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9/25/2013 1 Membranas Celulares: Estrutura Qual a principal função das membranas celulares? Procariotos única membrana; Eucariotos organelas membranosas; DELIMITAÇÃO DOS ESPAÇOS CELULARES: Intracelular vs extracelular; ou Citoplasmático vs não citoplasmático; BARREIRAS SELETIVAS: Nutrientes entram; Excreções saem; A bicamada lipídica Composição das membranas: Proteínas e lipídeos; Interações com o meio (água); Forças de interação hidrofílicas e hidrofóbicas. Estrutura geral 9/25/2013 2 Fosfolipídios Outros tipos de lipídios de membrana Característica em comum: anfipaticidade A bicamada lipídica Hidrofobicidade 9/25/2013 3 Formação espontânea de aglomerados Bicamada lipídica: lipossoma vsmicela Selagem espontânea Exposição das cadeias lipídicas: Estado energético desfavorável; Porque adota uma forma redonda? Flexibilidade: vesículas de até 25 nm. Membranas artificiais • Permitem estudo de: • Permeabilidade; • Fluidez (≠ flexibilidade); 9/25/2013 4 Fluidez da membrana Depende da composição e da temperatura; Colesterol: Rigidez (estruturas anelares dos esteroides planares); Intercalam no espaço gerado pela insaturação; Hidrocarbonetos: Longos aumento de interações entre as cadeias diminuição da fluidez; Insaturados dificultam o empacotamento aumentam a fluidez. Importância da fluidez: Permeabilidade; Difusão de proteínas e lipídios recém-sintetizados; Interação entre proteínas (sinalização celular, p.e.); Fusão de vesículas; Distribuição de moléculas de superfície durante divisão celular. O contrário também é válido: Rigidez também é importante em certas ocasiões; Lipid Rafts (jangadas de lipídeos); Plataformas para ligação de proteínas durante a sinalização celular. Lipid raft 1- Membrana não “raft”; 2- Membrana “raft; 3- (Glico)proteína integral em um “raft”; 4- Proteína integral fora de um “raft”; 5- Glicosilações (glicoproteínas e glicolipídeos); 6- Proteína ancorada à GPI 7- Colesterol; 8- Glicolipídio As camadas lipídicas são assimétricas Face citoplasmática ≠ não-citoplasmática; Fosfatidilcolina; Esfingomielina; Fosfatidilserina; Fosfatidilinositol; Fosfatidiletanolamina; Glicolipídeos; Colesterol. • Glicolipídios Face extracelular; • Exceção Fosfatidilinositol; • Sinalização celular; 9/25/2013 5 Assimetria preservada no transporte de vesículas! Camadas citosólicas sempre serão citosólicas, e vice-versa! Proteínas de membrana Responsáveis pela maior parte das funções das membranas; Aprox. 50% da massa total da MP; Associação das proteínas de membrana Proteínas ancoradas a lipídeos Ligações amida e tio éter; 9/25/2013 6 Proteínas de membrana Integrais: Diretamente ligadas aos lipídeos; Extração por meio de detergentes; Periféricas: Associadas ou ancoradas a outras macromoléculas da membrana; Proteínas transmembrânicas Normalmente atravessam a membrana como uma α-hélice; Cadeias laterais hidrofóbicas; Esqueleto carbônico faz pontes de H. Proteínas que formam poros Extração de proteínas de membrana SDS Triton X-100 9/25/2013 7 Bacteriorodopsina Microscopia eletrônica de proteínas de membrana CRIOFRATURA Córtex celular Qual seria a mobilidade das proteínas transmembranares destacadas? Difusão e restrição de proteínas na membrana Difusão Restrição Domínios de membranas 9/25/2013 8 Medição da difusão lateral por photobleaching Células são cobertas de açúcares Glicolipídeos e glicoproteínas, proteoglicanos; Camada de carboidrato; Hidratação escorregadia impede a formação de aglomerados celulares não desejados; Lectinas são receptores de carboidratos
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