parte superior do microscópio. c) Platina ou Mesa: é uma peça de formato retangular disposta paralelamente à base do microscópio. Esta peça destina-se à recepção da lâmina contendo o material para estudo. No centro da platina existe uma abertura par a passagem da luz. Associada à platina encontra-se uma peça composta de dois controles cuja função é movimentar a lâmina nos eixos X e Y. Os dois controles estão dispostos lateralmente à platina, um sobre o outro, sendo o de diâmetro menor o controle do eixo X, que permite o deslizamento da lâmina da esquerda para a direita, e o de diâmetro maior, o controle do eixo Y, que é o responsável pelo movimento da lâmina para frente e para trás. Acoplada a esta peça há uma presilha ou pinça que permite o encaixe da lâmina. d) Cabeçote: é a parte superior do microscópio onde se localizam dois tubos, sendo que em suas extremidades encaixam-se as lentes oculares. Entre os dois tubos localiza-se a escala de ajuste de distância interpupilar. No tubo esquerdo encontra-se o anel de ajuste de dioptrias. O cabeçote é uma peça frágil que não deve ser usada como apoio e em hipótese alguma ser utilizado para transportar o microscópio. e) Revólver ou porta-objetivas: é uma peça circular na qual se inserem as lentes objetivas. Está localizada abaixo do cabeçote e é dotada de movimento de rotação. O disco negro do porta objetivas possui ranhuras para que o observador possa girá-lo para mudanças de objetivas. Não se deve tocar nas objetivas para a mudança das mesmas. f) Controles macrométrico e micrométrico: nas laterais do braço existem dois controles encaixados um no outro. O de maior diâmetro é o controle macrométrico, que permite grandes avanços ou recuos da platina em relação à objetiva. O controle de menor diâmetro é o micrométrico, que permite pequenos avanços ou recuos da platina. UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 5 g) Oculares: são as lentes superiores que se encaixam nos tubos. Nas oculares são encontrados os seguintes dados: 10X – indica o aumento da lente ocular; 20 – número de campo – este valor é utilizado para calcular o diâmetro do campo de visão e está associado com o aumento de cada objetiva. Por exemplo: se a objetiva de 40X estiver encaixada, para calcular o diâmetro do campo de visão basta dividir o número de campo da ocular (20) pelo aumento da objetiva (40). O resultado é 0,5mm, que indica o diâmetro do campo explorado pela objetiva. Estas oculares permitem também o trabalho do observador que usa óculos sem a necessidade de retirá-los. h) Objetivas: são as lentes que se encontram encaixadas no revólver e são responsáveis pelo aumento e pela resolução da imagem. Este modelo está equipado com quatro objetivas plana acromáticas (5X, 10X, 40X, 100X), que além da correção cromática corrige a curvatura de campo, produzindo um campo de observação com o centro e a periferia simultaneamente em foco. Nas objetivas estão impressos dados como aumento, abertura numérica, e outros. Por exemplo, na objetiva 40X, além do número 40 que indica o aumento, encontramos a inscrição (∞) que indica que a objetiva está corrigida para tubo de qualquer extensão, ou seja, podemos acoplar uma máquina fotográfica ou uma câmara digital, que sempre a imagem projetada estará em foco. O valor 0,17, impresso abaixo do aumento, indica que a objetiva está corrigida para lamínulas com espessuras de até 0,17 mm. O sinal (-) nas objetivas de 10X, 20X e 100X indica que as mesmas podem ser utilizadas em focalizações com ou sem lamínulas. Na objetiva de 100x existe a inscrição oil e a tarja negra indicando que essa objetiva trabalha com óleo de imersão. i) Condensador: é um conjunto de lentes situado abaixo da platina que concentra e torna paralelo o feixe luminoso, fornecendo luz necessária à iluminação do objeto em estudo. O controle do ajuste do condensador está localizado lateralmente, à esquerda e abaixo da platina. Este controle permite a movimentação do condensador que dever ser mantido na posição mais elevada para a obtenção de uma iluminação máxima. j) Diafragma ou Íris: é uma peça regulável e associada ao condensador que controla a quantidade de luz que entra no condensador. k) Filtro: é um disco de vidro azul fixado abaixo do diafragma e que permite a conversão da iluminação de halogênio em luz branca, exibindo a amostra em suas cores naturais.UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 6 l) Fonte de luz: consiste em uma lâmpada halógena embutida na base do microscópio. O interruptor principal que liga a lâmpada localiza-se na lateral direita do braço. Abaixo do interruptor encontra-se o botão seletor de intensidade luminosa, que permite regular a intensidade da luz. ROTEIRO PROCEDIMENTO CORRETO PARA A FOCALIZAÇÃO DO MICROSCÓPIO DE LUZ 1. Abaixe a platina usando o controle macrométrico, gire o revólver, encaixando a objetiva de menor aumento (5X). Verifique pelo ruído característico do encaixe se a objetiva está realmente encaixada. 