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Meios de cultura

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Aula	
  prá)ca	
  4:	
  	
  
Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  de	
  cultura	
  
	
  
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
ELEMENTO FONTE % PESO SECO 
C CO2, açúcares, ácidos orgânicos, etc. 50 
O O2, atmosfera, H2O 20 
N N2, NO3, NH3, aas, bases nitrog. 14 
H H2, atmosfera, H2O, comp. orgânicos 8 
P Fosfato inorgânico (PO43-) 3 
S Sulfato, H2S, sulfetos metálicos 1 
K Solo, sais 1 
Na Solo, sais 1 
Ca Solo, sais 0,5 
Mg Solo, sais 0,5 
Fe Solo, sais 0,2 
Outros Solo, sais 0,3 
Composição aproximada de elementos químicos 
de uma célula bacteriana - E. coli 
	
  
Aula	
   4:	
   Preparo	
   e	
   esterilização	
   de	
   meios	
   de	
  
cultura	
  
	
  
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA 
1) Característica física 
•  Sólido 
•  Líquido 
•  Semi-sólido 
	
  
Aula	
   4:	
   Preparo	
   e	
   esterilização	
   de	
   meios	
   de	
  
cultura	
  
	
  
2) Composição química: 
•  Sintético ou quimicamente definido: todos os 
componentes e quantidades são conhecidos. 
•  Complexo: contém componentes cuja composição 
não é precisa. 
 Exemplos: extrato de carne, extrato de levedura, peptona, 
sangue, leite, etc. 
 
MBI 100 Aula prática 5 
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA 
	
  
Aula	
   4:	
   Preparo	
   e	
   esterilização	
   de	
   meios	
   de	
  
cultura	
  
	
  
•  Diferencial: permite a distinção de colônias. 
•  Seletivo: contém agente inibidor que impede o 
desenvolvimento de determinado microrganismo. 
•  Meio de enriquecimento: aumenta o número de 
determinado microrganismo em uma amostra. 
•  Meio redutor: apresenta menor tensão de O2. 
 3) Função 
CLASSIFICAÇÃO DOS MEIOS DE CULTURA 
	
  
Aula	
   4:	
   Preparo	
   e	
   esterilização	
   de	
   meios	
   de	
  
cultura	
  
	
  
Meio diferencial – Ágar Sangue 
Colônia não 
hemolítica 
Colônia 
hemolítica 
Colônia não 
hemolítica 
MBI 100 Aula prática 5 
EXEMPLOS 
	
  
Aula	
   4:	
   Preparo	
   e	
   esterilização	
   de	
   meios	
   de	
  
cultura	
  
	
  
Meio seletivo e diferencial – Chromagar 
 
ü  Diferenciar espécies de Candida 
 
C. albicans C.glabrata C. tropicalis C. krusei 
	
  
Aula	
   4:	
   Preparo	
   e	
   esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
Meio seletivo e diferencial para enterobactérias – 
Ágar EMB 
Lactose 
negativo 
Lactose 
positivo 
Brilho verde 
metálico e lactose 
positivo 
 
Colônia típica de 
Escherichia coli 
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
Fatores	
  do	
  ambiente	
  que	
  afetam	
  o	
  
crescimento	
  microbiano	
  
a) 	
  Atmosfera	
  
b) 	
  Temperatura	
  
c)  	
  pH	
  
d) 	
  Disponibilidade	
  de	
  água	
  
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
Efeito da atmosfera de incubação – 
presença ou ausência de O2 
a)  Aeróbios obrigatórios 
b)  Anaeróbios obrigatórios 
c)  Anaeróbios facultativos 
d)  Microaerófilos 
e)  Aerotolerantes 
Ex.: Escherichia coli 
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
Cultivo de micro-organismos anaeróbios 
 
MBI 100 Aula prática 5 
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
Métodos utilizados para a 
esterilização de meios de cultura e 
outros materiais usados em 
microbiologia 
Autoclave Estufa de estelização 
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
- calor úmido - calor seco 
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
Funcionamento de uma autoclave 
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
Cabine de segurança microbiológica – Fluxo laminar 
ü  Esterilização por 
radiação UV: ar e 
superfície 
 
ü  Manipulação asséptica 
de culturas e materiais 
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
Esterilização de substâncias termolábeis por 
sistemas de filtração 
	
  
Aula	
  4:	
  Preparo	
  e	
  esterilização	
  de	
  meios	
  
de	
  cultura	
  
	
  
Diâmetro do poro 0,22 µm 
Micrografia 
de uma 
membrana 
filtrante

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