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Aula prá)ca 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura ELEMENTO FONTE % PESO SECO C CO2, açúcares, ácidos orgânicos, etc. 50 O O2, atmosfera, H2O 20 N N2, NO3, NH3, aas, bases nitrog. 14 H H2, atmosfera, H2O, comp. orgânicos 8 P Fosfato inorgânico (PO43-) 3 S Sulfato, H2S, sulfetos metálicos 1 K Solo, sais 1 Na Solo, sais 1 Ca Solo, sais 0,5 Mg Solo, sais 0,5 Fe Solo, sais 0,2 Outros Solo, sais 0,3 Composição aproximada de elementos químicos de uma célula bacteriana - E. coli Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA 1) Característica física • Sólido • Líquido • Semi-sólido Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura 2) Composição química: • Sintético ou quimicamente definido: todos os componentes e quantidades são conhecidos. • Complexo: contém componentes cuja composição não é precisa. Exemplos: extrato de carne, extrato de levedura, peptona, sangue, leite, etc. MBI 100 Aula prática 5 CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura • Diferencial: permite a distinção de colônias. • Seletivo: contém agente inibidor que impede o desenvolvimento de determinado microrganismo. • Meio de enriquecimento: aumenta o número de determinado microrganismo em uma amostra. • Meio redutor: apresenta menor tensão de O2. 3) Função CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Meio diferencial – Ágar Sangue Colônia não hemolítica Colônia hemolítica Colônia não hemolítica MBI 100 Aula prática 5 EXEMPLOS Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Meio seletivo e diferencial – Chromagar ü Diferenciar espécies de Candida C. albicans C.glabrata C. tropicalis C. krusei Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Meio seletivo e diferencial para enterobactérias – Ágar EMB Lactose negativo Lactose positivo Brilho verde metálico e lactose positivo Colônia típica de Escherichia coli Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Fatores do ambiente que afetam o crescimento microbiano a) Atmosfera b) Temperatura c) pH d) Disponibilidade de água Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Efeito da atmosfera de incubação – presença ou ausência de O2 a) Aeróbios obrigatórios b) Anaeróbios obrigatórios c) Anaeróbios facultativos d) Microaerófilos e) Aerotolerantes Ex.: Escherichia coli Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Cultivo de micro-organismos anaeróbios MBI 100 Aula prática 5 Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Métodos utilizados para a esterilização de meios de cultura e outros materiais usados em microbiologia Autoclave Estufa de estelização Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura - calor úmido - calor seco Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Funcionamento de uma autoclave Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Cabine de segurança microbiológica – Fluxo laminar ü Esterilização por radiação UV: ar e superfície ü Manipulação asséptica de culturas e materiais Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Esterilização de substâncias termolábeis por sistemas de filtração Aula 4: Preparo e esterilização de meios de cultura Diâmetro do poro 0,22 µm Micrografia de uma membrana filtrante
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