aula tgo e tgp

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FACULDADE DE MEDICINA – PUC-Campinas 
DISCIPLINA DE BIOQUÍMICA B – AULA PRÁTICA 10 – Profa. Dra. Celene Fernandes Bernardes 
 
ANÁLISE DE TRANSAMINASES 
 
As transaminases ou Aminotransferases constituem enzimas que catalisam especificamente a reação 
de transminação (transferência de um grupo amina de um aminoácido para um cetoácido). 
 
http://www.4shared.com/all-images/WpCoV_T7/METABOLISMO_.html 
 
As aminotransferases de importância clínica são: Aspartato cetoglutarato amino transferase (AST) ou 
transminase glutâmico oxalacético (TGO) e alanina cetoglutarato aminotransferase (ALT) ou transminase 
glutâmico pirúvica (TGP ). Encontram-se amplamente distribuídas nas células, especialmente no fígado 
(predomínio de ALT), no miocárdio e, em menor proporção, nos rins e músculo esquelético, mas a taxa 
sanguínea é baixa. O nível destas enzimas no plasma sanguíneo aumenta em casos de lesões celulares. 
Aumento da permeabilidade da membrana do hepatócito, decorrente por exemplo de hepatites agudas, 
overdose de paracetamol ou hipóxia, resulta em liberação das enzimas para o sangue e aumento 
significativo (de 10 a 100 vezes superior ao limite normal) no plasma sanguíneo. A ALT (TGP) é 
exclusivamente citoplasmática enquanto a AST (TGO) é citoplasmática e mitocondrial (80%). Em 
adultos, atividades de AST e ALT são significantemente maiores no sexo masculino e varia com a faixa 
etária. O infarto agudo do miocárdio acarreta aumento de AST (TGO) no plasma, de 4 a 10 vezes maior 
que o limite normal, atingindo o pico no segundo dia após o infarto. 
 
ALT 
Alanina aminotransferase (TGP = ALT) – método cinético – kit laborlab 
 
Método de análise: O reativo de trabalho é constituído de alanina + oxoglutarato + NADH + enzima 
desidrogenase e a identificação da atividade da enzima é proporcional à formação de NAD oxidado, que 
pode ser determinado espectrofotometricamente. 
 
L-alanina + 2-oxoglutarato 
ALT 
 glutamato + piruvato 
Piruvato + NADH 
desidrogenase
 lactato + NAD
+ 
 
1. Identificar um tubo de ensaio como ALT e colocar 1,0mL de reativo de trabalho específico para 
análise de ALT. 
2. Acrescentar 100µL de amostra de soro sanguíneo e homogeneizar. 
3. Colocar em banho-maria a 37ºC por 5 minutos. 
4. Verificar absorbância em 365nm, com o espectrofotômetro calibrado com água destilada. 
Absorbância inicial = ___________ 
5. Verificar a absorbância novamente após 1, 2 e 3 minutos. 
Absorbância 1 = _____________ 
Absorbância 2 = _____________ 
Absorbância 3 = _____________ 
6. Calcular as diferenças de absorbância por minuto ( A/minuto = ____________) 
7. Multiplicar o A/minuto pelo fator 20000 e determinar a atividade da enzima ALT na amostra 
analisada = ___________________ 
Valores de referência : 3 a 50 U/L 
Aspartato aminotransferase (TGO = AST) – método cinético – kit laborlab 
 
Método de análise: O reativo de trabalho é constituído de aspartato + oxoglutarato + NADH + enzima 
desidrogenase e a identificação da atividade da enzima é proporcional à formação de NAD oxidado, que 
pode ser determinado espectrofotometricamente. 
 
L-aspartato + 2-oxoglutarato 
AST
 glutamato + oxaloacetato 
oxaloacetato + NADH 
desidrogenase
 malato + NAD
+ 
 
1. Identificar um tubo de ensaio como AST e colocar 1,0mL de reativo de trabalho específico para 
análise de AST. 
2. Acrescentar 100µL de amostra de soro sanguíneo e homogeneizar. 
3. Colocar em banho-maria a 37ºC por 5 minutos. 
4. Verificar absorbância em 365nm, com o espectrofotômetro calibrado com água destilada. 
Absorbância inicial = ___________ 
5. Verificar a absorbância novamente após 1, 2 e 3 minutos. 
Absorbância 1 = _____________ 
Absorbância 2 = _____________ 
Absorbância 3 = _____________ 
6. Calcular as diferenças de absorbância por minuto ( A/minuto = ____________) 
7. Multiplicar o A/minuto pelo fator 5000 e determinar a atividade da enzima AST na amostra analisada 
= ___________________ 
Valores de referência : homens = 0 a 37 U/L mulheres = 0 a 31 U/L