2. Pegue a lâmina a ser observada, segurando-a apenas pelas bordas. Verifique se a lamínula está voltada para cima. 3. Abra a presilha e coloque a lâmina sobre a platina, encaixando-a perfeitamente. Solte a presilha e verifique se a lâmina está bem encaixada. Centralize o material no orifício da platina, utilizando os controles dos eixos X e Y. 4. Verifique se o controle de intensidade da luz encontra-se no mínimo. 5. Certifique se o condensador encontra-se em sua posição mais elevada. 6. Acenda a lâmpada do microscópio e ajuste a intensidade da luz. 7. Levante a platina movimentando o controle macrométrico até o seu ponto máximo. 8. Ajuste a distância interpupilar movimentando com cuidado os tubos no cabeçote, abrindo ou fechando conforme a necessidade. 9. Agora, observando através das oculares e utilizando o controle macrométrico, abaixe lentamente a platina, até que o material a ser observado seja visto. Assim que isto ocorrer, corrija a focalização utilizando somente o controle micrométrico. UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 7 10. Caso seja necessário, ajuste as diferenças que podem ocorrer entre os olhos esquerdo e direito (dioptrias) através do anel de correção de dioptrias no tubo esquerdo. 11. Explore o material, movimentando os controles dos eixos X e Y com a mão direita e o controle micrométrico com a mão esquerda. Obs: Antes de passar para a objetiva de aumento imediatamente superior, coloque sempre o material a ser analisado no centro do campo de observação. 12. Encaixe a objetiva de 10X e faça o ajuste de focalização, utilizando apenas o controle micrométrico. Observe o campo atentamente. 13. Selecione uma determinada área do material, centralize-a e encaixe a objetiva de 40X. Faça o ajuste de focalização utilizando apenas o controle micrométrico. 14. Terminada a observação, reduza a intensidade da luz, desligue a lâmpada, gire o revólver para encaixar a objetiva de menor aumento passando pela objetiva de 10X e retire a lâmina. 15. Abaixar a platina. UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 8 MICROSCÓPIO DE LUZ - EXERCÍCIO! Esquema de um microscópio de luz mostrando seus diversos componentes UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 9 A. Observe os esquemas anteriores de um microscópio de luz e escreva o nome e a função de cada componente. NÚMERO NOME FUNÇÃO 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 10 B. Funcionamento do Sistema Óptico - Monte uma lâmina com a letra “a” e coloque- a sobre a platina, mantendo a letra na posição em que ela é lida normalmente. - Focalize conforme o procedimento correto para focalização. - Observe a posição da imagem da letra formado com a objetiva de 5X - Após a observação, complete os itens abaixo: a) Faça os esquemas da posição e do tamanho da letra observada à vista desarmada e nos aumentos de 100X e 200X Lâmina Aumento: 100X Aumento: 200X a) Quais são as diferenças entre as imagens observadas da letra com a vista desarmada e ao microscópio? _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ b) Quais são as características da imagem formada pela lente e objetiva em relação ao objeto? __________________________________________________________________ c) Quais são as características da imagem formada pela lente ocular? __________________________________________________________________ E) Por que é recomendado centralizar o material no campo de observação a cada mudança de objetiva? UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE COLEGIADO DE MEDICINA MÓDULO DE HABILIDADES CLÍNICAS E ATITUDES Elaborado pela Comissão de Planejamento do Módulo de Habilidades Clínicas e Atitudes Profa. Aline Schmitt’ Profa. Aparecida do Carmo Zerbo Tremacoldi Profa. Mércia Margotto Profa. Mônica Raiol Profa. Viviane Rocha 2005 11 REFERÊNCIA: Araújo, EF et. al. Apostila de “Práticas de Biologia Celular” da disciplina de Biologia Celular. Viçosa: Departamento de Biologia Geral, Universidade Federal de Viçosa, 2002. 96 p.
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