Microscopia

Prévia do material em texto

ÓPTICA GEOMÉTRICA: REFLEXÃO
ÓPTICA GEOMÉTRICA: REFRAÇÃO 
n = c/v
lei de snell 
Luz branca v = λ f
n = c/v
ÓPTICA GEOMÉTRICA: LENTES 
DIFRAÇÃO
Difração é o espalhamento da luz que acontece quando a luz passa por objetos 
ou aberturas bem pequenas. Após a luz ser espalhada pelo objeto tem-se uma 
padrão de difração que consiste em máximos e mínimos de intensidade.
senθ = 1.22(λ/d) abertura / objeto circular ->
MICROSCÓPIOS
lâmpada e condensador
MICROSCÓPIOS 
ocular
objetiva
MICROSCÓPIOS 
1680 1700 1845
1998
MICROSCÓPIOS 
1900 1930
1960
1970
1971 1985
1998
MICROSCÓPIOS 
lâmpada e condensador
ocular
objetiva e foco
ocular
objetiva e foco
lâmpada e condensador
direto invertido
Transmissão vs. Reflexão
MICROSCÓPIOS -> FORMAÇÃO DA IMAGEM 
MICROSCÓPIOS ANTIGOS: 
h
H
f‘ X Xfm
X
=
MICROSCÓPIOS -> FORMAÇÃO DA IMAGEM 
MICROSCÓPIOS MODERNOS: 
fobj
ftuboh
H
fobj
ftuboh
H
obj
tubo
f
m
f
=
Sample being imaged
Primary Image Plane
Objective
Other optics
Ocular
Other optics
Tube Lens The main advantage of 
infinity corrected lens 
systems is the relative 
insensitivity to additional 
optics within the tube 
length. 
x = good combination
---------xx100X(1.40)
------xxx60X(0.95)
------xxx40X(0.70)
---xxxx25X(0.55)
xxxxx10X(0.35)
xxx------4X(0.12)
xx---------2.5X(0.08)
25x20x15x12.5x10x(NA)
EyepiecesObjective
MICROSCÓPIOS -> FONTES
OBJETIVAS 
NA = raio/foco = r/f = n sen θ -> 
Lei de seno de Abbe para microscópios -> aberração 
e formação correta das imagens -> sistema 
aplanético.
ABERTURA NUMÉRICA
CAMPO DE VISÃO
Quanto maior for a abertura numérica, maior é o ângulo de abertura do cone de 
luz formado. A abertura numérica, o aumento e o campo de visão de uma 
objetiva estão relacionados. O campo de visão cai com o aumento da objetiva e 
aumenta com sua abertura numérica.
DIFRAÇÃO E RESOLUÇÃO
d senθ = 1.22 λ mas senθ = R/f -> d R/f = 1.22 λ -> 2 r R/f= 1.22 λ −>
2 NA R = 1.22 λ - > R = 0.61 λ /NA
FEIXE E OBJETO
LARGURA
MICROSCÓPIOS -> OBJETIVAS
maior o aumento, maior é a abertura 
numérica e menor é a distância de trabalho. 
quanto maior o aumento, melhor é a resolução.
melhores objetivas 40X, 60X, 100X – maiores 
aberturas numéricas – imersão a água.
R = 0.61 λ / NA
Os parâmetros que definem as propriedades das objetivas são: aumento, 
abertura numérica, distância de trabalho e se são de imersão em óleo ou água. 
NA = n sen θ
CONDENSADORES
MICROSCÓPIOS -> OBJETIVAS
IMERSÃO
sin c = 1/n n = 1.5 c = 40o -> 0.7 
IMERSÃO
TRABALHANDO COM CÉLULAS VIVAS